Molecular identification of non-conventional yeasts and the screening for α-terpineol assimilation: Identificação molecular de leveduras não convencionais e triagem para assimilação de α-terpineol

The present research aimed to analyze the potential consumption of a monoterpene compound, α-terpineol, by aroma-producing Yeasts. For this purpose, 23 non-conventional yeasts were selected and identified by molecular tools. Subsequently, a screening test was performed to evaluate their tolerance to α-terpineol, by cultivating them in YM broth, at pH 5.0, for 48 h. A mixture of α-terpineol and ethyl alcohol was added to the broth in concentrations ranging from 2.5 to 10.0 μL/mL (intervals of 2.5). The yeasts that survived any of these concentrations were cultured again, but this time in mineral DP liquid culture medium to assess the consumption of α-terpineol. TLC analysis was conducted to analyze the consumption of α-terpineol. The yeasts studied were identified as Clavispora lusitaniae (n=12), Rhodotorula mucilaginosa (n=8), and Lodderomyces elongisporus (n=3). Furthermore, according to the phylogenetic tree, two of these strains (C. lusitaniae and L. elongisporus) have greater genetic proximity than the yeast R. mucilaginosa. From the 23 yeasts, 6 of them were shown to be tolerant to the concentration of 2.5 μL/mL of α-terpineol. The tolerant strains were identified as C. lusitaniae (n = 1), L. elongisporus (n = 2), and R. mucilaginosa (n = 3). However, the yeast that resisted the highest concentration, R. mucilaginosa, was only 12 hours in all concentrations. It is more likely that the defense mechanism of the yeast was not able to prevent further damage to the membrane as the time in contact with α-terpineol increased. The TLC results showed that the extracts from R. mucilaginosa (CMRP3205) and L. elongisporus (CMRP3192) could be interpreted as potentially promising results of new compounds production by the yeasts

Sinergismo entre ácidos orgânicos e sorbato de potássio no controle de Aspergillus flavus

Devido aos riscos de contaminação por micotoxinas, o controle fúngico em alimentos deve ser adotar medidas desde o início do desenvolvimento microbiano. A substituição de fungicidas químicos por ácidos orgânicos (geralmente reconhecidos como seguro) desponta como uma perspectiva interessante. A pesquisa teve como objetivo determinar concentração inibitória mínima (CIM) de ácidos orgânicos, sorbato de potássio e respectivas combinações no controle de Aspergillus flavus NRRL 3251 produtor de aflatoxina B1. O inóculo de 104 esporos.mL-1 foi calculado baseado na contaminação real em milho e ração animal. As melhores CIM in vitro foram: combinação de ácido acético (AA 83,26 mM) + propiônico (AP 6,74 mM); AA (8,32 mM) + sorbato de potássio (SP 13,31mM) e AP (6,74 mM) + SP (33,28 mM). Considerando a dose comercialmente utilizada de ácido propiônico 0,5%, a combinação do ácido propiônico com sorbato de potássio e ácido acético poderia reduzir respectivamente cerca de 24,63 e 70,19% o custo em conservante

Ácidos Orgânicos e Compostos Clorados para Controle de Salmonella spp. em frangos

O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade de ácidos orgânicos e compostos clorados comerciais para o controle de Salmonella spp. A concentração inibitória mínima (CIM) do dióxido de cloro, dicloro isocianurato de sódio e ácidos tricloro isocianúrico, lático e peracético foi determinada para cepas padrões de S. Enteretidis, S. Typhimurium e a S. Heidelberg e avaliada com 54 cepas isoladas de frigorífico e o produto com melhor desempenho foi avaliado em água de chiller artificialmente contaminada com Salmonella spp. Entre os clorados, apenas o dicloro isocianurato (60 ppm) foi capaz de inibir Salmonella spp. A CIM dos ácidos lático e peracético variou de 0,5 a 2,0%. Os ácidos peracético (1,0%) e lático (2,0%) foram capazes de inibir 98,14 e 100% das cepas isoladas, respectivamente. O ácido lático a 2,0% foi capaz de inibir completamente o crescimento das três cepas padrões de Salmonella spp. inoculadas na água do chiller. Os dados reforçam a necessidade de discussões para regulamentar o uso do ácido lático na tecnologia de abate de aves

RESÍDUO DE FLUOROQUINOLONA EM CARNE DE FRANGO E EFEITO DA MISTURA DE FEZES NA RESISTÊNCIA DE Salmonella Heidelberg À ENROFLOXACINA: Resíduo de fluoroquinolona em carne de frango

O objetivo deste trabalho foi validar uma metodologia para detecção de enrofloxacina em tecidos de frango e pesquisar a influência da mistura de fezes de frango na resistência de Salmonella spp. à enrofloxacina. Enrofloxacina (10 mg.kg-1) foi administrado oralmente e os tecidos (músculo, fígado e rim) coletados até o 10º dia da última dose e analisados por LCMS. Um total de 124 amostras de fezes foram coletadas da cama de aviários foram submetidas ao isolamento de Salmonella spp. e paralelamente, a mistura fecal foi adicionada de solução contendo enrofloxacina (10 μg.mL-1) e Salmonella spp. isolada e identificada. O limite de quantificação e detecção de LCMS foram 20 e 10 μg.kg-1, respectivamente e o tempo de depleção nos tecidos foi de 3 dias. Quando exposta à enrofloxacina na presença de mistura fecal, Salmonella Heidelberg mostrou menor susceptibilidade (39,8%) à enrofloxacina do que quanto exposta isoladamente (100%). Considerando todos os parâmetros de validação analisados, LCMS foi sensível e aplicável à análise de rotina de resíduos de fluoroquinolonas. Diferenças de susceptibilidade à enrofloxacina na presença de material fecal indicam a necessidade de considerar as condições ambientais na resistência de patógenos, principalmente à classes de antimicrobianos de uso na medicina veterinária e humana.El objetivo de este trabajo fue validar una metodología para la detección de enrofloxacino en tejidos de pollo e investigar la influencia de la mezcla de heces de pollo en la resistencia de Salmonella spp. a la enrofloxacina. Se administró enrofloxacina (10 mg.kg-1) por vía oral y se recogieron los tejidos (músculo, hígado y riñón) hasta el décimo día de la última dosis y se analizaron por LCMS. Se recogieron un total de 124 muestras de heces de la cama de las aves y se sometieron a aislamiento de Salmonella spp. y en paralelo, a la mezcla fecal se le añadió una solución que contenía enrofloxacina (10 μg.mL-1) y Salmonella spp. aislado e identificado. El límite de cuantificación y detección de LCMS fue de 20 y 10 μg.kg-1, respectivamente, y el tiempo de agotamiento del tejido fue de 3 días. Cuando se expuso a enrofloxacino en presencia de una mezcla fecal, Salmonella Heidelberg mostró menos susceptibilidad (39,8%) a enrofloxacino que cuando se expuso sola (100%). Teniendo en cuenta todos los parámetros de validación analizados, LCMS fue sensible y aplicable al análisis de rutina de los residuos de fluoroquinolonas. Las diferencias en la susceptibilidad al enrofloxacino en presencia de materia fecal indican la necesidad de considerar las condiciones ambientales en la resistencia de los patógenos, principalmente a las clases de antimicrobianos utilizados en medicina veterinaria y humana.The objective of this work was to validate a methodology for the detection of enrofloxacin and in chicken tissues and to investigate the influence of the mixture of chicken feces on the resistance of Salmonella spp. to enrofloxacin. Enrofloxacin (10 mg.kg-1) was administered orally, tissues (muscle, liver and kidney) were collected until the 10th day of the last dose and analyzed by LCMS. A total of 124 feces samples were collected from poultry litter and Salmonella spp were isolated and in parallel, feces were added of a solution containing enrofloxacin (10 μg.mL-1) followed by Salmonella spp. isolation and identification. The limit of quantification and detection of the LCMS was 20 and 10 μg.kg-1, respectively, and the withdrawal period was 3 days. When exposed to enrofloxacin in the presence of a fecal mixture, Salmonella Heidelberg showed less susceptibility (39.8%) to enrofloxacin than when exposed alone (100%). Considering all the validation parameters analyzed, this LCMS was sensitive and applicable to the routine analysis of fluoroquinolone residues. Differences in susceptibility to enrofloxacin in the presence of fecal material indicate the need to consider environmental conditions in the resistance of pathogens, mainly to the classes of antimicrobials used in veterinary and human medicine

Bromatology and fumonisin and aflatoxin contamination in aquaculture feed of the region of Londrina, State of Paraná, Brazil

Com o intuito de suprir a demanda e o progresso na piscicultura, o setor industrial investiu na produção de rações, cuja formulação depende de ingredientes constituídos de grãos susceptíveis à contaminação por fungos micotoxigênicos. O trabalho visou avaliar a composição química (qualidade nutricional), aliada à susceptibilidade ao risco de contaminação por micotoxinas (aflatoxina e fumonisina), em 42 amostras de ração, pertencentes a cinco marcas comerciais, utilizadas nos pesqueiros da Região de Londrina-PR. A análise da composição química indicou qualidade nutricional adequada das rações, não se constatando diferença significativa na composição bromatológica geral entre os tipos de rações extrusada e peletizada (p > 0,05). Os níveis de aflatoxina variaram desde não detectável a 15,60 ng/g, com 61,90% de amostras em níveis 0,05), porém a co-ocorrência de aflatoxina com fumonisina em 23,8% das rações, sugeriu risco de sinergismo tóxico, apontando a importância de monitoramento no controle de micotoxinas na dieta de peixes. Por outro lado, considerando a constante renovação de rações nos pesqueiros, pode-se inferir uma baixa possibilidade do incremento de aflatoxina e fumonisina devido a armazenagem local, devendo o ponto crítico ser direcionado ao estágio de produção de matéria prima no campo e pré-processamento, independentemente de marca ou diferenças nutricionais.With intention to supply the demand and progress of aquaculture, the industrial sector invested in the production of feed, whose formulation depends on grains susceptible for mycotoxigenic fungi. The objective of this work was to evaluate the chemical composition (nutricional quality) associated with the risk of mycotoxin contamination (aflatoxin and fumonisin) in 42 feed samples, belonging to five commercial industries, and used in fishing activity of the Region of Londrina-PR. The analysis of chemical composition indicated adequate nutritional quality of feeds, without significant difference concerning bromatological composition between extruded and pellet feeds (p>0.05). The aflatoxin levels ranged from non-detectable to 15.60 ng/g, where 61.90% showed 0,05), but the aflatoxin/fumonisin co-occurrence in 23.8% feed samples suggested risk of toxic synergism, emphasizing the importance of mycotoxin monitoring in fish feeding quality. Taking into account the continuous renewal of feed in the fishing ones, there is low possibility of aflatoxin/fumonisin production due the storage, therefore the critical point should be targeted on crude material at field to pre-processing stage, independently of mark or nutritional differences

<b>Occurrence of <i>Aspergillus</i> sp., <i>Fusarium</i> sp., and aflatoxins in corn hybrids with different systems of storage

The aim of this study was to assess alternatives for viable corn storage for small rural properties in two annual storage experiments. A 4×5 factorial design was used with four types of storage (conventional bags, hermetic bags, metal silos and corncobs) and five periods of storage (0, 3, 6, 9 and 12 months). We used corn hybrids 2B688RR and 30K73Hx cultivated in winter 2012 and summer 2012/2013 in the city of Dois Vizinhos, Paraná, Brazil. The moisture contents, counts of Aspergillus sp. and Fusarium sp., and the occurrence of aflatoxins (B1, B2, G1 and G2) were assessed. The kernels stored in hermetic bags had lower moisture contents. Aspergillus sp. and Fusarium sp. were observed in 20.37 and 86.11% of winter storage samples, respectively, and in 83.3 and 91.6% of summer storage samples, respectively. The storage system and time of storage had no influence on the occurrence of Aspergillus sp. and aflatoxins in the winter crop samples. The corncobs from the summer crop samples had the lowest counts of Aspergillus sp. and did not have aflatoxins. We detected aflatoxins at concentrations of 2.8-14.5 and 3-197.5 µg kg-1 in the winter and summer crop samples, respectively

Microbial Degradation of Amino Acid-Containing Compounds Using the Microcystin-Degrading Bacterial Strain B-9

Strain B-9, which has a 99% similarity to Sphingosinicella microcystinivorans strain Y2, is a Gram-negative bacterium with potential for use in the degradation of microcystin-related compounds and nodularin. We attempted to extend the application area of strain B-9 and applied it to mycotoxins produced by fungi. Among the tested mycotoxins, only ochratoxin A was completely hydrolyzed to provide the constituents ochratoxin α and l-phenylalanine, and levels of fumonisin B1 gradually decreased after 96 h. However, although drugs including antibiotics released into the aquatic environment were applied for microbial degradation using strain B-9, no degradation occurred. These results suggest that strain B-9 can only degrade amino acid-containing compounds. As expected, the tested compounds with amide and ester bonds, such as 3,4-dimethyl hippuric acid and 4-benzyl aspartate, were readily hydrolyzed by strain B-9, although the sulfonamides remained unchanged. The ester compounds were characteristically and rapidly hydrolyzed as soon as they came into contact with strain B-9. Furthermore, the degradation of amide and ester compounds with amino acids was not inhibited by the addition of ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), indicating that the responsible enzyme was not MlrC. These results suggest that strain B-9 possesses an additional hydrolytic enzyme that should be designated as MlrE, as well as an esterase

Alternativas para um produto cárneo mais saudável: uma revisão

Considerando-se a evidente busca por alimentos de rápido e fácil preparo, as comunidades industrial e científica vêm investindo no desenvolvimento de novos produtos que, além de atenderem a essa demanda, possam oferecer benefícios à saúde do consumidor. Dentre os alimentos que não demandam muito tempo para o preparo no domicílio, o hambúrguer merece destaque, em função do seu elevado consumo. No entanto, em razão de conter gordura saturada e por ser submetido a processo de fritura, o consumo demasiado desse produto pode ser prejudicial à saúde humana, podendo causar doenças crônicas, entre as quais, a obesidade e a hipertensão. Estudos têm demonstrado a possibilidade de substituição de ingredientes na formulação de hambúrgueres, com a intenção de incorporar substâncias com propriedades funcionais; portanto, substâncias que possam contribuir para a saúde e o bem-estar dos consumidores. Nesse contexto, esta revisão aborda questões referentes ao hambúrguer, no sentido de conceituar o produto e, à luz da literatura, oferecer alternativas possíveis e que têm sido estudadas para tornar esse alimento mais saudável, com foco na substituição de gordura animal por fibras e na redução do teor de cloreto de sódio