Standardization of a protocol to extract and analyze chlorophyll a and carotenoids in Gracilaria tenuistipitata Var. Liui. Zhang and Xia (Rhodophyta)

Chlorophyll a and carotenoids are important pigments in photosynthesis. Several studies have been published describing extraction and analysis protocols of these pigments, mainly in vascular plant species. This study standardizes an extraction and analysis protocol of these substances in Gracilaria tenuistipitata var. liui, a red seaweed. Apical portions grown in vitro were triturated in liquid nitrogen. Extracts were prepared in 1.5 mL solvent and centrifuged. Quantitative and qualitative analyses of pigments were performed by UV/visible light spectrophotometry and high performance liquid chromatography (HPLC) and HPLC coupled to mass spectrometry (HPLC-MS). The parameters assessed were: minimum biomass, best extraction solvent, and number of extraction steps. Methanol was the most efficient solvent, and 50 mg fresh biomass was the amount of sample indicated, submitted to one single extraction step. No significant differences were observed in levels of these pigments by UV-visible light spectrophotometry and HPLC. However, HPLC or HPLC-MS are required to identify the different carotenoids present in this seaweed species.Clorofila a e carotenoides são importantes pigmentos da fotossíntese. Na literatura são encontrados vários protocolos de extração e análise desses pigmentos utilizando, principalmente, plantas vasculares. O objetivo deste estudo foi padronizar uma metodologia de extração e análise dessas substâncias em uma macroalga vermelha, Gracilaria tenuistipitata var. liui. Amostras de talos gametofíticos cultivados in vitro foram trituradas em nitrogênio líquido, extraídas em 1,5 mL de solvente, centrifugadas e os pigmentos analisados quantitativamente e qualitativamente através de espectrofotometria de UV/visível, cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) e CLAE-acoplada a espectrometria de massas (CLAE-EM). Foram testados os parâmetros massa mínima, solvente para extração e número de extrações. Dentre os solventes testados, o metanol foi o mais eficiente, sendo 50mg de material fresco a massa mínima indicada para ser submetida a somente uma extração. Não foram encontradas diferenças significativas na quantificação desses pigmentos comparando-se os dados obtidos em espectrofotometria de UV/visível com os de CLAE. No entanto, para a identificação dos diferentes carotenoides e suas quantificações são necessárias CLAE ou CLAE-EM.The authors thank FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo) for their financial support (2010/02948-3), and CNPq (Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico) for PBT fellowship

Constituents and antiproliferative activity of extracts from leaves of Croton macrobothrys

Croton macrobothrys Baill, Euphorbiaceae, is a tree from the Atlantic Forest in Southern Brazil, used in traditional medicine and popularly known as "dragon's blood" and "pau-sangue". Leaf n-hexane, dichloromethane and methanol extracts were analyzed by GC/MS and evaluated for their in vitro antiproliferative activity on cell lines 786-0 (kidney), HT-29 (colon), K562 (leukemia), NCI-ADR/RES (drug resistant ovary), NCI-H460 (lung), MCF-7 (mammary), PC-3 (prostate), OVCAR-3 (ovary), U251 (glioma) and UACC-62 (melanoma). The dicloromethane extract exhibited activity against all cell lines at the concentration 25 µg/mL, in particular on cell lines NCI-H460 (GI50 0.33 μg/mL) and K5662 (GI50 0.91 μg/mL). Relevant constituents in dichloromethane extract are the alkaloids corydine and salutaridine, as well as the diterpenes geranylgeraniol and crotonin-derived clerodanes

Ozone sensitivity assessment of 'Pedro Sato' guava

O objetivo deste trabalho foi avaliar a sensibilidade da goiabeira 'Pedro Sato' ao ozônio (O3), em comparação à cultivar Paluma, descrita como sensível. Oito plantas de cada cultivar foram submetidas separadamente a ar filtrado e a ar filtrado + O3, cinco horas por dia, durante quatro dias. Foram avaliadas fotossíntese (Asat), injúrias foliares visíveis e concentração de antocianinas e taninos. Plantas das duas cultivares também foram expostas, durante três meses, a condições ambientais em local contaminado por O3, tendo-se avaliado fotossíntese, injúrias foliares e crescimento. Plantas fumigadas com O3 apresentaram redução de Asat e da atividade fotoquímica, além de manifestação de injúrias foliares. 'Paluma' apresentou maior redução de Asat, injúrias foliares mais severas e redução de taninos. Quando exposta ao ambiente contaminado, 'Paluma' apresentou trocas gasosas mais altas, mas apresentou redução de Asat 30 dias antes que 'Pedro Sato'. O crescimento não foi afetado em 'Pedro Sato', cujas injúrias foliares tiveram menor incidência, severidade e precocidade do que em 'Paluma'. A menor taxa de crescimento de 'Paluma' indica maior sensibilidade ao O3. Apesar de responder com menor intensidade ao estresse induzido pelo O3, a cultivar Pedro Sato não pode ser considerada tolerante, pois apresenta danos fotoquímicos, injúrias foliares e alterações nos conteúdos de metabólitos secundários quando exposta a esse poluente.The objective of this work was to evaluate the sensitivity of 'Pedro Sato' guava to ozone (O3), in comparison to the cultivar Paluma, considered sensitive. Eight plants of each cultivar were subjected separately to filtered air and filtered air + O3 five hours per day, for four days. Photosynthesis (Asat), visible foliar injuries, and concentration of anthocyanin and tannin were evaluated. Plants of both cultivars were also exposed, during three months, to environmental conditions at a site polluted by O3, and growth, photosynthesis, and injuries were evaluated. Plants fumigated with O3 showed reduction of Asat and photochemical activity, besides foliar injury expression. 'Paluma' showed greater reduction of Asat, severe foliar injury and tannin reduction. When exposed to the polluted environmental conditions, 'Paluma' had higher gas exchange, but showed Asatt decrease 30 days before 'Pedro Sato'. Growth was not affected in 'Pedro Sato', whose foliar injuries had lower incidence, severity, and precocity than in 'Paluma'. The lower growth rate of 'Paluma' indicates greater O3 sensitivity. Although the cultivar Pedro Sato responded with less intensity to ozone-induced stress, it cannot be considered tolerant, since it is susceptible to photochemical damage, foliar injuries, and alterations in secondary metabolite content when exposed to this contaminant

Introdução - Disciplina: História da Vida na Terra e Distribuição Atual da Vida no Planeta

Introdução - Disciplina: História da Vida na Terra e Distribuição Atual da Vida no Planet