Embriogénesis somática en el cv. Navolean a partir de ápices de brotes de yemas axilares

In order to develop embryogenic cultures in AAB Musa genotypes without persistent male inflorescence, the process has had greater success from proliferating meristems for callus formation with embryogenic structures. Based on the previous information, other alternative explant sources for somatic embryogenesis development in cv. Navolean. Meristematic apexes were cultured in p5 culture medium supplemented with thidiazuron and ancymidol (0.2, 0.4, 0.6, mg.l-1) to obtain axillary buds. Later, axillary buds and proliferated meristems were tested for callus induction with embryogenic structures combinations with different 2,4-D concentrations. The best growth regulator for obtaining axillary buds was ancymidol (0.2 mg.l-1). For callus formation with embryogenic structures, axillary buds at 1.0 mg.l-1 2,4-D provided a higher percentage (13.6%). These results permitted the development of embryogenic cell suspensions from somatic embryos.Key words: Ancymidol, embryogenic cell suspension, plantainEl desarrollo de cultivos embriogénicos en los genotipos AAB de Musa, que no poseen inflorescencia masculina persistente, ha tenido mayor éxito a partir de multiyemas para la formación de los callos con estructuras embriogénicas pero esto pudiera incrementar la variación somaclonal. Teniendo en cuenta lo anterior se trabajó en la determinación de otra fuente de explante inicial alternativa para el desarrollo de la embriogénesis somática en el cultivar objeto de estudio. Se cultivaron brotes axilares en el medio de cultivo P5 suplementado con tidiazuron y ancimidol (0.2; 0.4; 0.6 mg.l-1 cada uno por separado) para lograr la brotación de yemas axilares. Posteriormente para formar los callos con estructuras embriogénicas se colocaron los ápices de brotes obtenidos de yemas axilares en un medio de cultivo ZZ con diferentes concentraciones de 2,4-D. El mejor regulador del crecimiento para la brotación de yemas axilares fue el ancimidol (0.2 mg.l-1). Para la formación de callos con estructuras embriogénicas, la concentración de 1.0 mg.l-1 de 2,4-D propiciaron el mayor porcentaje (13.6%). A partir de los embriones somáticos producidos se logró el establecimiento de suspensiones celulares embriogénicas. Se demostró que es posible el desarrollo de la embriogénesis somática en el cv. Navolean no solo a partir de scalps de multiyemas.Palabras clave: ancimidol, plátanos, suspensiones celulares embriogénica

Efecto de 6-BAP y AIA en el establecimiento in vitro de meristemos de Colocasia esculenta (L.) Schott cv. ‘INIVIT MC 2012’

The use of meristems for the in vitro establishment of Colocasia esculenta (L.) Schott cv. 'INIVIT MC-2012' decreases bacterial contamination but is required to increase its growth. The objective of this work was to determine the effect of 6-Benzylaminopurine and indoleacetic acid on its in vitro establishment. Various concentrations of the two growth regulators were included in the culture medium and with the best combination the explants were cultured in shaking and static liquid culture medium. With the use of the culture medium constituted by 80% of the salts and vitamins MS, 30 g l-1 sucrose, 0.1 g l-1 myo-inositol, 0.1 mg l-1 6-BAP, 0.05 mg l-1 of AIA and culture in agitation were obtained meristems with the appropriate morphological characteristics to transfer to the multiplication phase at 28 days of culture.Keywords: orbital agitator, propagation, taroEl empleo de meristemos para el establecimiento in vitro de Colocasia esculenta (L.) Schott cv.  ‘INIVIT MC-2012’ disminuye la contaminación bacteriana pero se requiere incrementar su crecimiento. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de 6-Bencilaminopurina y ácido indolacético en su establecimiento in vitro. Se incluyeron varias concentraciones de los dos reguladores del crecimiento en el medio de cultivo y con la mejor combinación se cultivaron los explantes en medio de cultivo líquido en agitación y estático. Con el empleo el medio de cultivo constituido por el 80% de las sales y vitaminas MS, 30 g l-1 de sacarosa, 0.1 g l-1 de mio-inositol, 0.1 mg l-1 de 6-BAP, 0.05 mg l-1 de AIA y cultivo en agitación se lograron meristemos con las características morfológicas adecuadas para pasar a la fase de multiplicación a los 28 días de cultivo. Palabras clave: agitador orbital, malanga, propagació

Protocol for <i>in vitro</i> propagation of <i>Colocasia esculenta</i> cv. ‘INIVIT MC-2012’

The in vitro establishment of malanga (Xanthosoma and Colocasia) from plant material cultivated in the field has been one of the ways to initiate the in vitro propagation. For this purpose different types of explants and methods have been used. The objective of this work was to present a protocol for the in vitro propagation of C. esculenta cv. 'INIVIT MC-2012'. Procedures are included for in vitro establishment from axillary buds of primary rhizomes of field-grown plants and axillary buds from field propagated plants that were modified to decrease the impact of bacterial contamination. In addition, a procedure for the visual detection of bacterial contaminants and alternatives for the in vitro propagation of this cultivar is presented. Keywords: bacterial contamination, taro, meristem

Somatic embryogenesis in plantain cultivar 'FHIA - 25' (AAB) from meristem tips

Plantain cultivar 'FHIA – 25' (AAB) shows high yielding qualities and high resistance to Black Sigatoka disease, but its sugar content in the fruit is low, so a regeneration method at cell level is necessary, such as somatic embryogenesis supported by biotechnological tools to improve fruit quality. This work was performed with the aim of establishing a plant regeneration method via somatic embryogenesis using initial explants of shoot apices from axillary buds in liquid culture medium. Homogenous embryogenic cell suspensions were obtained from mentioned explants. The highest cellular multiplication rates were achieved at 3,0% density. The incubation of somatic embryos during 30 days in the maturation culture medium permitted to increase germination. During the acclimatization stage, plants regenerated from somatic embryos, as well as plants from organogenesis, showed a high survival percentage (98 and 97 respectively), without somaclonal variation

Embriogénesis somática en el cultivar de plátano ‘FHIA – 25’ (AAB) a partir de ápices meristemáticos

El cultivar de plátano ‘FHIA – 25’ (AAB), posee excelente rendimiento y alta resistencia a “Sigatoka negra”, pero con la limitante del bajo contenido de azúcar en su fruto, lo cual hace que sea necesario disponer de un método de regeneración de plantas a nivel celular como la embriogénesis somática, que se complemente a técnicas biotecnológicas de  transformación genética para mejorar la calidad del fruto.  El presente trabajo se realizó con el objetivo de establecer una metodología de regeneración vía embriogénesis somática a partir del explante inicial ápices de brotes axilares establecidos directamente en medio de cultivo líquido. Se obtuvieron suspensiones celulares embriogénicas homogéneas a partir del explante antes mencionado. Se lograron las mayores tasas de multiplicación  a la densidad celular  de 3,0%. La incubación de los embriones somáticos durante 30 días en el medio de cultivo de maduración permitió incrementar la germinación de los mismos. Durante la fase de aclimatización las plantas provenientes de los embriones somáticos, así como las plantas regeneradas por organogénesis, mostraron un alto porcentaje de supervivencia (98 y 97 %, respectivamente), sin la presencia de variación somaclonal.Plantain cultivar 'FHIA – 25' (AAB) shows high yielding qualities and high resistance to Black Sigatoka disease, but its sugar content in the fruit is low, so a regeneration method at cell level is necessary, such as somatic embryogenesis supported by biotechnological tools to improve fruit quality. This work was performed with the aim of establishing a plant regeneration method via somatic embryogenesis using initial explants of shoot apices from axillary buds in liquid culture medium. Homogenous embryogenic cell suspensions were obtained from mentioned explants. The highest cellular multiplication rates were achieved at 3,0% density. The incubation of somatic embryos during 30 days in the maturation culture medium permitted to increase germination. During the acclimatization stage, plants regenerated from somatic embryos, as well as plants from organogenesis, showed a high survival percentage (98 and 97 respectively), without somaclonal variation.Key words: somatic embryo, Musa, cell suspensions

Nuevo explante para la inducción de embriogenesis somática y propagación de plantas a partir del diploide de banana (‘Calcutta 4´, Musa AA)

A method has been developed for plant regeneration via embryogenic cell suspensions from diploid cultivar `Calcutta 4´. For callus induction with embryogenic structures, different plant tissues such as scalps from cauliflower-like meristems and meristematic domes of axillary sprouted buds in combination with several culture media were evaluated as explants. The best embryogenic response (8%) was noticed with meristematic domes of axillary sprouted buds in culture medium Murashige and Skoog salts at 50%, MS vitamins, 30 g l-1 sucrose, 10 mg l-1 ascorbic acid, 1 mg l_1 2,4-D, 0.22 mg l_1 Zeatine and supplemented with 100 mg l_1 malt extract, 100 mg l_1 glutamine, 1 mg l_1 biotin, 200mg l_1 casein hydrolysate, 4.0mg l_1 proline and solidified with 2.0 g l_1 Gelrite. Embryogenic cell suspensions were established and the highest increase of cellular biomass with 0.50 ml settled cell volume (SCV) was obtained 18 days after culture initiation. In a RD1 culture medium, embryogenic masses from 1362 to 2480 embryos were formed. An average of 54.5% germinated embryos in Temporal Immersion System (TIS) was obtained. Results were significantly higher in comparison with the use of semisolid culture media (28%). Regenerated plants are in field conditions to value their genetic stability.  Keywords: axillary buds, somatic embryogenesis, Temporal Immersion System.Se desarrolló un método para la regeneración de plantas a través de suspensiones de células embriogénicas de cultivar diploide `Calcutta 4' ha sido desarrollado. Para la inducción de callos con estructuras embriogénicas se evaluaron como explantes diferentes tejidos vegetales como, yemas adventicias a partir de meristemos en forma de coliflor y domos meristemáticos axilares de brotes germinados, en combinación con varios medios de cultivo. La mejor respuesta embriogénica (8%) se observó con domos meristemáticos de brotadas de las yemas axilares en medio de cultivo scon ales Murashige y Skoog al 50%, vitaminas MS, sacarosa 30 g l_1, 10 mg l_1 de ácido ascórbico, 1 mg l_1 2,4-D, 0.22 mg l_1 zeatina y complementado con 100 mg l_1 de extracto de malta, 100 mg l_1 de glutamina, 1 mg l_1 biotina, 200 mg l_1 caseína hidrolizada, 4.0 mg l_1 prolina y solidificado con 2.0 g l_1 Gelrite. Se establecieron suspensiones celulares embriogénicas y el mayor incremento de la biomasa celular con 0. 50 ml de volumen de las células establecidas (SCV) se obtuvo 18 días después del inicio del cultivo. Se formaron masas embriogénicas de 1362 a 2480 embriones en un medio de cultivo RD1. Se obtuvo un promedio de 54.5% embriones germinados en Sistema de Inmersión Temporal (SIT). Los resultados fueron significativamente mayores en comparación con el uso de medio cultivo semisólido (28%). Las plantas regeneradas se encuentran en condiciones de campo para valorar su estabilidad genética. Palabras clave: embriogénesis somática, Sistemas de Inmersión Temporal, yemas axilares. Abbreviations: gFW - grams of fresh weight; SCV _ Settled Cell Volume; MS - Murashige and Skoog (1962) medium; BA- 6-benzyaldenine; 2,4-D - 2,4-dichlorophenoxgace acid; IAA - indole-3-acetic acid

Multiplicación in vitro del clon de malanga ‘Viequera’ (Xanthosoma spp.) en sistemas de cultivo semiautomatizado

In Cuba, theXanthosoma genus is highly demanded in the preference of the population in relation to other edible aroids. The temporary immersion system (TIS) may constitute a micropropagation alternative to obtain high quality seed in this crop. The effect of two Semi-automated Culture Systems (SIT) and Constant Immersion Systems (CIS) with aeration through continuous bubbling in culture medium during the multiplication stage of axillaries shoot buds was evaluated. Results allowed demonstrating superiority in the efficiency of SIT regarding CIS in the sprout multiplication of clone ‘Viequera’. Axillaries sprout buds cultivated in TIS showed the best results in the multiplication compared with CIS and the static culture system with passive renewal of the internal atmosphere was used as control. The culture conditions created in the temporary immersion system forin vitro multiplication of axillaries sprout buds achievedthe highest multiplication coefficient(9.56). Thisin vitro culture system will allow increasing the multiplication coefficients in the micropropagation for seed productionin this genus.Keyword: multiplication coefficient, micropropagation, temporary immersion systemEn Cuba, el género de malanga Xanthosoma es el de mayor demanda en la preferencia de la población con relación a otras aráceas comestibles. El cultivo en inmersión temporal (SIT) puede constituir una alternativa de micropropagación, para obtener semilla de alta calidad en este cultivo. Se determinó el efecto de dos sistemas de cultivo: semi-automatizados SIT y Sistema de Inmersión Constante con aireación mediante burbujeo continuo en el medio de cultivo (SIC) en la fase de multiplicación de los brotes de yemas axilares. Los resultados permitieron demostrar la superioridad en la eficiencia del SIT respecto al SIC en la multiplicación de los brotes del clon ‘Viequera’. Los brotes de yemas axilares cultivados en este sistema de cultivo mostraron los mejores resultados en la multiplicación respecto al SIC y el sistema de cultivo estático con renovación pasiva de la atmósfera interna, utilizado como control. Con las condiciones de cultivo creadas en el sistema de inmersión temporal para la multiplicación in vitro de los brotes de yema axilaraes se lograron los más altos coeficientes de multiplicación (9.56). El uso de este sistema de cultivo in vitro, posibilitará incrementar los coeficientes de multiplicación en la micropropagación para la producción de semilla en este género.Palabra clave: coeficiente de multiplicación, micropropagación, Sistema de inmersión tempora

Somatic embryogenesis in cv. Navolean using shoots apexes from axillary buds

In order to develop embryogenic cultures in AAB Musa genotypes without persistent male inflorescence, the process has had greater success from proliferating meristems for callus formation with embryogenic structures. Based on the previous information, other alternative explant sources for somatic embryogenesis development in cv. Navolean. Meristematic apexes were cultured in p5 culture medium supplemented with thidiazuron and ancymidol (0.2, 0.4, 0.6, mg.l-1) to obtain axillary buds. Later, axillary buds and proliferated meristems were tested for callus induction with embryogenic structures combinations with different 2,4-D concentrations. The best growth regulator for obtaining axillary buds was ancymidol (0.2 mg.l-1). For callus formation with embryogenic structures, axillary buds at 1.0 mg.l-1 2,4-D provided a higher percentage (13.6%). These results permitted the development of embryogenic cell suspensions from somatic embryos. Key words: Ancymidol, embryogenic cell suspension, plantai