Análise da atividade antiinflamatória do metotrexato e da ciclosporina A, no modelo da pleurisia induzida pela carragenina, em camundongos

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia

Estudo dos efeitos anti-inflamatório e antioxidante do micofenolato de mofetila no modelo de pleurisia induzida pela carragenina, em camundongos

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011Introdução: O micofenolato de mofetila (MMF) é um fármaco imunossupressor utilizado atualmente na clínica na rejeição de transplantes de órgãos e em algumas doenças auto-imunes, como na uveite e na glomerulonefrite. Objetivos: Avaliar o efeito anti-inflamatório e antioxidante do MMF administrado por via oral, na primeira (4 h) e segunda (48 h) fases da resposta inflamatória induzida pela carragenina (Cg), no modelo da pleurisia, em camundongos. Materiais e Métodos: Neste protocolo experimental foram utilizados camundongos albinos suíços de 1 mês de idade. O modelo experimental utilizado foi o da pleurisia induzida pela Cg, segundo metodologia descrita por Saleh et al. (1996). A inflamação foi avaliada estudando-se alguns parâmetros da resposta inflamatória segundo metodologias já padronizadas e descritas na literatura (leucócitos e a exsudação), atividade das enzimas: mieloperoxidase (MPO), adenosina deaminase (ADA), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), e glutationa S-transferase (GST), superóxido dismutase (SOD), as concentrações de: nitrito/nitrato (NOx) e das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Neste protocolo, também foram estudadas a influência do MMF sobre as concentrações das proteínas e sobre a transcrição do mRNA para o fator de necrose tumoral alfa (TNF-?), interleucina-1 beta (IL-1?), fator de crescimento endotelial vascular alfa (VEGF-?), e interleucina 17A (IL-17A), utilizando-se as metodologias de enzima imunoensaio (ELISA) e a reação da transcriptase reversa, seguida de reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). Para a pesquisa da enzima óxido nítrico sintase induzida (ONSi) também foi utilizada a técnica de RT-PCR. Os parâmetros inflamatórios foram avaliados 4 h e 48 h após a indução da pleurisia. Como fármacos de referência anti-inflamatória foram utilizados: a dexametasona (Dex, i.p.) e o ibuprofeno (Ibu, v.o.). Em alguns experimentos para avaliar a exsudação, os animais foram tratados 10 minutos antes da aplicação da Cg, com solução de azul de Evans (25 mg/kg, 0,2 mL, i.o.). Para a análise estatística dos resultados foi utilizado o teste paramétrico ANOVA complementado, quando necessário, pelo teste de Dunnett, teste t de Student e teste de correlação de Pearson. Diferençcas com P < 0,05 foram considerados significantes. Resultados: Em ambas as fases (4 h e 48 h) da resposta inflamatória induzida pela Cg, o MMF na dose de 100 mg/kg administrado por via oral (v.o.) inibiu os leucócitos (P < 0,01), a exsudação (P < 0,01), as atividades de: MPO (P < 0,05), ADA (P < 0,01), CAT (P < 0,05), SOD (P < 0,05), GPx (P < 0,01) e GST (P < 0.01), as concentrações de: nitrito/nitrato (ONx) (P < 0,01) e TBARS (P < 0,05). Além disso, o fármaco também inibiu aumento das concentrações e a transcrição do mRNA de: TNF-? (P < 0,01), IL-1? (P < 0,01), VEGF-? (P < 0,01) e IL-17A (P < 0,01), bem como a transcrição da enzima ONSi (P < 0,01). Conclusão: Os resultados demonstraram que o MMF possui importante efeito anti-inflamatório e antioxidante, inibindo mediadores e enzimas que participam da resposta inflamatória no modelo da pleurisia em camundongos. Este efeito parece ocorrer também em nível pré-transcripcional uma vez que o MMF foi capaz de inibir não somente as concentrações de citocinas formadas, mas também a transcrição do mRNA para estas proteínas

Effects of methotrexate upon inflammatory parameters induced by carrageenan in the mouse model of pleurisy.

BACKGROUND: The model of pleurisy induced by carrageenan exhibits a biphasic response (4 and 48 h) and permits the quantification of exudate, cell migration and certain enzymes such as myeloperoxidase (MPO) and adenosine-deaminase (ADA) that are markers of activated leukocytes. AIMS: The present study evaluates whether there exists, in the pleurisy model, a significant inhibition of ADA and MPO enzymes, leukocyte kinetics and other markers of inflammation [nitric oxide (NO) levels, exudation] caused by methotrexate treatment by the intraperitoneal (i.p.) route. METHODS: The pleurisy was induced by carrageenan (1%) in mice, and the parameters were analyzed 4 and 48 h after. RESULTS: After the induction of inflammation (4 h), methotrexate (20 mg/kg, i.p., 24 h before pleurisy induction) inhibited the leukocyte infiltration (p < 0.05), NO levels and MPO activity (p < 0.01), but not ADA activity and fluid leakage (p > 0.05). Regarding the second phase of pleurisy (48 h), methotrexate (40 mg/kg, i.p., 0.5 h before pleurisy induction) inhibited the leukocyte infiltration (p < 0.05), fluid leakage, NO levels (p < 0.01), and ADA and MPO activity (p < 0.05). CONCLUSIONS: These findings support the evidence that the acute administration of methotrexate has an important systemic anti-inflammatory activity in the studied inflammatory model. This effect was due to a significant inhibition on both neutrophil and mononuclear cells, being less marked in relation to exudation 48 h after. In relation to the enzymes studied and to NO levels, the findings support the evidence that methotrexate inhibits both enzymes (MPO and ADA) from leukocytes at the site of injury, thus reflecting the activation of both neutrophils and lymphocytes, respectively. Furthermore, the inhibiting effect on NO in both phases of pleurisy induced by carrageenan (4 and 48 h) indicates that methotrexate acts on constitutive and/or inducible NO synthases by means of different cells of the pleural cavity

The anti-inflammatory effect of Ilex paraguariensis A. St. Hil (Mate) in a murine model of pleurisy.

Ilex paraguariensis is a native plant from Southern America, where it is used as a beverage. In traditional medicine, it is used to treat many diseases including inflammation. However, we do not yet know precisely how this effect occurs. We therefore evaluated its anti-inflammatory effect in a murine model of pleurisy. The standardized CE, BF and ARF fractions, Caf, Rut and CGA were able to reduce leukocyte migration, exudate concentration, MPO and ADA activities and NOx levels. Moreover, I. paraguariensis also inhibited the release of Th1/Th17 pro-inflammatory cytokines, while increasing IL-10 production and improving the histological architecture of inflamed lungs. In addition, its major compounds decreased p65 NF-κB phosphorylation. Based on our results, we can conclude that I. paraguariensis exerts its anti-inflammatory action by attenuating the Th1/Th17 polarization in this model. This fact suggests that the use of this plant as a beverage can protect against Th1/Th17 inflammatory diseases

Pharmacological potential of Tetradenia riparia plant and its derivatives: A scoping review

TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências da Saúde. Farmácia.Esta revisão de escopo para aumentar o potencial farmacológico da planta e sua derivados para a saúde. Conduzimos este estudo de acordo com as recomendações PRISMA e registrado no OSF (doi: 10.17605 / OSF.IO / 3QFBG). Procuramos em três bancos de dados usando os termos livres combinados com operadores booleanos: Tetradenia riparia OU Iboza OU Moschosma. A estratégia PICOS foi aplicada para formular a pesquisa questão, critérios de elegibilidade (inclusão e exclusão) e extração de dados. Dois revisores independentes e cegos conduziram a fase de seleção e extração de dados, e um especialista removeu as discrepâncias. Um total de 24 estudos foram incluídos. O folhas e óleos essenciais foram estudados em sua maioria, seguindo extratos brutos e frações. ou compostos isolados. Uma planta foi obtida em regiões subtropicais, principalmente ao sul de Brasil. A atividade antimicrobiana foi relatada para alguns estudos in vitro, como antileishmania, bactéria anti-tuberculose e ação helmíntica. Além disso, T. riparia mostrou antioxidante efeitos acaricidas e imunomoduladores. O uso terapêutico desta planta e seus derivados para tratar doenças infecciosas e inflamatórias eram potenciais, mas limitados desde quanto à citotoxicidade e poucos estudos in vivo e humanos publicados.This scoping review to raise the pharmacological potential of the plant and its derivatives for health. We conducted this study according to PRISMA recommendations and registered in OSF (doi:10.17605/OSF.IO/3QFBG). We searched in three databases using the free terms combined with boolean operators: Tetradenia riparia OR Iboza OR Moschosma. PICOS strategy was applied to formulate the search question, eligibility criteria (inclusion and exclusion) and data extraction. Two independent and blinded reviewers conducted the selection and data extraction phase, and an expert removed the discrepancies. A total of 24 studies were included. The leaves and essential oils were majority studied, following crude extracts and fractions or isolated compounds. A plant was obtained in subtropical regions, mainly South of Brazil. Antimicrobial activity was reported for some in vitro studies, as antileishmanial, anti-tuberculosis bacteria, and helminthic action. Also, T. riparia showed antioxidant effects, acaricidal and immunomodulatory. The therapeutic use of this plant and its derivatives to treat infectious and inflammatory diseases was potential, but limited since regarding the cytotoxicity and few studies in vivo and humans published

new pre clinical evidence of anti inflammatory effect and safety of a substituted fluorophenyl imidazole

Abstract Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS) is an inflammatory condition with high mortality rates, and there is still no pharmacological approach with proven effectiveness. In the past few years, several imidazole small molecules have been developed to treat conditions in which inflammation plays a central role. In the present work, we hypothesize that a novel substituted fluorophenyl imidazole synthetized by our research group would present in vivo anti-inflammatory effect in an ARDS murine model induced by LPS. Results shows that the fluorophenyl imidazole has the ability to inhibit leukocyte migration to the bronchoalveolar lavage fluid and lung tissue of animals challenged intranasally with LPS. Furthermore, this inhibition is followed with reduction in myeloperoxidase activity, nitric oxide metabolites generation and cytokines (TNF-α, IL-6, IL-17, IFN-γ and IL-10) secretion. This effect is at least partly related to the capacity of the fluorophenyl imidazole in inhibit p38 MAPK and NF-κB phosphorylation. Finally, fluorophenyl imidazole showed no signs of acute oral toxicity in the toxicological protocol suggested by OECD 423. Taken together, the results shows that fluorophenyl imidazole is a promising prototype for the development of a novel anti-inflammatory drug in which p38 MAPK and NF-κB plays a pivotal role

Composição química e avaliação da atividade antimicrobiana do óleo essencial das folhas de Piper malacophyllum (C. Presl.) C. DC.

This work reports the chemical composition as well as the antibacterial, antifungal and antiparasitic activities of the leaf essential oil from Piper malacophyllum. The oil was extracted by hydrodistillation and analyzed by GC-FID, GC-MS and polarimetry. Among the 28 compounds identified, (+)-camphor was the major constituent. The essential oil showed activity against most of the microorganisms tested, especially antifungal action, with a MIC of 500 µg mL-1 against Trichophyton mentagrophytes and Cryptococcus neoformans. This is the first study reporting the composition and biological properties of leaf essential oil from P. malacophyllum