Adaptação viral bem-sucedida da febre suína clássica (cepa C) para cultura de células para produção de vacina

Introduction: Classical swine fever (CSF) is a viral, infectious and cross border disease that causes important economic losses worldwide. Systematic and preventive immunization with live attenuated vaccines is pretty useful for its control; among these lapinized vaccines are within the most used. However, ethical limitations surrounding its production obliges bio-pharmaceutical industry to search for alternatives. The aim of this research is to adapt strain C of the CSF virus to a rabbit and pig cell culture. Methodology: rabbit kidney lines (RK-13) and pig’s (PK-15) were used. Both were infected with an homogenous spleen + blood, retrieved from white neo-Zealand rabbits, inoculated with master seed virus (strain C, 4th pass) from lapinized vaccine against the PPC fabricated by LABIOFAM, Cuba. In order to evaluate viral adaptation and replication within cellular lines, during the 23rd passes post-infection, it was identified a fragment of gen that codifies the E2 protein from the CSF virus, through reverse transcription technique –Polymerase chain reaction (RT-PCR) and the quantification of infectious viral titles (DICT50 /mL) by immunoperoxidase. Results: lapinidized strain C was adapted to cellular lines RK-13 and PK-15 after 23 successive passes, obtaining in the last one greater levels of viral replication with infectious titles of 105.8 DICT50 /mL. Conclusions: cellular lines RK-13 and PK-15 were susceptible to strain C infection, although PK-15 showed greater levels of viral replication.Introducción: la peste porcina clásica (PPC) es una enfermedad viral, infectocontagiosa y transfronteriza que causa importantes pérdidas económicas a nivel mundial. La inmunización sistemática y preventiva con vacunas vivas atenuadas es muy útil para su control; entre ellas las vacunas lapinizadas están entre las más utilizadas. Sin embargo, las limitaciones éticas que presenta su elaboración obligan a la industria biofarmacéutica veterinaria a buscar nuevas alternativas para su producción. Este trabajo tuvo como objetivo adaptar la cepa C del virus de la peste porcina clásica a cultivo celular de conejo y cerdo. Metodología: se utilizaron las líneas de riñón de conejo (RK-13) y de cerdo (PK-15). Ambas fueron infectadas con un homogenizado de bazo + sangre, obtenido de conejos de la raza neozelandés blancos, inoculados con el virus semilla maestro (cepa C, 4to pase) de la vacuna viva lapinizada contra la PPC fabricada por LABIOFAM, Cuba. Para evaluar la adaptación y replicación viral en las líneas celulares, durante los 23 pases post infección, se empleó la identificación del fragmento del gen que codifica la proteína E2 del virus PPC, mediante la técnica transcripción reversa - reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) y la cuantificación de los títulos virales infectivos (DICT50 /mL) por inmunoperoxidasa. Resultados: se adaptó la cepa C lapinizada a las líneas celulares RK-13 y PK-15 luego de 23 pases sucesivos, obteniéndose en esta última los mayores niveles de replicación viral con títulos infectivos de 105.8 DICT50 /mL. Conclusiones: las líneas celulares RK-13 y PK-15 fueron susceptibles a la infección de la cepa C, aunque la PK-15 mostró los mayores valores de replicación viral.Introdução: a peste suína clássica (LCR) é uma doença viral, infecciosa e trans-fronteiriça que causa perdas econômicas significativas em todo o mundo. A imunização sistemática e preventiva com vacinas vivas atenuadas é muito útil para o seu controle; Entre elas, as vacinas lapinizadas estão entre as mais utilizadas. No entanto, as limitações éticas de sua produção obrigam a indústria biofarmacêutica veterinária a buscar novas alternativas para sua produção. Este trabalho teve como objetivo adaptar a cepa C do vírus da peste suína clássica para cultura de células de coelhos e suínos. Metodologia: foram utilizadas as linhagens de rim de coelho (RK-13) e porco (PK-15). Ambos foram infectados com um homogenato de baço + sangue, obtido de coelhos brancos da Nova Zelândia, inoculado com o vírus semente mestre (cepa C, 4ª passagem) da vacina lapinizada viva contra CSF fabricada por LABIOFAM, Cuba. Para avaliar a adaptação e replicação viral em linhagens celulares, durante as 23 passagens pós-infecção, foi utilizada a identificação do fragmento do gene que codifica a proteína E2 do vírus PPC, por meio da reação em cadeia da polime-rase de transcrição reversa (RT -PCR) e a quantificação dos títulos virais infecciosos (TCID50 / mL) por imunoperoxidase. Resultados: a cepa C lapinizada foi adaptada às linhagens celu-lares RK-13 e PK-15 após 23 passagens sucessivas, obtendo nesta última os maiores níveis de replicação viral com títulos infectantes de 105,8 TCID50 / mL. Conclusões: As linhas celulares RK-13 e PK-15 foram suscetíveis à infecção pela cepa C, embora PK-15 tenha apre-sentado os maiores valores de replicação viral

Adaptação viral bem-sucedida da febre suína clássica (cepa C) para cultura de células para produção de vacina

Introduction: Classical swine fever (CSF) is a viral, infectious and cross border disease that causes important economic losses worldwide. Systematic and preventive immunization with live attenuated vaccines is pretty useful for its control; among these lapinized vaccines are within the most used. However, ethical limitations surrounding its production obliges bio-pharmaceutical industry to search for alternatives. The aim of this research is to adapt strain C of the CSF virus to a rabbit and pig cell culture. Methodology: rabbit kidney lines (RK-13) and pig’s (PK-15) were used. Both were infected with an homogenous spleen + blood, retrieved from white neo-Zealand rabbits, inoculated with master seed virus (strain C, 4th pass) from lapinized vaccine against the PPC fabricated by LABIOFAM, Cuba. In order to evaluate viral adaptation and replication within cellular lines, during the 23rd passes post-infection, it was identified a fragment of gen that codifies the E2 protein from the CSF virus, through reverse transcription technique –Polymerase chain reaction (RT-PCR) and the quantification of infectious viral titles (DICT50 /mL) by immunoperoxidase. Results: lapinidized strain C was adapted to cellular lines RK-13 and PK-15 after 23 successive passes, obtaining in the last one greater levels of viral replication with infectious titles of 105.8 DICT50 /mL. Conclusions: cellular lines RK-13 and PK-15 were susceptible to strain C infection, although PK-15 showed greater levels of viral replication.Introducción: la peste porcina clásica (PPC) es una enfermedad viral, infectocontagiosa y transfronteriza que causa importantes pérdidas económicas a nivel mundial. La inmunización sistemática y preventiva con vacunas vivas atenuadas es muy útil para su control; entre ellas las vacunas lapinizadas están entre las más utilizadas. Sin embargo, las limitaciones éticas que presenta su elaboración obligan a la industria biofarmacéutica veterinaria a buscar nuevas alternativas para su producción. Este trabajo tuvo como objetivo adaptar la cepa C del virus de la peste porcina clásica a cultivo celular de conejo y cerdo. Metodología: se utilizaron las líneas de riñón de conejo (RK-13) y de cerdo (PK-15). Ambas fueron infectadas con un homogenizado de bazo + sangre, obtenido de conejos de la raza neozelandés blancos, inoculados con el virus semilla maestro (cepa C, 4to pase) de la vacuna viva lapinizada contra la PPC fabricada por LABIOFAM, Cuba. Para evaluar la adaptación y replicación viral en las líneas celulares, durante los 23 pases post infección, se empleó la identificación del fragmento del gen que codifica la proteína E2 del virus PPC, mediante la técnica transcripción reversa - reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR) y la cuantificación de los títulos virales infectivos (DICT50 /mL) por inmunoperoxidasa. Resultados: se adaptó la cepa C lapinizada a las líneas celulares RK-13 y PK-15 luego de 23 pases sucesivos, obteniéndose en esta última los mayores niveles de replicación viral con títulos infectivos de 105.8 DICT50 /mL. Conclusiones: las líneas celulares RK-13 y PK-15 fueron susceptibles a la infección de la cepa C, aunque la PK-15 mostró los mayores valores de replicación viral.Introdução: a peste suína clássica (LCR) é uma doença viral, infecciosa e trans-fronteiriça que causa perdas econômicas significativas em todo o mundo. A imunização sistemática e preventiva com vacinas vivas atenuadas é muito útil para o seu controle; Entre elas, as vacinas lapinizadas estão entre as mais utilizadas. No entanto, as limitações éticas de sua produção obrigam a indústria biofarmacêutica veterinária a buscar novas alternativas para sua produção. Este trabalho teve como objetivo adaptar a cepa C do vírus da peste suína clássica para cultura de células de coelhos e suínos. Metodologia: foram utilizadas as linhagens de rim de coelho (RK-13) e porco (PK-15). Ambos foram infectados com um homogenato de baço + sangue, obtido de coelhos brancos da Nova Zelândia, inoculado com o vírus semente mestre (cepa C, 4ª passagem) da vacina lapinizada viva contra CSF fabricada por LABIOFAM, Cuba. Para avaliar a adaptação e replicação viral em linhagens celulares, durante as 23 passagens pós-infecção, foi utilizada a identificação do fragmento do gene que codifica a proteína E2 do vírus PPC, por meio da reação em cadeia da polime-rase de transcrição reversa (RT -PCR) e a quantificação dos títulos virais infecciosos (TCID50 / mL) por imunoperoxidase. Resultados: a cepa C lapinizada foi adaptada às linhagens celu-lares RK-13 e PK-15 após 23 passagens sucessivas, obtendo nesta última os maiores níveis de replicação viral com títulos infectantes de 105,8 TCID50 / mL. Conclusões: As linhas celulares RK-13 e PK-15 foram suscetíveis à infecção pela cepa C, embora PK-15 tenha apre-sentado os maiores valores de replicação viral

Prevención y diagnóstico veterinario de la tuberculosis bovina. Una revisión de las tendencias globales

Introduction: The bovine tuberculosis (TBb) caused by Mycobacterium Bovis is a serious bacterial, chronic, re-emerging and zoonotic disease. It affects to the livestock production and to the wild and affective animals, also. In the bovine group, it provokes substantial economic losses related with the health measures for its control, and important trade restrictions to the by-products. Because the strategies of prevention and control should be updated regarding to the scientific developments; the study to present the advances and the scientist technological tendencies about the sanitary strategies for the control of the TBb was performed. Methodology: A huge consultation of original articles and a revision on vaccines and diagnosis of TBb between the years 2002 and 2017 in the database of MEDLINE/PubMed, EBSCO and SciELO was carried out. Results: An active and coherent international action orientated to explore vaccinal formulations and advances in diagnostic tools was found. Important advances in the development of immunogens for the cattle were not reported. Both a proof with high values of sensibility (Se) and specificity (Sp) for the populational diagnostic of the disease. Conclusions: It is deemed that the scientific and technological advances obtained over the past years, are not necessarily going to contribute, for the moment, to the success of the national programs of control and eradication of the TBb. Therefore, in this context the prioritization of an integral analysis that considers the realities of every region or country, within the concept: “A single health”, the combined and strategic use of the diagnostic systems, the firm political commitment of the governments and the international cooperation are indispensable to advance in the fight against this disease.Introducción: la tuberculosis bovina (TBb) causada por Mycobacterium bovis es una enfermedad bacteriana grave, crónica, reemergente y zoonótica. Afecta a la producción pecuaria, así como a los animales silvestres y afectivos. En los hatos bovinos provoca sustanciales pérdidas económicas relacionadas con las medidas sanitarias para su control, e importantes restricciones comerciales a los productos derivados. Dado que las estrategias de prevención y control deben actualizarse con relación a los desarrollos científicos se realizó el estudio para presentar los avances y tendencias científico-tecnológicas alrededor de las estrategias sanitarias para el control de la TBb. Metodología: Se realizó una amplia consulta de artículos originales y de revisión, sobre vacunas y diagnóstico de TBb entre los años 2002 y 2017, en las bases de datos MEDLINE/PubMed, EBSCO y SciELO. Resultados: se encontró una activa y consistente acción internacional orientada a explorar formulaciones vacunales y avances en herramientas diagnósticas robustas. No se reportaron avances importantes en el desarrollo de inmunógenos para el ganado bovino. Tampoco se reportó una prueba con altos valores de sensibilidad (Se) y especificidad (Es) para el diagnóstico poblacional de la enfermedad. Conclusiones: se estima que los adelantos científicos y tecnológicos obtenidos durante los últimos años, no necesariamente van a contribuir por el momento, con el éxito de los programas nacionales de control y erradicación de la TBb. Por lo tanto, en este contexto la priorización de un abordaje integral que considere las realidades de cada región o país, dentro del concepto “Una sola salud”, el empleo combinado y estratégico de los sistemas diagnósticos el firme compromiso político de los gobiernos y la cooperación internacional son indispensables para avanzar en la lucha contra esta enfermedad. &nbsp

Global market for veterinary herbal products during the 2018-2019 period

A fabricação industrial de produtos naturais para uso animal é uma das grandes fragilidades do setor veterinário, apesar de um crescente interesse e do suporte dado pelos conhecimentos tradicionais ancestrais. Foi realizado um estudo observacional descritivo transversal para caracterizar os fitoterápicos veterinários comercializados mundialmente no período de 2018-2019 através de uma busca temática exaustiva nas bases de dados ScienceDirect, Scopus, PubMed, Web of Science, ResearchGate e Academic Search Complete. O estudo mostrou a existência de 487 produtos registrados no mercado mundial, fabricados por 54 empresas, lideradas pela Índia, Holanda e Reino Unido. Os segmentos Danimal produtivo e fitomedicamentos dominam o mercado com 73,7% e 53,0% dos produtos, respectivamente. Bovinos (22,2%), ovinos-cabras (16,2%) e caninos (16,2%) foram as espécies mais favorecidas. As indicações terapêuticas mais representadas foram aquelas destinadas à correção de distúrbios gastrointestinais (30,47%), antimicrobianos (16,66%) e antiparasitários (10,47%). Devido à alta frequência de uso, destacam se as famílias Fabaceae, Lamiaceae, Asteraceae, Apiaceae, Malvaceae e Rutaceae, que compreendem 35,0% das 137 espécies declaradas a saber, Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees e Withania somnífera (Lin) Dunal, são as mais importantes. Constatou-se que as formulações para uso interno via oral (72%) e líquida (51%) em embalagens de 100, 500 e 1000 mL são as que prevalecem no mercado. O mercado global de produtos fitoterápicos durante o período de 2018-2019 foi relevante para animais produtivos e o setor médico. Não foram encontradas diferenças entre as espécies de plantas medicinais utilizadas em formulações de produtos fitoterápicos para uso humano e animal.The industrial manufacturing of natural products for veterinary use represents a major weakness in the veterinary sector despite increased interest and the traditional ancestral knowledge that supports them. A cross-sectional, descriptive observational study was conducted to characterize the veterinary herbal products marketed worldwide during 2018 and 2019. A comprehensive thematic search limited to the 2018-2019 period was performed in the ScienceDirect, Scopus, PubMed, Web of Science, ResearchGate, and Academic Search Complete databases. The investigation identified 487 products registered in the global market manufactured by 54 companies, led by India, The Netherlands, and the United Kingdom. The market segments of animal production and phytomedicines were dominant with 73.7% and 53.0% of products, respectively. Cattle (22.2%), sheep-goats (16.2%), and canines (16.2%) were the most favored species. The most represented therapeutic indications were those intended to treat gastrointestinal disorders (30.47%), antimicrobials (16.66%), and antiparasitic agents (10.47%). The families Fabaceae, Lamiaceae, Asteraceae, Apiaceae, Malvaceae, and Rutaceae stood out because of their frequent use, encompassing 35.0% of the 137 declared species. Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees and Withania somnifera (Lin) Dunal were the most important species. Oral formulations for internal use (72%) and liquids (51%) in 100 mL, 500 mL, and 1 L presentations showed the highest prevalence on the market. The global market for veterinary herbal products during the 2018-2019 period was relevant in the productive and medical animal sector. No differences were found between medicinal plant species used to formulate herbal products for human and animal use

Hallazgos tisulares en peces adultos de Gambusia punctata (Poey 1854) crecidos bajo influencia minera

The tissue response of the fish Gambusia punctata (Poey, 1854) grown under natural conditions under chronic heavy metal exposure is reported. Adult individuals of both sexes were captured 10 km downstream of a former open-pit mining area in Santiago de Cuba, Cuba. Branchial deformities with moderate extension were identified in 80% of the investigated individuals. Likewise, 100% presented numerous ferric iron deposits inside the enterocytes.Se notifica la respuesta tisular del pez Gambusia punctata (Poey, 1854) crecido en condiciones naturales bajo la exposición crónica de metales pesados. Se capturaron individuos adultos de ambos sexos, a 10 km aguas debajo de una antigua zona minera a cielo abierto en Santiago de Cuba, Cuba. Se identificaron deformaciones branquiales con una extensión moderada en el 80% de los individuos investigados. Asimismo, el 100% presentó numerosos depósitos de hierro férrico en el interior de los enterocitos

Avances recientes en el estudio de factores de estrés prefaenado sobre la calidad de la carne bovina, aviar y porcina

Stress in the pre-slaughter stage is a critical period in the production chain because it causes losses in animal live weight, affects carcass yield and quality, and leads to a loss of animal welfare due to an alteration in the homeostasis of the organism as a result of exposure to stressful situations. This review identifies and describes the stressors that have been reported in the last 5 years as the main causes of meat quality deterioration, including animal handling activities by farm or plant personnel (transport, loading and unloading, in the slaughter plant), environmental conditions (temperature, vibrations), waiting time prior to slaughter and mixing of lots, water and food fasting period, and fatigue states, as well as the biomarkers routinely used for the study of conditions associated with stress. Although research on the subject is abundant, the biochemical mechanisms involved in obtaining certain organoleptic characteristics of meat with respect to stress levels and the individual variations observable in different groups of animals are still not completely clear, and more research is needed on stress biomarkers that allow a more specific, effective and non-invasive identification and measurement.El estrés en la etapa de prefaenado es un periodo crítico dentro de la cadena productiva al provocar pérdidas en el peso vivo del animal, afectaciones en el rendimiento y calidad de la canal y pérdida del bienestar animal debido a una alteración de homeóstasis del organismo por la exposición a situaciones estresantes. En la presente revisión se identifican y describen los factores estresores que se han reportado en los últimos 5 años como principales causas de deterioro de la calidad de la carne entre los cuales se incluyen actividades de manejo de los animales por parte del personal de granja o planta (transporte, carga y descarga, en planta de sacrificio), condiciones ambientales (temperatura, vibraciones), tiempo de espera previo al sacrificio y mezcla de lotes, periodo de ayuno de agua y comida, y estados de fatiga, así como los biomarcadores usados rutinariamente para el estudio de condiciones asociadas al estrés. Aunque las investigaciones sobre el tema son abundantes, aún no es totalmente claro los mecanismos bioquímicos involucrados en la obtención de ciertas características organolépticas de la carne con respecto a niveles de estrés y las variaciones individuales observables en diferentes grupos de animales, así mismo, se requiere mayor investigación en los biomarcadores de estrés que permitan una identificación y medición más específica, efectiva y no invasiva

Toxicidade dérmica e oftálmica do extrato hidroalcoholico de Curcuma longa, Linn (Curcuvet) em modelos in vivo

Transforming medicinal plants into industrializable and marketable products involves meeting numerous regulatory requirements regarding the quality, safety, efficacy and stability of the proposed formulation. In this context, the product Curcuvet (antiseptic and healing solution obtained from the hydroalcoholic extract of C. longa) needs to demonstrate its safety before being legally used in veterinary clinical practice. Therefore, the present work aimed to evaluate in vivo the dermal and ophthalmic toxic potentialities of the product. To achieve this, three in vivo investigations were carried out: acute dermal toxicity, primary dermal irritancy and ophthalmic irritancy according to the standards described by the Organization for Economic Cooperation and Development (OECD) No. 434, 404 and 405, respectively. The Curcuvet product in all tests was administered as a single dose, superficially on both skin (Sprague Dawley rat and F1 rabbits) and ocular mucosa (New Zealand albino rabbits). The Curcuvet product was not irritating to the skin of rats and rabbits, but not to the ocular structures, which were severely damaged, reaching an irritancy index of 110. It is concluded that the Curcuvet formulation, administered in single dose, was not a dermal irritant and a severe ophthalmic irritant.Transformar las plantas medicinales en productos industrializables y comercializables implica cumplir numerosas exigencias regulatorias, sobre calidad, seguridad, eficacia y estabilidad de la formulación propuesta. En este contexto, el producto Curcuvet (solución antiséptica y cicatrizante obtenida a partir del extracto hidroalcohólico de C. longa) necesita demostrar su inocuidad antes de utilizarse legalmente en la práctica clínica veterinaria. Por tanto, el presente trabajo tuvo como objetivo evaluar in vivo las potencialidades tóxicas dérmica y oftálmica del producto. Para lograrlo se realizaron tres investigaciones in vivo: toxicidad aguda dérmica, irritabilidad dérmica primaria e irritabilidad oftálmica según las normas descritas por la Organización para la Cooperación Económica y el Desarrollo (OECD) No. 434, 404 y 405 respectivamente. El producto Curcuvet en todos los ensayos fue administrado en dosis única, de forma superficial tanto en piel (rata Sprague Dawley y conejos F1) como en mucosa ocular (conejos albinos Nueva Zelanda). El producto Curcuvet no resultó irritante para la piel de ratas y conejos, no así para las estructuras oculares, las cuales fueron severamente dañadas, alcanzándose un índice de irritabilidad de 110. Se concluye que la formulación Curcuvet administrado en dosis única, resultó no irritante dérmico e irritante severo oftálmico.A transformação de plantas medicinais em produtos industrializáveis e comercializáveis envolve o cumprimento de inúmeros requisitos regulamentares sobre qualidade, segurança, eficácia e estabilidade da formulação proposta. Neste contexto, o produto Curcuvet (uma solução anti-séptica e curativa obtida a partir do extrato hidroalcoólico de C. longa) precisa demonstrar sua segurança antes de poder ser legalmente utilizado na prática clínica veterinária. Portanto, o presente trabalho visou avaliar o potencial tóxico dérmico e oftálmico do produto in vivo. Para isso, foram realizadas três investigações in vivo: toxicidade dérmica aguda, irritação dérmica primária e irritação oftalmológica de acordo com as normas descritas pela Organização para Cooperação e Desenvolvimento Econômico (OCDE) No. 434, 404 e 405, respectivamente. O curcuvet em todos os testes foi administrado como dose única, superficialmente tanto à pele (rato Sprague Dawley e coelhos F1) quanto à mucosa ocular (coelhos albinos da Nova Zelândia). O Curcuvet não era irritante para a pele de ratos e coelhos, mas não para as estruturas oculares, que estavam gravemente danificadas, atingindo um índice de irritação de 110. Conclui-se que a formulação Curcuvet, administrada em doses únicas, era não-irritante para a pele e severamente irritante para a mucosa oftálmica

Effect of dietary garlic (Allium sativum) on the zootechnical performance and health indicators of aquatic animals: A mini-review

Considerable efforts have been made by modern aquaculture to mitigate the environmental damages caused by its practices while also attempting to improve the quality of the aquatic organisms by promoting alternatives, such as the use of natural products, like garlic (Allium sativum), and instead of chemical agents. Garlic has multiple properties, including antifungal, antibacterial, antiviral, antitoxic, and anticancer effects. In fish, the antiparasitic activity of garlic is one of the most reported effects in the literature, mainly using immersion baths for aquatic organisms. Using garlic also has an antimicrobial effect on the culture of aquatic organisms. Therefore, this review focuses on the impact of garlic on the health and production of aquatic organisms