Polymorphisms in the MBL2 gene are associated with the plasma levels of MBL and the cytokines IL-6 and TNF-α in severe COVID-19

IntroductionMannose-binding lectin (MBL) promotes opsonization, favoring phagocytosis and activation of the complement system in response to different microorganisms, and may influence the synthesis of inflammatory cytokines. This study investigated the association of MBL2 gene polymorphisms with the plasma levels of MBL and inflammatory cytokines in COVID-19.MethodsBlood samples from 385 individuals (208 with acute COVID-19 and 117 post-COVID-19) were subjected to real-time PCR genotyping. Plasma measurements of MBL and cytokines were performed by enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry, respectively.ResultsThe frequencies of the polymorphic MBL2 genotype (OO) and allele (O) were higher in patients with severe COVID-19 (p< 0.05). The polymorphic genotypes (AO and OO) were associated with lower MBL levels (p< 0.05). IL-6 and TNF-α were higher in patients with low MBL and severe COVID-19 (p< 0.05). No association of polymorphisms, MBL levels, or cytokine levels with long COVID was observed.DiscussionThe results suggest that, besides MBL2 polymorphisms promoting a reduction in MBL levels and therefore in its function, they may also contribute to the development of a more intense inflammatory process responsible for the severity of COVID-19

Infecção persistente pelos flavivírus Ilhéus e Rocio em hamsters dourados jovens (Mesocricetus auratus)

Ilheus (ILHV) and Rocio (ROCV) are flaviviruses (family Flaviviridae, genus Flavivirus) of great importance to public health in Brazil because these viruses are associated to encephalitis cases in humans. Recent studies have reported persistence of experimental infections (in vivo and in vitro) and clinical reports. The purpose of this study was to investigate in vivo the possible occurrence of persistent infection caused by ILHV and ROCV using young golden hamsters (Mesocricetus auratus) as experimental model. Hamsters were inoculated intraperitoneally with a suspension of brains of newborn mice infected with titers of 9.8 and 9.6 DL50/ 0.02 mL of ROCV and ILHV respectively, and at pre-determined intervals, they were anesthetized and sacrificed for collection of blood samples, serum and urine and organ fragments during four months (120 days) post-inoculation (p.i.). Viral quantification was calculated in samples of brain, liver and blood, using the technique of Real Time RT-PCR (qRT-PCR). All collected specimens were inoculated into VERO cells for confirmation of viral replication; and viral antigens in the cell cultures were detected by indirect immunofluorescence test; the levels of antibodies were determined by hemagglutination-inhibition test. Histopathological examination by hematoxylin-eosin and detection of viral antigens by imunohistochemistry were assayed in viscera and central nervous tissue samples collected during the kinetics. The study showed that young golden hamsters are good experimental model for persistent infection by the flaviviruses ILHV and ROCV. Both viruses induced strong immune response, although the levels of antibodies to ILHV were greater than for ROCV. The ROCV has demonstrated to be more pathogenic in these animals, suggesting higher ability to cause neuronal invasiveness than ILHV. Infected viscera samples inoculated in VERO cells resulted in growth of both viruses from all infected organ, blood, serum and urine samples and were confirmed by indirect immunofluorescence assay. Regarding persistence of infection, ROCV was detected in the brain, liver and blood by qRT-PCR, for three months p.i., while ILHV persistence was observed only in the brain for 30 days p.i. by qRT-PCR. The ROCV was able to produce histopathological changes, and immuno-labeled cells expressing viral antigens in liver, kidney, lung and brain samples during four month were confirmed by imunohistochemistry. To the ILHV, the histopathological changes and expression of viral antigens in samples from the liver, kidney and lung were only confirmed up to 30 days p.i., but the brain was positive for four months p.i.; The findings obtained in this study showed that both viruses have capacity to cause persistent infection in hamsters intraperitoneally infected, studies additional are needed to determine the pathophysiology and pathogenesis of ILHV and ROCV persistent infections.FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e PesquisasOs arbovírus Ilhéus (VILH) e Rocio (VROC) são flavivirus (família Flaviviridae, gênero Flavivirus) de grande importância para a saúde pública no Brasil por estar relacionados a casos de encefalites em humanos. Sabe-se que outros flavivírus estão envolvidos com a infecção persistente in vitro, in vivo e em relatos clínicos. Deste modo, o objetivo desse trabalho foi investigar a possível ocorrência de infecção persistente in vivo dos VILH e VROC utilizando hamsters dourados jovens (Mesocricetus auratus) como modelo experimental. Os hamsters foram inoculados com suspensão de cérebros de camundongos recém-nascidos infectados com títulos de 9,8 e 9,6 DL50/0,02 mL do VROC e VILH respectivamente, pela via intraperitoneal, sendo em seguida a intervalos pré-determinados, anestesiados e sacrificados para coleta de amostras de sangue, soro, urina e órgãos durante quatro meses (120 dias) pós-inoculação (p.i.). A quantificação viral foi calculada em amostras de cérebro, fígado e sangue, pela técnica de RT-PCR em tempo real (qRT-PCR). Todas as amostras coletadas foram inoculadas em célula VERO para confirmação de replicação viral, sendo detectados antígenos virais pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI), os níveis de anticorpos foram determinados pelo teste de inibição da hemaglutinação. Exame histopatológico por hematoxilina-eosina e detecção de antígenos virais por imunohisquímica foram avaliados nas amostras de vísceras e encéfalos coletados durante a cinética. O estudo demonstrou que hamsters dourados jovens constituem um bom modelo experimental para infecção persistente pelos flavivírus VILH e VROC. Os dois vírus induziram uma forte resposta imune, embora os níveis de anticorpos para o VILH tenham sido maior do que para o VROC; já o VROC mostrou-se mais patogênico nestes animais, sugerindo uma capacidade de neurovirulência maior que o VILH. Das amostras coletadas dos hamsters infectados e inoculadas em células VERO foi possível isolar ambos os vírus a partir de todos os órgãos, sangue, soro e urina, sendo confirmada a replicação viral por IFI. Quanto à infecção persistente, o VROC foi detectado, pela técnica de qRT PCR, por três meses p.i., no cérebro, fígado e sangue, enquanto o VILH apresentou persistência viral apenas no cérebro durante 30 dias p.i. por qRT PCR. O VROC foi capaz de produzir alterações histopatológicas e células imuno-marcadas expressando antígenos virais nas amostras de fígado, rim, pulmão e cérebro por quatro meses. Ao passo que para o VILH, as alterações histopatológicas e a expressão de antígenos virais nas amostras de fígado, rim e pulmão ocorreram por 30 dias p.i.; e no cérebro por quatro meses p.i.; Os achados deste estudo demonstraram que ambos os vírus apresentaram capacidade de causar infecção persistente em hamsters infectados por via periférica, sendo necessários mais estudos para determinar os mecanismos fisiopatológicos e a patogênese de estabelecimento dessas infecções persistentes

Imunopatologia hepática da infecção experimental do vírus dengue em Callithrix penicillata

Dengue is one of most important public health problem in the world, and one of the factors that contribute with this situation is the lack of an effective vaccine against the disease, and in part, this difficulty to obtain is due clinical the lack of an experimental model that mimic the infection and manifestation of the disease as those observed in humans. Then, the Evandro Chagas Institute showed the presence of dengue antigens using the Immunohistochemistry assay, in the liver of a non-human primate (NHP) of the species Callithrix jacchus, with a fatal outcome following dengue hemorrhagic fever. Based in the above considerations and in addition to the fact that the liver is the targetb organ for Dengue Virus (DENV) in humans, it is important to analyze the liver of primates of the genus Callithrix in order to study the pathogenesis and the immunopathology of sequential infection by DENV. A total of 26 NHP Callithrix penicillata were submitted to primary infection (PI) subcutaneously with DENV-3 (3.23 x 103 PFU/mL), and 13 of these animals anesthetized and sacrificed daily for seven days post-infection (dpi) (acute phase) and in random intervals until 60 dpi (convalescent phase); the secondary infection (SI) with DENV-2 (4.47 x 104 PFU/mL) was performed two months after the PI in the remaining 13 animals. Uninfected sentinels animals were reserved up ending of the experiment. The liver of the animals were processed for histopathology and Immunohistochemical assay using polyclonal antibodies to DENV and antibodies for analyses of the innate and cellular immune response as well as the cytokine expression . The NHP were susceptible to sequential infection by DENV-3 and DENV-2; in the liver viral antigens were expressed in hepatocytes, Kupffer cells and Councilman bodies; the histopathological changes in liver was characterized by the presence of apoptosis, focal lytic necrosis, steatosis, swelling cellular, inflammation (acinar, EP and HCV), hyperplasia/hypertrophy in Kupffer cells, hemosiderin in Kupffer cells and sinusoidal dilatation; the intensity of the liver damage was prominent in the acute phase of PI and SI resulting in acute hepatitis. In addition the apoptosis was the most frequent mechanism of death of hepatocytes; lytic necrosis and inflammatory infiltrate showed predominant distribution pattern in Z2. An increase of the acinar expression of activated macrophages, NK cells, S-100 protein and B-lymphocytes during the stages of PI and SI; as well as, increased acinar expression of TCD4 + lymphocytes during the acute phase of PI; as to the quantification of cytokines and molecules, was observed an increase in acinar expression of: IFN- during the stages of PI and SI, TNF-α and IL-8 with higher prevalence in SI, TGF-β and IL-10 with prevalence in acute phase of PI, Fas protein during the acute phase of PI and SI and VCAM in acute phase of SI, as well as increase in expression in the EP. These findings were similar to those observed in livers from fatal cases of dengue fever in humans, but with lower intensity and amplitude, thus indicating that NHP Callithrix penicillata species is a good experimental model for infection by DENV, involving immunopathologic studies.A Dengue constitui um dos principais problemas de Saúde Pública no mundo, e um dos fatores que colaboram com esta situação é a falta de uma vacina eficaz contra a doença, sendo que em parte, essa dificuldade para obtenção, se deve à inexistência de um modelo experimental que represente o quadro de infecção e manifestação da doença similar aos observados em humanos. Dessa forma, o Instituto Evandro Chagas demonstrou a presença de antígenos virais de dengue, através do teste de Imuno-histoquímica, em primata não humano (PNH) da espécie Callithrix jacchus, o qual evoluiu a óbito com quadro de dengue hemorrágica. Diante do exposto, aliados ao fato de que o fígado é o órgão onde se observa as principais alterações provocadas pelo Virus Dengue (VDEN) em humanos, torna-se importante analisar o fígado de primatas do gênero Callithrix a fim de estudar a patogênese e a imunopatologia da infecção sequencial pelo VDEN. No total, 26 PNH da espécie Callithrix penicillata foram submetidos a infecção primária (IP) por via subcutânea com VDEN-3 (3,23 x 103 PFU/mL), sendo 13 destes animais anestesiados e sacrificados diariamente por sete dias pós-infecção (dpi) (fase aguda) e em intervalos aleatórios até 60 dpi (fase convalescente); a infecção secundária (IS) com VDEN-2 (4,47 x 104 PFU/mL) foi realizada dois meses após a IP nos demais 13 animais. Animais sentinelas não infectados foram reservados até o final do experimento. O fígado dos animais foram processados para histopatologia e imunohistoquímica usando anticorpos policlonais para VDEN e anticorpos para análises da resposta imune inata, celular e citocínica. Os PNH estudados foram suscetíveis à replicação sequencial do VDEN-3 e VDEN-2 no fígado, havendo expressão de antígenos virais em hepatócitos, células de Kupffer e nos corpúsculos de Councilman; o comprometimento histopatológico do fígado foi caracterizado por: presença de apoptose; focos de necrose lítica; esteatose; tumefação cellular; inflamação acinar, no espaço porta (EP) e na veia hepática central (VHC); hiperplasia/hipertrofia em células de Kupffer, bem como, hemossiderina em células de Kupffer; e dilatação dos sinusóides. A intensidade da lesão hepática foi proeminente na fase aguda da IP e IS, apresentando discreta hepatite aguda. A apoptose foi a forma predominante de morte em hepatócitos; bem como, necrose lítica e o infiltrado inflamatório apresentaram padrão de distribuição predominante em Z2. Observou-se aumento na expressão acinar de macrófagos ativados, células NK, proteína S-100 e linfócitos B durante as fases da IP e IS; houve ainda, aumento da expressão acinar de linfócitos TCD4+ durante a fase aguda da IP; observou-se aumento na expressão acinar de IFN- durante as fases da IP e IS, TNF-α e IL-8 com maior prevalência na IS, TGF-β e IL-10 mais expressas na fase aguda da IP, proteína Fas durante a fase aguda da IP e IS e VCAM na fase aguda da IS e aumento na expressão nos EP. Esses achados foram semelhantes aos observados em fígados de casos fatais de dengue em humanos, porém com intensidade e amplitude menor, sugerindo que PNH da espécie Callithrix penicillata é um bom modelo experimental para o estudo da infecção pelo VDEN, especialmente os aspectos imunopatológicos

Glaucoma and Congenital Zika Syndrome

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2016-12-29T16:03:43Z No. of bitstreams: 1 Freitas Glaucoma and Congenital Zika Syndrome.pdf: 423188 bytes, checksum: 371f922dbae3dbd148a67e5cd55ef721 (MD5)Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2016-12-29T16:26:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Freitas Glaucoma and Congenital Zika Syndrome.pdf: 423188 bytes, checksum: 371f922dbae3dbd148a67e5cd55ef721 (MD5)Made available in DSpace on 2016-12-29T16:26:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freitas Glaucoma and Congenital Zika Syndrome.pdf: 423188 bytes, checksum: 371f922dbae3dbd148a67e5cd55ef721 (MD5) Previous issue date: 2016Hospital Geral Roberto Santos. Department of Ophthalmology. Salvador, BA, Brasil / Federal University of São Paulo. Paulista Medical School. Vision Institute. Department of Ophthalmology. São Paulo, SP, BrasilFundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Yale School of Public Health. Department of Epidemiology of Microbial Diseases. New Haven, ConnecticutFundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, BrasilHospital Geral Roberto Santos. Department of Ophthalmology. Salvador, BA, BrasilEvandro Chagas Institute Ministry of Health. Department of Arbovirology and Hemorrhagic Fevers. Ananindeua, BrazilFederal University of São Paulo. Paulista Medical School. Vision Institute. Department of Ophthalmology. São Paulo, SP, BrasilFederal University of São Paulo. Paulista Medical School. Vision Institute. Department of Ophthalmology. São Paulo, SP, Brasi

Estudio serológico de Alphavirus en herbívoros domésticos en el Estado de Pará, Amazonía Brasileña

This study was partially supported by the National Council for Scientific and Technological Development (CNPq) (grant 301641/2010-2).Universidade Federal Rural da Amazônia. Instituto da Saúde e Produção Animal. Belém, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Centro de Inovações Tecnológicas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil / Universidade do Estado do Pará. Departamento de Patologia. Belém, PA, Brasil.O Estado do Pará compreende 26% da Amazônia brasileira, onde uma grande diversidade de arbovírus é descrita. Este estudo teve como objetivo avaliar a prevalência e distribuição de inibição da hemaglutinação (HI) que detecta anticorpos contra quatro tipos de vírus: vírus da encefalite equina do leste (EEL), vírus da encefalite equina do oeste (EEO), vírus Mayaro (MAYV) e vírus Mucambo (MUCV), um subtipo do vírus da encefalite equina venezuelana (VEEV), em 2.191 amostras de soro de equinos, bovinos, ovinos e bubalinos no Estado do Pará, Brasil. O objetivo foi identificar a prevalência de anticorpos nestes animais de fazenda para determinar quais arbovírus estão circulando e determinar que animal é mais sensível para detectar Alphavirus. Os anticorpos contra os arbovírus investigados foram detectados em quase todos os animais das espécies estudadas. Os resultados indicaram que herbívoros domésticos são suscetíveis aos arbovírus testados e evidencia Alphavirus ativos em animais de fazenda na Amazônia brasileira. Uma análise da prevalência de anticorpos HI por espécies de animais indicaram diferença significativa entre equinos e bubalinos, bovinos e ovinos. Os equinos apresentaram maior prevalência de anticorpos em reações heterotípicas, os quais demonstram ser as melhores espécies de animais de fazenda como sentinelas para detectar a circulação de arbovírus na Amazônia brasileira

Seizures as a Complication of Congenital Zika Syndrome in Early Infancy

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2018-08-07T14:08:53Z No. of bitstreams: 1 Oliveira-Filho J Seizures as a Complication of Congenital Zika.pdf: 82677 bytes, checksum: e67ebd92b967354def5e0e51f9e225c4 (MD5)Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2018-08-07T15:44:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Oliveira-Filho J Seizures as a Complication of Congenital Zika.pdf: 82677 bytes, checksum: e67ebd92b967354def5e0e51f9e225c4 (MD5)Made available in DSpace on 2018-08-07T15:44:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira-Filho J Seizures as a Complication of Congenital Zika.pdf: 82677 bytes, checksum: e67ebd92b967354def5e0e51f9e225c4 (MD5) Previous issue date: 2018NIH Grants RO1 NS064905, NIH R01 AI052473, U01 AI088752, and R25 TW009338, and the Oswaldo Cruz FoundationUniversidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Postgraduate Program in Health Sciences. Salvador, BA, BrasilUniversidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Instituto de Saúde Coletiva. Escola de Enfermagem. Salvador, BA, BrasilUniversidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Instituto de Saúde Coletiva. Escola de Enfermagem. Salvador, BA, BrasilFundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, BrasilHospital Geral Roberto Santos. Secretaria Estadual da Saúde da Bahia. Salvador, BA, BrasilInstituto Evandro Chagas. Belem, PA, BrasilFundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Yale School of Public Health. Department of Epidemiology of Microbial Diseases. New Haven, ConnecticutFor The Salvador Zika Response TeamZika virus transmission in Brazil was linked to a large outbreak of microcephaly but less is known about longer term anthropometric and neurological outcomes. We studied a cohort of infants born between October 31, 2015, and January 9, 2016, in a state maternity hospital, followed up for 101 ± 28 days by home visits. Microcephaly (< 2 standard deviations, Intergrowth standard) occurred in 62 of 412 (15%) births. Congenital Zika syndrome (CZS) was diagnosed in 29 patients. Among CZS patients, we observed a significant gain in anthropometric measures (P < 0.001) but no significant gain in percentile for these measures. The main neurological outcome was epilepsy, occurring in 48% of infants at a rate of 15.6 cases per 100 patient-months, frequently requiring multiple anti-seizure medications. The cumulative fatality rate was 7.4% (95% confidence interval: 2.1-23.4%). Health-care professionals should be alerted on the high risk of epilepsy and death associated with CZS in early infancy and the need to actively screen for seizures and initiate timely treatment

Seizures as a Complication of Congenital Zika Syndrome in Early Infancy

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2018-08-07T14:08:53Z No. of bitstreams: 1 Oliveira-Filho J Seizures as a Complication of Congenital Zika.pdf: 82677 bytes, checksum: e67ebd92b967354def5e0e51f9e225c4 (MD5)Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio ([email protected]) on 2018-08-07T15:44:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Oliveira-Filho J Seizures as a Complication of Congenital Zika.pdf: 82677 bytes, checksum: e67ebd92b967354def5e0e51f9e225c4 (MD5)Made available in DSpace on 2018-08-07T15:44:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira-Filho J Seizures as a Complication of Congenital Zika.pdf: 82677 bytes, checksum: e67ebd92b967354def5e0e51f9e225c4 (MD5) Previous issue date: 2018NIH Grants RO1 NS064905, NIH R01 AI052473, U01 AI088752, and R25 TW009338, and the Oswaldo Cruz FoundationUniversidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Postgraduate Program in Health Sciences. Salvador, BA, BrasilUniversidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Instituto de Saúde Coletiva. Escola de Enfermagem. Salvador, BA, BrasilUniversidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Instituto de Saúde Coletiva. Escola de Enfermagem. Salvador, BA, BrasilFundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, BrasilHospital Geral Roberto Santos. Secretaria Estadual da Saúde da Bahia. Salvador, BA, BrasilInstituto Evandro Chagas. Belem, PA, BrasilFundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Yale School of Public Health. Department of Epidemiology of Microbial Diseases. New Haven, ConnecticutFor The Salvador Zika Response TeamZika virus transmission in Brazil was linked to a large outbreak of microcephaly but less is known about longer term anthropometric and neurological outcomes. We studied a cohort of infants born between October 31, 2015, and January 9, 2016, in a state maternity hospital, followed up for 101 ± 28 days by home visits. Microcephaly (< 2 standard deviations, Intergrowth standard) occurred in 62 of 412 (15%) births. Congenital Zika syndrome (CZS) was diagnosed in 29 patients. Among CZS patients, we observed a significant gain in anthropometric measures (P < 0.001) but no significant gain in percentile for these measures. The main neurological outcome was epilepsy, occurring in 48% of infants at a rate of 15.6 cases per 100 patient-months, frequently requiring multiple anti-seizure medications. The cumulative fatality rate was 7.4% (95% confidence interval: 2.1-23.4%). Health-care professionals should be alerted on the high risk of epilepsy and death associated with CZS in early infancy and the need to actively screen for seizures and initiate timely treatment

Arbovirus outbreak in a rural region of the Brazilian Amazon

Evandro Chagas InstituteMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, BrasilMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, BrasilMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, BrasilMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, BrasilMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, BrasilMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, BrasilMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, BrasilMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, BrasilBackground: An outbreak of febrile illness was reported from January to February 2018 in the Expedito Ribeiro Settlement, ​​Santa Bárbara do Pará municipality, Pará State, Brazil. Objective: This study aimed to investigate the pathogenic agent responsible for the outbreak and the circulation of arboviruses in the region. Study design: We analyzed 94 individuals through laboratory tests for arboviruses. Forty out of 94 individuals were asymptomatic but were living with or near febrile cases, and 55 participants were symptomatic. Results: Our results showed that 51.1% of the investigated individuals were positive for arboviruses (Oropouche, Mayaro, and Chikungunya), of which 77.8% were symptomatic. We detected 93.7% of positive cases for Oropouche infection, 2.1% for Mayaro fever, and 4.2% were positive for both Oropouche and Chikungunya infection. Conclusion: Oropouche virus was mainly responsible for the outbreak; however, we also detected a few Chikungunya and Mayaro fever cases. Serologic assays showed evidence of arboviruses circulation of different genera in the area

Prevalence of antibodies to equine alphaviruses in the State of Pará, Brazil

ABSTRACT: The State of Pará comprises 26% of Brazilian Amazon region, where a large diversity of arboviruses has been described. This study sought to assess the prevalence and distribution of hemagglutination inhibition (HI) antibodies against antigens of four alphaviruses (Togaviridae: Alphavirus ) from the species: Eastern equine encephalitis (EEEV), Western equine encephalitis (WEEV), Mayaro virus (MAYV), and Mucambo virus (MUCV) in 753 serum samples of horses in Pará State, Brazil. All investigated arboviruses were detected and indicate that horses are susceptible to these alphaviruses, and show evidences of their active circulation in farm animals in the Brazilian Amazon

Persistent infection by Ilheus virus in golden hamsters (Mesocricetus auratus)

Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Universidade Federal do Pará. Núcleo de Medicina Tropical. Belém, PA, Brasil / Universidade do Estado do Pará. Departamento de Patologia. Belém, PA, Brasil.Universidade Federal do Pará. Núcleo de Medicina Tropical. Belém, PA, BrasilMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Universidade Federal do Pará. Núcleo de Medicina Tropical. Belém, PA, BrasilMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.Introdução: O vírus Ilheus (VILH) é um arbovírus de ocorrência no Brasil, pertencente a família Flaviviridae, gênero Flavivirus, enquadrado clinicamente como encefalitogênico. Estudos de infecções experimentais com alguns flavivírus demonstraram que esses possuem capacidade de causar persistência da infecção. Objetivo: Investigar a infecção persistente pelo VILH em hamsters dourados (Mesocricetus auratus). Materiais e Métodos: Os hamsters foram infectados por via intraperitoneal com VILH (9,6 DL50/0,02 mL), sendo, por um período de até 120 dias pós-inoculação (d.p.i.), anestesiados e sacrificados para coleta de amostras de sangue, urina e tecidos. Títulos virais para o VILH foram quantificados por transcrição reversa seguida de reação em cadeia mediada pela polimerase em tempo real (qRT-PCR) nas amostras biológicas, e as mesmas foram utilizadas para infectar células VERO, com confirmação da replicação viral por imunofluorescência. Níveis de anticorpos totais no soro foram determinados pela técnica inibição da hemaglutinação, as alterações teciduais observadas por meio do exame histopatológico corado por hematoxilina-eosina e detecção de antígenos virais por imuno-histoquímica. Resultados: O VILH induziu forte resposta imune, demonstrou ser patogênico para hamsters, causando invasão neuronal, foi isolado em células VERO de vísceras, cérebro, sangue, soro e urina dos hamsters infectados e detectado por qRT-PCR no cérebro, fígado e sangue com 30, seis e 15 d.p.i., respectivamente. As alterações histopatológicas e a expressão de antígenos virais, nas amostras de fígado, rim e pulmão, ocorreram com 30 d.p.i.; e no cérebro, até quatro meses pós-inoculação. Conclusão: Os resultados obtidos mostraram que o VILH é patogênico para hamsters dourados e tem capacidade de causar infecção persistente em hamsters infectados por via periférica.Introduction: Ilheus virus (ILHV) is a Brazilian arbovirus belonging to the Flaviviridae family and Flavivirus genus. The virus is clinically classified as encephalitogenic, and is known to cause infection persistence. Objective: To investigate persistent infection by ILHV in golden hamsters (Mesocricetus auratus). Materials and Methods: Hamsters were infected intraperitoneally with ILHV (9.6 LD50/0.02 mL), anaesthetised, and sacrificed up to the 120th day post-infection, for blood, urine, and tissue sampling. Viral titers were measured for ILHV using reverse transcription followed by real-time reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) performed on biological samples, which were used to infect VERO cells; viral replication was confirmed by immunofluorescence. Serum antibody levels were determined using hemagglutination inhibition technique; tissue alterations were observed through histopathological examination of hematoxylin-eosin-stained tissues; viral antigens were detected using immunohistochemistry. Results: A strong immune response was induced by ILHV, in addition to its pathogenicity in hamsters and neural invasion. The virus was isolated from VERO cells in the viscera, brain, blood, serum, and urine of infected hamsters and detected by qRT-PCR in the brain, liver, and blood at 30, six, and 15 days post-infection, respectively. Histopathological alterations and detection of viral antigens in the liver, kidney, and lung samples occurred 30 days after infection; in the brain, they were detected up to four months after infection. Conclusion: These results indicate that ILHV is pathogenic to golden hamsters and causes persistent infection in peripherally infected hamsters