Microsporidíase em Hospital Universitário no Brasil: relato de caso

Este é o relato de caso de doente com diarréia crônica causada por Microsporidia. O doente era homem, casado, infectado com HIV e tinha baixa taxa de linfócitos CD4+. O diagnóstico foi feito em exame de fezes utilizando métodos de concentração e técnica de coloração de Gram-Chromotrope. Biópsia de íleo também foi realizada neste caso. O diagnóstico etiológico pode ser feito em laboratório clínico, por técnicas de coloração baseada em cromotrope na rotina da observação microscópica direta.This is the report on a patient with chronic diarrhea caused by microsporidia. He is married, infected with HIV and has low CD4 cell count. The diagnosis was established through stool parasite search using concentration methods and Gram - chromotrope staining technique. Ileum biopsy was also performed in this case. The etiological diagnosis may be established in a clinical laboratory, by chromotrope staining technique in routine microscopic examination of stool specimens

Infection by intestinal parasites in disabled patients and their guardians

Introduction: intestinal parasitic infections are common major problem closely related to poverty, inadequate sanitation, insufficient health care and overcrowding. They cause significant morbidity among institutionalized patients, however, there are few studies that analyze the frequency of intestinal parasites in disabled patients that are not institutionalized. Objective: the aim of the present study was to determine the prevalence of intestinal parasitic infection in disabled patients and their guardians. Methodology: a total of 336 fecal samples were collected from 53 disabled patients and history of diarrhea during the study period and 31 guardians, parents and professional staff of Institution. Parasite research was carried out using zinc sulphate centrifugal-flotation technique, Lutz/Hoffman Pons and Janer method, Rugai method and Gram-Chromotrope, Leishman, Kinyoun, Kato-Katz and Trichrome stains were used. Results: we found 15.5% of positive sample for enteroparasites in all analyzed individuals (13/84), with 11.3% (6/53) of prevalence in disabled patients and 22.5% (7/31) for guardians, with significant difference. There was no difference between gender,but there was a higher number of positives in patients between 6 and 11 years of age. Monoparasitism and the presence of protozoa, especially Blastocystis hominis, were the most prevalent conditions. Conclusions: despite the aforementioned intrinsic susceptibility of patients with special needs, the prevalence of intestinal parasites was low. In guardians, the prevalence was higher, suggesting extreme attention to the care process, which may have prevented the transmission to their disabled patients contact

Genotipagem de multilocus de Cryptosporidium hominis associado a surto diarréico em creche de São Paulo

A number of species of Cryptosporidium are associated with diarrhea worldwide. Little data exists regarding the genotypes and species of Cryptosporidium associated with cases of infections in Brazil. PURPOSE: In the present study, we ascertained by molecular methods the species and the genotype of Cryptosporidium sp from a diarrhea outbreak diagnosed in a day care at the Hospital Clínicas, São Paulo University Medical School. MATERIALS AND METHODS: Specific identification and typing of the isolates associated with the outbreak was done by DNA sequencing analysis of fragments amplified by polymerase chain reaction (PCR) from 3 different Cryptosporidium loci: the SSUrRNA coding region, the Cryptosporidium oocyst wall protein (COWP) gene, and the microsatellite locus 1 (ML1), a tandem GAG-trinucleotide repeat containing substitutions that differentiate the genotypes of Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium hominis. RESULTS: A total of 29 positive samples from the outbreak were studied by the molecular methods described. Our study revealed the presence of a single genotype of Cryptosporidium hominis in all samples. CONCLUSION: The molecular analysis reinforced the hypothesis that the transmission of Cryptosporidium hominis during the period the samples were collected occurred in an outbreak pattern, possibly by person-to-person contact through the fecal-oral route. As far as we know, this is the first time that molecular tools have been used to identify the species and the genotype of isolates showing the presence of the ML1 genotype in samples from Brazilian patients.Mundialmente, diferentes espécies de Cryptosporidium estão relacionadas com doenças diarréicas. No Brasil há poucos dados sobre os genótipos das espécies de Cryptosporidium associadas a infecções. OBJETIVO: No presente estudo, caracterizamos, por métodos moleculares, a espécie e o genótipo de Cryptosporidium sp diagnosticado em surto diarréico ocorrido na creche do Hospital das Clínicas, São Paulo, Brasil. MATERIAL E MÉTODOS: Identificação específica e tipagem dos isolados associados ao surto foram feitos a partir do seqüenciamento de fragmentos de DNA amplificados por PCR dos seguintes loci: a região que codifica o SSUrRNA, o gene que codifica uma proteína do envoltório dos oocistos de Cryptosporidium (COWP), e o locus de microsatélite ML1, representado por seqüências repetitiva de três nucleotídeos GAG contendo substituições que diferem entre os genótipos de Cryptosporidium parvum e Cryptosporidium hominis. RESULTADOS: Um total de 29 amostras positivas para Cryptosporidium associadas ao surto diarréico foi analisado com base nos métodos moleculares acima descritos. O estudo revelou a presença do genótipo ML1 de Cryptosporidium hominis. DISCUSSÃO: A análise molecular reforçou a hipótese de que a transmissão de Cryptosporidium hominis durante o surto diarréico ocorreu de pessoa a pessoa através da rota fecal oral. Esta é a primeira vez que ferramentas moleculares são utilizadas para identificação de espécies e genótipos de isolados acusando a presença do genótipo ML1 em pacientes brasileiros

Imunodiagnóstico da estrongiloidíase humana: o uso de seis diferentes frações antigênicas de fêmeas parasitas de Strongyloides venezuelensis

O objetivo deste estudo foi avaliar seis frações antigênicas diferentes de fêmeas parasitas de Strongyloides venezuelensis para o diagnóstico sorológico da estrongiloidíase humana. As frações solúveis e de membrana de fêmeas parasitas de S. venezuelensis foram preparadas em solução salina tamponada (SSF e SMF, respectivamente), Tris-HCl (TSF e TMF, respectivamente) e tampão alcalino (ASF e AMF, respectivamente). As amostras de soro obtidas de pacientes com estrongiloidíase, com outras parasitoses e indivíduos saudáveis, foram analisadas pelo ensaio imunoenzimático (ELISA). As frações solúveis SSF, TSF e ASF apresentaram sensibilidade de 85,0%, 75,0%, e 80,0% e especificidade de 93,1%, 93,1% e 87,5%, respectivamente. As frações de membrana, SMF, TMF e AMF demonstraram sensibilidade de 80,0%, 75,0%, e 85,0%, e especificidade de 95,8%, 90,3% e 91,7%, respectivamente. Em conclusão os presentes resultados sugerem que as frações obtidas a partir de fêmeas parasitas, especialmente o SSF e SMF, podem ser utilizadas como fonte alternativa de antígenos no imunodiagnóstico da estrongiloidiase humana.The aim of this study was to evaluate six different antigenic fractions from Strongyloides venezuelensis parasitic females for the immunodiagnosis of human strongyloidiasis. Soluble and membrane fractions from S. venezuelensis parasitic females were prepared in phosphate-buffered saline (SSF and SMF, respectively), Tris-HCl (TSF and TMF, respectively), and an alkaline buffer (ASF and AMF, respectively). Serum samples obtained from patients with strongyloidiasis or, other parasitic diseases, and healthy individuals were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Soluble fractions SSF, TSF, and ASF showed 85.0%, 75.0%, and 80.0% sensitivity and 93.1%, 93.1%, and 87.5% specificity, respectively. Membrane fractions SMF, TMF, and AMF showed 80.0%, 75.0%, and 85.0% sensitivity, and 95.8%, 90.3%, and 91.7% specificity, respectively. In conclusion, the present results suggest that the fractions obtained from parasitic females, especially the SSF and SMF, could be used as alternative antigen sources in the serodiagnosis of human strongyloidiasis

Emprego da azida sódica, como conservador de fezes, para a pesquisa de ovos de Schistosoma mansoni pelo método de Kato-Katz

O método de Kato-Katz é muito utilizado para pesquisa de ovos de helmintos nasfezes e, em determinadas ocasiões, como por exemplo no trabalho de campo, afigura-se conveniente preservar o material a examinar, com o intuito de facilitar o transporte e operacionalidade. Na tentativa de poder usar conservador sôliào, capaz de, em relação a ovos de Schistosoma mansoni, manter a morfologia, impedir a evolução e não interferir no processo de clarificação pela glicerina, os autores utilizaram a azida sádica (NaN3), que foi misturada, na quantidade de 2-3mg em aproximadamente 2 g de fezes de pacientes eliminando número conhecido de ovos, quantificados pelo processo de Kato-Katz. As fezes com preservador ficaram mantidas em temperatura ambiente e foram feitas contagens, pela mesma técnica, após uma, duas, quatro, oito e doze semanas. As observações, feitas em 53 amostras, demonstraram que em 51 o número de ovos permaneceu, aproximadamente, idêntico e com estruturas conservadas, de molde a permitir o dignóstico. Em dois casos, nas oitava e décima-segunda semanas, as fezes estavam desidratadas, ressecadas e impróprias para a contagem. A azida sódica, portanto, mostrou-se adequada para a conservação de fezes a serem submetidas ao método de Kato-Katz

HEMORRAGIA DIGESTIVA OCASIONAL EM CRIANÇA POR ESTRONGILOIDÍASE: IMPORTÂNCIA DO EXAME PARASITOLÓGICO

RESUMO Objetivo: Descrever um caso incomum de infecção por Strongyloides stercoralis (S. stercoralis) em paciente de quatro meses de idade e ressaltar a importância do diagnóstico precoce. Descrição do caso: Paciente masculino, procedente e residente de Videira, Santa Catarina, Brasil, nasceu pré-termo, parto cesárea, peso de nascimento 1.655 g, e permaneceu na Unidade de Terapia Intensiva neonatal e intermediária por 20 dias. Aos quatro meses de idade, começou a evacuar fezes sanguinolentas e foi feita hipótese de alergia à proteína do leite de vaca, em razão da sintomatologia e do uso da fórmula infantil para o primeiro semestre, para o qual foi indicada a substituição por fórmula infantil com proteína hidrolisada. Foram solicitados a pesquisa de leucócitos e o exame parasitológico das fezes). Ambos se mostraram positivos e o parasitológico revelou a presença de larva rabditoide de S. stercoralis. O clínico manteve a hipótese inicial e a dieta, mas solicitou a coleta de três amostras de fezes, que resultaram em uma amostra para larvas rabditoide, em muda, de S. stercoralis. Como a criança apresentava dor abdominal, vômito e as fezes permaneciam sanguinolentas, foi iniciado o tratamento com tiabendazol - duas vezes/dia por dois dias -, repetido após sete dias, e, em seguida, realizado o exame parasitológico de fezes, tendo sido negativo. Comentários: A estrongiloidíase, apesar de ser uma infecção parasitária frequentemente leve, em pacientes imunocomprometidos pode se apresentar de forma grave e disseminada. Deve-se suspeitar desse agente em pacientes que vivem em áreas endêmicas, sendo o diagnóstico estabelecido por meio da pesquisa das larvas do S. stercoralis na secreção traqueal e nas fezes