A method has been developed for plant regeneration via embryogenic cell suspensions from diploid cultivar `Calcutta 4´. For callus induction with embryogenic structures, different plant tissues such as scalps from cauliflower-like meristems and meristematic domes of axillary sprouted buds in combination with several culture media were evaluated as explants. The best embryogenic response (8%) was noticed with meristematic domes of axillary sprouted buds in culture medium Murashige and Skoog salts at 50%, MS vitamins, 30 g l-1 sucrose, 10 mg l-1 ascorbic acid, 1 mg l_1 2,4-D, 0.22 mg l_1 Zeatine and supplemented with 100 mg l_1 malt extract, 100 mg l_1 glutamine, 1 mg l_1 biotin, 200mg l_1 casein hydrolysate, 4.0mg l_1 proline and solidified with 2.0 g l_1 Gelrite. Embryogenic cell suspensions were established and the highest increase of cellular biomass with 0.50 ml settled cell volume (SCV) was obtained 18 days after culture initiation. In a RD1 culture medium, embryogenic masses from 1362 to 2480 embryos were formed. An average of 54.5% germinated embryos in Temporal Immersion System (TIS) was obtained. Results were significantly higher in comparison with the use of semisolid culture media (28%). Regenerated plants are in field conditions to value their genetic stability. Keywords: axillary buds, somatic embryogenesis, Temporal Immersion System.Se desarrolló un método para la regeneración de plantas a través de suspensiones de células embriogénicas de cultivar diploide `Calcutta 4' ha sido desarrollado. Para la inducción de callos con estructuras embriogénicas se evaluaron como explantes diferentes tejidos vegetales como, yemas adventicias a partir de meristemos en forma de coliflor y domos meristemáticos axilares de brotes germinados, en combinación con varios medios de cultivo. La mejor respuesta embriogénica (8%) se observó con domos meristemáticos de brotadas de las yemas axilares en medio de cultivo scon ales Murashige y Skoog al 50%, vitaminas MS, sacarosa 30 g l_1, 10 mg l_1 de ácido ascórbico, 1 mg l_1 2,4-D, 0.22 mg l_1 zeatina y complementado con 100 mg l_1 de extracto de malta, 100 mg l_1 de glutamina, 1 mg l_1 biotina, 200 mg l_1 caseína hidrolizada, 4.0 mg l_1 prolina y solidificado con 2.0 g l_1 Gelrite. Se establecieron suspensiones celulares embriogénicas y el mayor incremento de la biomasa celular con 0. 50 ml de volumen de las células establecidas (SCV) se obtuvo 18 días después del inicio del cultivo. Se formaron masas embriogénicas de 1362 a 2480 embriones en un medio de cultivo RD1. Se obtuvo un promedio de 54.5% embriones germinados en Sistema de Inmersión Temporal (SIT). Los resultados fueron significativamente mayores en comparación con el uso de medio cultivo semisólido (28%). Las plantas regeneradas se encuentran en condiciones de campo para valorar su estabilidad genética. Palabras clave: embriogénesis somática, Sistemas de Inmersión Temporal, yemas axilares. Abbreviations: gFW - grams of fresh weight; SCV _ Settled Cell Volume; MS - Murashige and Skoog (1962) medium; BA- 6-benzyaldenine; 2,4-D - 2,4-dichlorophenoxgace acid; IAA - indole-3-acetic acid
