Влияние перфторана на морфологию эритроцита при острой кровопотере

Objective: to evaluate the cytoprotective effect of perfluoran when pre-administered in massive blood loss. Material and methods. Experiments were performed on 21 nembutal-anesthetized rats. Acute blood loss from the rat caudal artery served as a model for a terminal state. Perfluoran had been injected 45 minutes prior to blood loss. Morphological and morphome-tric analyses of monolayer dried unstained blood smear slides were made using an Olympus BX-50 light microscope at a magnification of 1000 (10X100). Cytometry was carried out using Image scope color software. Results. In the control group of experiments, i. e. without perfluoran preadministration, at 5 minutes of blood loss, the circulating blood showed only 20% of discoid forms; the other forms of the red blood cells were grades 1-to-3 transformation stomatocytes. By 60 minutes of hypotension, there was a decrease in stomatocyte counts to 5.2% and a change in the ratio of circulating red blood cell populations. The number of smaller, i.e. senescent, cells was increased and that of large cells was reduced. The preventive administration of perfluoran in small amounts playing no prominent role in the delivery of oxygen and the alteration of circulating blood volume, substantially changed the ratio of different shapes and sizes of erythrocytes, increased their average diameter, and stabilized the membrane of a red blood cell. Conclusion. The preadministration of low-dose perfluoran before blood loss prevents deformational stress, increases the surface of a red blood cell, and stabilizes its membrane. Key words: blood loss, perfluoran, red blood cell, stomatocyte, deformation stress, rheology.Цель исследования — обоснование цитопротекторного эффекта перфторана при массивной кровопотере при его предварительном введении. Материалы и метод. Эксперименты проведены на 21 крысе под нембуталовым наркозом. Моделью терминального состояния служила острая кровопотеря из хвостовой артерии. Перфторан вводили за 45 минут до кровопотери. Морфологический и морфометрический анализ проводили на сухих, не окрашенных мазках, в монослое с помощью светового микроскопа Olimpus BX-50 при увеличении 1000 (10X100). Цитометрия проведена с помощью программы Image scop color. Результаты. В контрольной группе опытов, т. е. без предварительного введения перфторана, в циркулирующей крови на 5 минуте кровопотери присутствует только 20% дискоидных форм, остальные формы эритроцитов — стоматоциты 1—3 стадии трансформации. К 60 минуте гипотензии количество стома-тоцитов снижается до 5,2%, и изменяется соотношение популяции циркулирующих в крови эритроцитов. Увеличивается количество более мелких, т.е. старых клеток, и уменьшается количество крупных клеток. Профилактическое введение Перфторана в небольших количествах, не играющих существенной роли в доставке кислорода и в изменении объема циркулирующей крови, существенно изменяет соотношение различных форм и размеров эритроцитов, увеличивает средний диаметр, стабилизирует мембрану эритроцита. Заключение. Предварительное введение малых доз перфторана перед кровопотерей предупреждает развитие деформационного стресса, увеличивает поверхность эритроцита, стабилизирует мембрану эритроцита. Ключевые слова: кровопотеря, перфторан, эритроцит, стома-тоцит, деформационный стресс, реология

КОРРЕКЦИЯ ПОЙКИЛОЦИТОЗА И БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ ПРИ ОСТРОЙ КРОВОПОТЕРЕ

Objective: to provide a rationale for the use of perfluorane to correct erythrocyte morphological changes and blood biochemical indicators in acute blood loss.Material and methods. Experiments were carried out in outbred male rats weighing 250—300 g under nembutal anesthesia. Blood loss was induced by arterial blood exfusion until blood pressure (BP) reached 40 mm Hg, following which this BP level was maintained for 60 minutes. Then the amount of blood withdrawn was reinfused. Perfluorane was injected intraarterially at a dose of 3 ml/kg 45 min before the start of blood loss. On the following day arterial and venous blood samples were harvested. The values of metabolic parameters (acid-base balance (ABB), hemoglobin (Hb), packed cell volume (PCV), and blood biochemistry), the morphological characteristics of erythrocytes (the size of discocytes and the percentage of stomatocytes and echinocytes), and the levels of reticulocytes in peripheral blood were studied. Results. Perfluorane exerted a normalizing effect on the values of blood ABB. Twenty-four hours after blood loss and reinfusion, Group 1 (a non-perfluorane group; n=8) showed reductions in Hb, PCV, and serum iron as compared to Group 3 (intact animals; n=12). In Group 2 (a perfluorane group; n=10), these indicators were decreased to a lesser extent. In these time periods, hypercholesterolemia was less marked in Group 2 than in Group 1. In Group 2, the mean diameter of a discocyte was larger than that in the animals of the two other groups. Group 1 displayed as high as 32% increases in the count of echinocytes with their virtually complete absence in the intact animals. At the same time, the levels of echinocytes in Group 2 animals were similar to those in the intact animals. As compared to Group 3, Group 1 exhibited a 4.5-fold drop in the percentage of reticulocytes (р≤0.05) while Group 2 showed a 2.2-fold rise in this indicator (р≤0.05).Conclusion. The injection of perfluorane at a dose of 3 ml/kg body weight 45 min prior to blood loss causes an increase in the values of Hb, PCV, and serum iron and a reduction in total cholesterol. The administration of perfluoraneЦель исследования. Обоснование применения перфторана для коррекции морфологических изменений эритроцитов и биохимических показателей крови при острой кровопотере.Материалы и методы. Эксперименты проведены на нелинейных крысах-самцах весом 250—300 г под нембуталовым наркозом. Кровопотерю осуществляли посредством эксфузии артериальной крови до достижения АД=40 мм рт. ст., после чего данный уровень артериальной гипотензии поддерживали в течение 60 минут. Затем проводили реинфузия забранного объема крови. Перфторан в дозе 3 мл/кг вводили внутриартериально за 45 мин до начала кровопотери. На следующие сутки проводили забор проб артериальной и венозной крови. Исследовали показатели обмена веществ (КОС, Hb, Ht, биохимический анализ крови), морфологические характеристики эритроцитов (размер дискоцитов, процентное содержание стоматоцитов и эхиноцитов) и содержание ретикулоцитов в периферической крови.Результаты. Перфторан оказывал нормализующее действие на показатели КОС крови. Через сутки после кровопотери и реинфузии в группе 1 (без введения перфторана, n=8) отмечали снижение показателей Hb, Ht и сывороточного железа в сравнении с группой 3 (интактные животные, n=12). В группе 2 (с введением перфторана, n=10) эти показатели снижались в меньшей степени. В эти же сроки в группе 2 меньше была выражена гиперхолестеринемия по сравнению с группой 1. В группе 2 средний диаметр дискоцита был больше, чем у животных двух других групп. Содержание эхиноцитов в группе 1 возрастало до 32% при их практически полном отсутствии у интактных животных. У животных группы 2 содержание эхиноцитов не отличалось от интактных. По сравнению с группой 3 в группе 1 процентное содержание ретикулоцитов снизилось в 4,5 раза (р≤0,05), в то время как в группе 2 наблюдалось увеличение этого показателя в 2,2 раза (р≤0,05). Заключение. Введение перфторана в дозе 3 мл/кг массы тела за 45 мин до кровопотери способствует повышению показателей гемоглобина, гематокрита, сывороточного железа и снижению общего холестерина. Введение перфторана увеличивает также средний диаметр эритроцитов; предупреждает развитие их эхиноцитарной трансформации и улучшает регенераторные способности костного мозга через сутки после кровопотери и реинфузии

СЛУЧАЙ УСПЕШНОГО ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ТРОМБОЭМБОЛИИ ЛЕГОЧНОЙ АРТЕРИИ У БОЛЬНОЙ НА СРОКЕ БЕРЕМЕННОСТИ 11 НЕДЕЛЬ

Pulmonary embolism in pregnant women is fairly common complication, and it remains to be the one of major causes of maternal mortality in the number of countries. The need to compare risks of the mother and child makes the search for optimal treatment tactics very complicated in this specific case. The experience of the last decades provides evidences for choosing aggressive treatment tactics, accurate diagnostics and early surgical intervention. The authors of this article describe the clinical case of successful treatment of the young woman whose pregnancy course was complicated by pulmonary embolism at the 11th week of gestation. The article describes the results of laboratory and instrumental diagnostics and anasthesiological support technique within available scope of pharmacological and technical means. Also the article reviews the literature data on this problem. The conclusion contains recommendations for intra-operative management of such patients. Тромбоэмболия легочной артерии (ТЭЛА) у беременных женщин является весьма частым осложнением, она остается одной из ведущих причин материнской смертности в ряде стран. Необходимость соотнесения рисков для организма матери и ребенка делает поиск оптимальной тактики лечения в данном случае очень сложной задачей. Опыт последних десятилетий свидетельствует в пользу избрания агрессивной тактики лечения, точной диагностики и раннего оперативного вмешательства. В данной статье авторы представляют случай успешного лечения молодой женщины, течение беременности которой осложнилось ТЭЛА на сроке гестации 11 недель. Описываются результаты проведенной лабораторной и инструментальной диагностики, а также методика анестезиологического пособия в рамках доступного объема фармакологических и технических средств. Приводится анализ данных литературы по этой актуальной проблеме. В заключении даны рекомендации по интраоперационному ведению подобных больных.

Гипоксические белки VEGF A и CA IX и резистентность клеток сарком мягких тканей к химиопрепаратам: пилотный опыт ex vivo анализа

Introduction. The identification of predictive factors is a cornerstone task of modern oncology. The development of new targeted drugs determines the need for prediction of chemosensitivity of each patient to the prescribed therapy, in this regard, the search for biomarkers of predictive response to therapy is actively conducted.The study objective to investigate the relationship between tumor cell resistance and the expression levels of CA IX (carbonic anhydrase IX) and VEGF A (vascular endothelial growth factor А) in patient-derived cultures of soft tissue sarcomas.Materials and methods: ex vivo soft tissue sarcoma cell culture, resazurin test, immunoblotting.Results. We obtained 46 ex vivo samples of soft tissue sarcoma cultures for which chemosensitivity to doxorubicin, ifosfamide, docetaxel, gemcitabine, and their combinations was assessed by the resazurin cytotoxicity test. We analyzed the relationship between the expression of hypoxic proteins VEGF A and CA IX and the resistance to drugs. A correlation between the CA IX expression in hypoxia and cell resistance to ifosfamide and its combination with doxorubicin was found. Soft tissue sarcomas with high VEGF A index were resistant to doxorubicin, docetaxel, and its combination with gemcitabine (p <0.05).Conclusion. The data obtained on patient-derived cultures indicate the relationship between hypoxic signaling and resistance of soft tissue sarcomas to chemotherapeutics.Введение. Поиск предиктивных факторов является краеугольной задачей современной онкологии. Разработка большого числа новых таргетных препаратов определяет необходимость четкого предсказания хемочувствительности конкретного пациента к назначаемой терапии. В связи с этим активно ведется поиск биомаркеров прогноза ответа на терапию.Цель исследования – изучение взаимосвязи между резистентностью опухолевых клеток и уровнем экспрессии CA IX (карбоангидразы IX) и VEGF A (фактора роста эндотелия сосудов А) в ex vivo культурах сарком мягких тканей.Материалы и методы. В исследование были включены ex vivo культуры сарком мягких тканей, использованы резазуриновый тест, иммуноблоттинг.Результаты. Получено 46 ex vivo образцов культур сарком мягких тканей, для которых с помощью резазуринового теста на цитотоксичность определена хемочувствительность к доксорубицину, ифосфамиду, доцетакселу, гемцитабину и их комбинациям. Проведен анализ связи экспрессии гипоксических белков VEGF A и CA IX с резистентностью к химиопрепаратам. Обнаружена корреляция уровня экспрессии CA IX в гипоксии с резистентностью клеток к ифосфамиду и его комбинации с доксорубицином. Образцы сарком мягких тканей, обладающие высоким индексом VEGF A, были резистентны к доксорубицину, доцетакселу и его комбинации с гемцитабином (p <0,05).Заключение. Полученные на ex vivo культурах данные свидетельствуют о взаимосвязи гипоксического сигналинга и резистентности сарком мягких тканей к химиотерапии

Противоопухолевое действие кураксина CBL0137 на моделях аденокарциномы толстой кишки

Curaxins represent low molecular weight carbazole derivatives, which simultaneously activate p53-dependent apoptosis and inhibit NF-kBdependent signal transduction pathways. Antitumor activity of curaxin CBL0137 was demonstrated in vivo on the model of solid transplantable mouse colon adenocarcinoma Akatol. Significant tumor growth inhibition caused by CBL0137 treatment was observed. On the 37th day after tumor transplantation for CBL0137 oral doses 5, 10, 15 and 20 mg/kg the tumor growth inhibition indexes were 53, 50, 56 and 74 %, respectively. CBL0137 treatment extended life span of mice in all study groups receiving this test article. Maximum lifespan increase (81,7 %) was observed in the group of mice treated with 20 mg/kg dose of CBL0137. The cytotoxicity of CBL0137 was assessed on human colon cancer cells in vitro. We demonstrated that CBL0137 inhibits the expression COX2, which in its turn is known to exhibit antiapoptotic, pro-angiogenic and pro- metastatic properties. Thus, we demonstrated antitumor effect of CBL0137 against colon cancer in vitro and in vivo.Кураксины представляют собой низкомолекулярные карбазольные производные, обладающие афинностью к ДНК, способные одновременно активировать р53-зависимый апоптоз и ингибировать NF-kB-зависимый сигнальный путь. На модели перевиваемой аденокарциномы толстой кишки (Aкатол) на мышах линии BALB/c продемонстрировано противоопухолевое действие кураксина CBL0137. Наблюдалось значительное тормозящее действие CBL0137 на рост данной аллографтной опухоли: на 37-е сутки после перевивки опухоли при пероральном введении препарата в дозах 5, 10, 15 и 20 мг/кг в день торможение роста опухоли составило 53, 50, 56 и 74 % соответственно. Значимое увеличение продолжительности жизни наблюдалось во всех группах животных, получавших CBL0137. Максимальный эффект (81,7 %) был получен при введении препарата в дозе 20 мг/кг в день. В экспериментах in vitro при обработке клеток аденокарциномы толстой кишки человека HTC116 наблюдался значительный цитотоксический эффект. CBL0137 проявил способность ингибировать экспрессию гена COX2, обладающего антиапоптотическим действиеми способностью стимулировать неоангиогенез и метастазирование. Таким образом, в системах in vivo и in vitro продемонстрировано противоопухолевое действие CBL0137 в отношении аденокарциномы толстой кишки

CLINICAL CASE OF SUCCESSFUL SURGICAL TREATMENT OF PULMONARY EMBOLISM IN THE PATIENT WITH 11 WEEK PREGNANCY

Pulmonary embolism in pregnant women is fairly common complication, and it remains to be the one of major causes of maternal mortality in the number of countries. The need to compare risks of the mother and child makes the search for optimal treatment tactics very complicated in this specific case. The experience of the last decades provides evidences for choosing aggressive treatment tactics, accurate diagnostics and early surgical intervention. The authors of this article describe the clinical case of successful treatment of the young woman whose pregnancy course was complicated by pulmonary embolism at the 11th week of gestation. The article describes the results of laboratory and instrumental diagnostics and anasthesiological support technique within available scope of pharmacological and technical means. Also the article reviews the literature data on this problem. The conclusion contains recommendations for intra-operative management of such patients

Physiological and Functional Effects of Dominant Active TCRα Expression in Transgenic Mice

A T cell receptor (TCR) consists of α- and β-chains. Accumulating evidence suggests that some TCRs possess chain centricity, i.e., either of the hemi-chains can dominate in antigen recognition and dictate the TCR’s specificity. The introduction of TCRα/β into naive lymphocytes generates antigen-specific T cells that are ready to perform their functions. Transgenesis of the dominant active TCRα creates transgenic animals with improved anti-tumor immune control, and adoptive immunotherapy with TCRα-transduced T cells provides resistance to infections. However, the potential detrimental effects of the dominant hemi-chain TCR’s expression in transgenic animals have not been well investigated. Here, we analyzed, in detail, the functional status of the immune system of recently generated 1D1a transgenic mice expressing the dominant active TCRα specific to the H2-Kb molecule. In their age dynamics, neither autoimmunity due to the random pairing of transgenic TCRα with endogenous TCRβ variants nor significant disturbances in systemic homeostasis were detected in these mice. Although the specific immune response was considerably enhanced in 1D1a mice, responses to third-party alloantigens were not compromised, indicating that the expression of dominant active TCRα did not limit immune reactivity in transgenic mice. Our data suggest that TCRα transgene expression could delay thymic involution and maintain TCRβ repertoire diversity in old transgenic mice. The detected changes in the systemic homeostasis in 1D1a transgenic mice, which are minor and primarily transient, may indicate variations in the ontogeny of wild-type and transgenic mouse lines