Методы электроанализа биологических молекул

This paper focuses on experimental data of electroanalysis of enzymes, proteins, peptides, DNA, and medicinal preparations, obtained by authors. Methods for enzyme electrodes preparation, methods for kinetic parameters calculations based on analysis of electrochemical data. Results are described as algorithm for efficient electrochemical reaction of biomolecules.Рассмотрены методы электроанализа биологических молекул, таких как ферменты, белки, пептиды, ДНК, лекарственные препараты. Описаны методы получения ферментных электродов, методы расчёта кинетических параметров реакций на основе анализа электрохимических данных. Результаты представлены в виде алгоритма, позволяющего осуществить выбор типа электрода для проведения соответствующей электрохимической реакции

Новые подходы к уходу за кожей детей раннего возраста и профилактике дерматита

Anatomic and functional features of the child's skin determine its vulnerability to the influence of various environmental factors. Consequently, one of the key tasks for the efficient newborn and infant care is proper skin care. Penaten cream fully complies with requirements applicable to the products intended for skin care and prevention of diaper dermatitis, effectively protects the baby skin from irritant agents, lack of additives or colourings; it consists of the safety components only.Анатомо-функциональные особенности кожи ребенка определяют ее ранимость при различных воздействиях внешней среды. Поэтому одной из основных задач по рациональному уходу за новорожденными и детьми грудного возраста является правильный уход за кожей. Крем Пенатен полностью отвечает требованиям, которые предъявляются к средствам, предназначенным для ухода за кожей и профилактики пеленочного дерматита, эффективно защищает кожу ребенка от раздражителей, не содержит консервантов, красителей; в его состав входят только безопасные компоненты.Анатомо-функціональні особливості шкіри дитини визначають її вразливість до впливу різних чинників зовнішнього середовища. Тому однією з основних задач з раціонального догляду за новонародженими і дітьми грудного віку є правильний догляд за шкірою. Крем Пенатен цілком відповідає вимогам, що ставляться до засобів, призначених для догляду за шкірою і профілактики пелюшкового дерматиту, ефективно захищає шкіру дитини від подразників, не містить консервантів, барвників; до його складу входять тільки безпечні компоненти

Мітопротективний ефект рецепторного антагоніста інтерлейкіну-1 при експериментальному церебральному інсульті

Mitoprotective activity of the receptor antagonist of interleukin-1 ( RAIL-1, 7,5 mg/kg) comparing to Thiotriazoline (50 mg/kg) was studied on the model of experimental photoinduced cerebral thrombosis  in rats. Against a background of RAIL-1 administration  significant stabilization of mitochondria functional activity was noted (by blocking of mitochondrial pore opening) as wel as the state of thiol-disulfide system: normalization of activity of glutationperoxidase and glutationreductase, increase of levels of reduced forms of glutathione and thiols against a background of reduction of their oxidized forms. By mitochondrial activity  RAIL-1 can be compared to Thiotriazoline and even  exceeds it in some parameters.На модели экспериментального фотоиндуцированного тромбоза сосудов головного мозга у крыс изучена митопротекторная активность рецепторного антагониста интерлейкина-1 (РАИЛ-1, 7,5 мг/кг) в сравнении с Тиотриазолином (50 мг/кг). На фоне применения РАИЛ-1 отмечена достоверная стабилизация функциональной активности митохондрий (по блокированию открытия митохондриальных пор) и состояния тиол-дисульфидной системы: нормализация активности глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы, повыщение уровней восстановленных форм глутатиона и тиолов на фоне снижения их окисленных форм. По митопротекторной активности на РАИЛ-1 сопоставим с Тиотриазолином и по ряду показателей превосходит его.На моделі фотоіндукованого тромбозу судин головного мозку у щурів досліджено мітопротективну активність рецепторного антагоніста інтерлейкіну-1 (РАІЛ-1, 7,5 мг/кг) порівняно з Тіотріазоліном (50 мг/кг). На фоні застосування РАІЛ-1 відзначено вірогідну стабілізацію функціональної активності мітохондрій (за блокуванням відкриття мітохондріальних пор) та стану тіол-дисульфідної системи: нормалізація активності глутатіонпероксидази та глутатіонредуктази, підвищення рівнів відновлених форм глутатіону і тіолів на фоні зниження їх окислених форм. За мітопротекторною активністю РАІЛ-1 співвідносний з Тіотріазоліном і за рядом показників перевищує його

Использование праймеров с высокой степенью мечения в полимеразной цепной реакции

The fluorescently-labeled DNA is widely used in various bioanalytical applications. For a number of applications, a high level of labeling could be beneficial. One of the ways to produce DNA fragments bearing multiple fluorescent tags is to use polymerase chain reaction (PCR) with primers heavily labeled with fluorophores. Here we tested how primers with multiple fluorescein tags perform in PCR. It has been found that the positioning of fluorescein tags at or near the 3′-end upon primer multiple labeling can inhibit DNA amplification (up to a complete stop when tags are placed at the 3′- or adjacent nucleotide). The mechanism, by which the presence of fluorescein tags at or near the primer 3′-end affects the PCR performance, is rather ambiguous and can involve both a steric hindrance for polymerase binding from the fluorescein moiety, as well as destabilization of a primer-template duplex. Nonetheless, if multiple fluorescein tags are attached so that at least three nucleotides from the primer 3′-end are unmodified, the production of DNA fragments bearing multiple fluorescein molecules is possible even if both primers are heavily labeled, though on the expense of amplicon yield.Флуоресцентно-меченую ДНК широко используют в различных биоаналитических приложениях. В ряде случаев высокий уровень меченья ДНК является преимуществом. Одним из способов получения фрагментов ДНК, несущих множественные флуоресцентные метки, является использование полимеразной цепной реакции (ПЦР) с праймерами с высокой степенью мечения. В данной работе мы исследовали, как присутствие многочисленных молекул флуоресцеина, прикреплённых к праймеру, влияет на результат ПЦР. Было обнаружено, что расположение флуоресцеиновой метки на 3′-конце праймера или вблизи него может ингибировать амплификацию (вплоть до полной остановки, когда метка находится непосредственно на 3′-концевом или соседнем с ним нуклеотиде). Механизм, посредством которого присутствие флуоресцеиновых меток на 3’-конце праймера или вблизи него влияет на эффективность ПЦР, довольно неоднозначен и может включать как стерическое препятствование связыванию полимеразы прикреплённой молекулой флуоресцеина, так и дестабилизацию дуплекса праймер-матрица. Тем не менее, если множественные флуоресцеиновые метки прикреплены к нуклеотидам праймера таким образом, что по меньшей мере три нуклеотида с его 3′-конца остаются немодифицированными, то получение фрагментов ДНК с высоким уровнем мечения возможно с помощью ПЦР, хотя и с заметно меньшим выходом, чем при использовании немодифицированных праймеров

Genetic diversity study of modern Russian apple (Malus x domestica Borkh.) cultivars by the SSR loci analysis

SSRs are one of the most suitable DNA-markers for assessment of genetic diversity of plant genetic resources. Microsatellites were used for development of saturated genetic maps of apple (Malus × domestica Borkh.) as well as for wide range of genetic diversity studies. Our study was aimed on the investigation of the genetic relationship within subcollection of modern Russian apple cultivars. Polymorphism of 12 microsatellite loci was estimated for 31 apple cultivars from the SKZNIISiV collection of genetic resources. These cultivars have been bred in North Caucasian Regional Research Institute of Horticulture and Viticulture (SKZNIISiV) and All-Russian Research Institute of Fruit Crop Breeding (VNIISPK). SSR-markers CH01f03b, CH01h01, CH01h10, CH02c06, CH02d08, CH04e05, CH05f06, CH01f02, CH02c11, Hi02c07, CH02c09 and CH03d07, which are recommended by Fruitbreedomics, the European consortium, were used in the study. According to the data of SSR-analysis from 5 to 10 alleles per locus were detected, with an average value of 7.75 alleles per locus. A total of 93 alleles were detected for all 12 loci. All apple cultivars showed individual, distinct SSR-profiles. Comparison with the data on the genetic diversity of the world apple tree gene pool suggests that the SSR-loci polymorphism in studied set of the apple cultivars is relatively high. Expected (He) and observed (Ho) heterozygosity varied within the ranges of 0.548-0.897 and 0.602-0.827 for Ho and He, respectively. The average values of these indexes are Ho = 0.786 and He = 0.755. PIC value ranged from 0.571 to 0.806, and 9 loci showed PIC value higher than 0.712. Results of UPGMA-analysis are consistent with the level of genetic heterogeneity of the studied cultivar set. Five clusters were determined. Distribution of cultivars into clusters in most cases is consistent with their genealogy. For example, Svezhest’ cultivar, formed a distinct cluster № 1, as well as cultivars Imrus and Zimnee utro which formed cluster № 5 are originated from the cultivars, which are not presented as the parental forms of any studied cultivars. Cultivars of VNIISPK breeding such as Solnishko, Stroevskoe, Yubilei Moskvy, Afrodita and Start, which formed distinct cluster № 3 have one common parental cultivar. The structure of dendrite obtained when performing clustering on the results of SSR-analysis may be due to large number of unique alleles studied in genotypes that in turn is due to the high genetic diversity within the studied set of cultivars. At the same time, the fact of incorporation of cultivars with the same genealogy in the same clusters confirms the high significant genetic similarity within groups of such varieties. Results of the study allows to assess the level of the genetic diversity within the set of modern apple cultivars as well as can be used for confirmation of genealogy of apple cultivars and hybrids in the case of disputes, as well as for identification of varieties