Determinación en peces de biomarcadores histológicos y genéticos de contaminación ambiental

Con el fin de conocer el estado ecosanitario de un ambiente acuático se busca determinar alteraciones y efectos producidos por contaminantes plaguicidas. Esto se realizará a través de la evaluación de biomarcadores histológicos, toxicológicos y genéticos en percas criollas del Embalse El Nihuil, Mendoza. Se realizará la captura in situ de una muestra poblacional de Percichthys trucha, evaluación sanitaria de cada ejemplar y toma de muestra para estudios de laboratorio. Se determinará la presencia y graduación de alteraciones histopatológicas en branquias, hígado y riñón (Bernet, 1990). Se determinará el nivel de daño genético según el testeo de micronúcleos (Schmid 1975). Se determinará la presencia/ ausencia de plaguicidas por espectofotometría en tejido de peces y agua. Se determinará la correlación estadística entre nivel de tóxico y aparición de lesiones a nivel tisular, celular y cromosómico. Se espera validar el uso de biomarcadores histológicos y genéticos en peces para evidenciar contaminación acuática nociv

Evaluación de riesgo ecológico del ambiente acuático mediante biomarcadores de contaminación en peces

Esta evaluación se basa en la caracterización y estimación de la probabilidad de que hayan ocurrido, estén ocurriendo o vayan a ocurrir efectos adversos en sistemas ecológicos debido a actividades humanas. Los peces son utilizados como centinelas de ambientes acuáticos. Particularmente son blanco de la contaminación, ya que desarrollan alteraciones debido a la bioacumulación de los contaminantes ambientales en sus órganos. Con el fin de conocer el estado ecosanitario de un ambiente acuático, se buscó determinar alteraciones y efectos producidos por contaminantes plaguicidas. La información generada servirá para conocer más sobre las especies autóctonas y su estado de salud, en función de la calidad del agua del ambiente en el que viven. También posibilitará un seguimiento en el tiempo de la salud general y genética de la población, con proyección a la salud del ambiente acuático en estudio. El sitio de estudio fue el embalse El Nihuil, San Rafael, Mendoza, donde se han producido repetidos eventos de mortandad masiva de peces y aves en los últimos años. El departamento tiene el 34% de la superficie cultivada donde se utilizan plaguicidas

In-House Validation of Rapid Detection PCRs for Bacterial Pathogens Causing Infant Diarrhea

In Argentina, conventional culture methods for the isolation of diarrheal bacteria continue to be the most widely used form of diagnosis in many clinical laboratories. In this work we validated 11 in-house real-time polymerasechain reactions (PCRs) assays for the specific and rapid detection of Salmonella spp., Shigella spp., enteroinvasive E. coli, enteropathogenic E. coli, enterotoxigenic E. coli, Shiga toxin-producing E. coli, E. coli O157, Cronobacter sakazakii, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Vibrio cholera and Clostridium difficile. The sensitivity of the assays was less than 100 CFU/ml for all the studied pathogens; selectivity and specificity were 100% in all cases and robustness was optimal. These PCR methods could be used to accurately detect the main bacterial causes of infant gastroenteritis.Fil: Londero, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; ArgentinaFil: Leotta, Gerardo Anibal. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; ArgentinaFil: Brusa, Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; ArgentinaFil: Costa, Magdalena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; ArgentinaFil: Golijow, Carlos Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; ArgentinaFil: Gutkind, Gabriel Osvaldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Gonzalez, E.. Centro de Diagnóstico Molecular S.A.; ArgentinaFil: Galli, Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; Argentin

In-House Validation of Rapid Detection PCRs for Bacterial Pathogens Causing Infant Diarrhea

In Argentina, conventional culture methods for the isolation of diarrheal bacteria continue to be the most widely used form of diagnosis in many clinical laboratories. In this work we validated 11 in-house real-time polymerasechain reactions (PCRs) assays for the specific and rapid detection of Salmonella spp., Shigella spp., enteroinvasive E. coli, enteropathogenic E. coli, enterotoxigenic E. coli, Shiga toxin-producing E. coli, E. coli O157, Cronobacter sakazakii, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Vibrio cholera and Clostridium difficile. The sensitivity of the assays was less than 100 CFU/ml for all the studied pathogens; selectivity and specificity were 100% in all cases and robustness was optimal. These PCR methods could be used to accurately detect the main bacterial causes of infant gastroenteritis.Instituto de Genética Veterinari

Estudios histológicos y anatomopatológicos en aves silvestres autóctonas

El presente proyecto es una continuación e integración de estudios y servicios que el equipo de técnicos y profesionales realiza en la UPV con el objetivo ulterior de ser centro de investigación, referencia y servicio para la región en “DIAGNÓSTICO, EVALUACIÓN ANATOMOHISTOPATOLÓGICA Y PREPARADOS HISTOLÓGICOS”, con énfasis en biodiversidad autóctona. Con el objetivo doble de perfeccionar el proceso de funcionamiento del servicio consolidando el grupo de trabajo y en consecuencia generar publicaciones investigativas en áreas específicas. Nuestros estudios específicos en aves autóctonas buscaran describir la histología normal de los diferentes órganos y los hallazgos anatomohistopatológicos que puedan aparecer teniendo en cuenta que: “La estructura histológica de los órganos de aves silvestres presenta diferencias particulares a cada grupo taxonómico, pero principalmente a la biología de cada especie”

Diseño y aplicación de protocolo para evaluación de contaminación en laguna de Llancanello, Mendoza, Argentina

Para poder conocer el estado ecosanitario de un ambiente acuático y determinar su riesgo ecológico por contaminación es necesario realizar un abordaje sistematizado y completo, caracterizando los diferentes escenarios reales. De esta forma se pretende mejorar la calidad y la eficiencia del proceso de evaluación, favorecer el intercambio de información entre la salud humana y los estudios ecotoxicológicos y proveer de mejores argumentos para el proceso de toma de decisiones ambientales. El esquema que propone este documento está basado en las metodologías ya descritas de referencia, pero adoptando una forma simplificada y evaluando biomarcadores de exposición y efecto en peces. Los peces son particularmente blancos de contaminación y desarrollan alteraciones por bioacumulación y biomagnificación de los contaminantes ambientales en sus órganos. Estas alteraciones pueden ser a nivel celular y sub celular, genético y bioquímico, determinando biomarcadores identificables y medibles. Sirven como centinelas de alarma temprana de problemas más severos e irreversibles

Genetic characterization of Shiga toxin-producing Escherichia coli O26:H11 strains isolated from animal, food, and clinical samples

The Shiga-toxin producing Escherichia coli (STEC) may cause serious illness in human. Here we analyze O26:H11 strains known to be among the most reported STEC strains causing human infections. Genetic characterization of strains isolated from animal, food, and clinical specimens in Argentina showed that most carried either stx1a or stx2a subtypes. Interestingly, stx2a-positive O26:H11 rarely isolated from cattle in other countries showed to be an important proportion of O26:H11 strains circulating in cattle and food in our region. Seventeen percent of the isolates harbored more than one gene associated with antimicrobial resistance. In addition to stx, all strains contained the virulence genes eae-β, tir, efa, iha, espB, cif, espA, espF, espJ, nleA, nleB, nleC, and iss; and all except one contained ehxA, espP, and cba genes. On the other hand, toxB and espI genes were exclusively observed in stx2-positive isolates, whereas katP was only found in stx1a-positive isolates. Our results show that O26:H11 STEC strains circulating in Argentina, including those isolated from humans, cattle, and meat products, present a high pathogenic potential, and evidence that cattle can be a reservoir of O26:H11 strains harboring stx2a.Fil: Krüger, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Lucchesi, Paula Maria Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Sanso, Andrea Mariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Etcheverría, Analía Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Bustamante, Ana Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Burgán, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Fernandez, Luciana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Fernandez, Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Leotta, Gerardo Anibal. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ingeniero Fernando Noel Dulout"; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Friedrich, Alexander W.. University of Groningen; Países BajosFil: Padola, Nora L.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Rossen, John W. A.. University of Groningen; Países Bajo

Genetic characterization of Shiga toxin-producing Escherichia coli O26:H11 strains isolated from animal, food, and clinical samples

The Shiga-toxin producing Escherichia coli (STEC) may cause serious illness in human. Here we analyze O26:H11 strains known to be among the most reported STEC strains causing human infections. Genetic characterization of strains isolated from animal, food, and clinical specimens in Argentina showed that most carried either stx1a or stx2a subtypes. Interestingly, stx2a-positive O26:H11 rarely isolated from cattle in other countries showed to be an important proportion of O26:H11 strains circulating in cattle and food in our region. Seventeen percent of the isolates harbored more than one gene associated with antimicrobial resistance. In addition to stx, all strains contained the virulence genes eae-β, tir, efa, iha, espB, cif, espA, espF, espJ, nleA, nleB, nleC, and iss; and all except one contained ehxA, espP, and cba genes. On the other hand, toxB and espI genes were exclusively observed in stx2-positive isolates, whereas katP was only found in stx1a-positive isolates. Our results show that O26:H11 STEC strains circulating in Argentina, including those isolated from humans, cattle, and meat products, present a high pathogenic potential, and evidence that cattle can be a reservoir of O26:H11 strains harboring stx2a.Instituto de Genética Veterinari

Diesel Exhaust Inhalation Elicits Acute Vasoconstriction in Vivo

BACKGROUND: Traffic-related air pollution is consistently associated with cardiovascular morbidity and mortality. Recent human and animal studies suggest that exposure to air pollutants affects vascular function. Diesel exhaust (DE) is a major source of traffic-related air pollution. OBJECTIVES: Our goal was to study the effects of short-term exposure to DE on vascular reactivity and on mediators of vascular tone. METHODS: In a double-blind, crossover, controlled exposure study, 27 adult volunteers (10 healthy and 17 with metabolic syndrome) were exposed in randomized order to filtered air (FA) and each of two levels of diluted DE (100 or 200 μg/m3 of fine particulate matter) in 2-hr sessions. Before and after each exposure, we assessed the brachial artery diameter (BAd) by B-mode ultrasound and collected blood samples for endothelin-1 (ET-1) and catecholamines. Postexposure we also assessed endothelium-dependent flow-mediated dilation (FMD). RESULTS: Compared with FA, DE at 200 μg/m3 elicited a decrease in BAd (0.11 mm; 95% confidence interval, 0.02–0.18), and the effect appeared linearly dose related with a smaller effect at 100 μg/m3. Plasma levels of ET-1 increased after 200 μg/m3 DE but not after FA (p = 0.01). There was no consistent impact of DE on plasma catecholamines or FMD. CONCLUSIONS: These results demonstrate that short-term exposure to DE is associated with acute endothelial response and vasoconstriction of a conductance artery. Elucidation of the signaling pathways controlling vascular tone that underlie this observation requires further study

Standardized ultrasound evaluation of carotid stenosis for clinical trials: University of Washington Ultrasound Reading Center

<p>Abstract</p> <p>Introduction</p> <p>Serial monitoring of patients participating in clinical trials of carotid artery therapy requires noninvasive precision methods that are inexpensive, safe and widely available. Noninvasive ultrasonic duplex Doppler velocimetry provides a precision method that can be used for recruitment qualification, pre-treatment classification and post treatment surveillance for remodeling and restenosis. The University of Washington Ultrasound Reading Center (UWURC) provides a uniform examination protocol and interpretation of duplex Doppler velocity measurements.</p> <p>Methods</p> <p>Doppler waveforms from 6 locations along the common carotid and internal carotid artery path to the brain plus the external carotid and vertebral arteries on each side using a Doppler examination angle of 60 degrees are evaluated. The UWURC verifies all measurements against the images and waveforms for the database, which includes pre-procedure, post-procedure and annual follow-up examinations. Doppler angle alignment errors greater than 3 degrees and Doppler velocity measurement errors greater than 0.05 m/s are corrected.</p> <p>Results</p> <p>Angle adjusted Doppler velocity measurements produce higher values when higher Doppler examination angles are used. The definition of peak systolic velocity varies between examiners when spectral broadening due to turbulence is present. Examples of measurements are shown.</p> <p>Discussion</p> <p>Although ultrasonic duplex Doppler methods are widely used in carotid artery diagnosis, there is disagreement about how the examinations should be performed and how the results should be validated. In clinical trails, a centralized reading center can unify the methods. Because the goals of research examinations are different from those of clinical examinations, screening and diagnostic clinical examinations may require fewer velocity measurements.</p