Crosstalk Between Nitric Oxide and Endocannabinoid Signaling Pathways in Normal and Pathological Placentation

Endocannabinoids are a group of endogenous lipid mediators that act as ligands of cannabinoid and vanilloid receptors, activating multiple signal transduction pathways. Together with enzymes responsible for their synthesis and degradation, these compounds constitute the endocannabinoid system (ECS), which is involved in different physiological processes in reproduction. The placenta, which is essential for the success of gestation and optimal fetal growth, undergoes constant tissue remodeling. ECS members are expressed in trophoblast cells, and current evidence suggests that this system is involved in placental development, apoptosis, and syncytialization. Impairment of endocannabinoid signaling has been associated with several pathological conditions such as intrauterine growth restriction and preeclampsia. Both clinical entities are characterized by dysregulation on vascular perfusion where nitrergic system performs a pivotal role. Nitric oxide (NO) is a potent local vasodepressor that exerts a critical role in the regulation of hemodynamic flow, contributing to the maintenance of low vascular resistance in the feto-placental circulation. NO production could be affected by different factors and growing evidence suggests that the endocannabinoid mediators may regulate nitrergic signaling. Herein, we review emerging knowledge supporting ECS-mediated regulation of NO production in normal placentation. Finally, we discuss how alterations in these systems could affect homoeostasis and contribute to the occurrence of placental-mediated pregnancy complications. Given the impact on women and perinatal heath, we will focus on current knowledge regarding the effects of ECS on nitrergic system in normal and pathological placentation.Fil: Aban, Cyntia Estefania. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; ArgentinaFil: Accialini, Paula Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Etcheverry, Tomás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Leguizamon, Gustavo Federico. Centro de Educaciones Médicas e Investigación Clínica "Norberto Quirno"; ArgentinaFil: Martinez, Nora Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Farina, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Red Iberoamericana de Alteraciones Vasculares Asociadas a Trastornos del Embarazo; Argentin

Anandamide Exerts a Differential Effect on Human Placenta Before and After the Onset of Labor

The onset of labor involves the action of multiple factors and recent reports have postulated the endocannabinoid system as a new regulator of this process. Our objective was to study the role of anandamide, one of the main endocannabinoids, on the regulation of placental molecules that contribute to the onset of labor at term. Placental samples were obtained from patients with laboring vaginal deliveries and from non-laboring elective cesarean sections. Vaginal delivery placentas produced higher prostaglandins levels than cesarean section samples. Besides, no differences were observed in NOS basal activity between groups. Incubation of vaginal delivery placentas with anandamide increased prostaglandins concentration and decreased NOS activity. Antagonism of type-1cannabinoid receptor (CB1) did not alter the effect observed on NOS activity. Conversely, incubation of cesarean section placentas with anandamide reduced prostaglandins levels and enhanced NOS activity, the latter involving the participation of CB1. Furthermore, we observed a differential expression of the main components of the endocannabinoid system between placental samples, being the change in CB1 localization the most relevant finding. Our results suggest that anandamide acts as a modulator of the signals that regulate labor, exerting differential actions depending on CB1 localization in laboring or non-laboring term placentas.Fil: Accialini, Paula Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Aban, Cyntia Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Etcheverry, Tomás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Negri Malbrán, Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. CEMIC-CONICET. Centro de Educaciones Médicas e Investigaciones Clínicas "Norberto Quirno". CEMIC-CONICET; ArgentinaFil: Leguizamón, Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. CEMIC-CONICET. Centro de Educaciones Médicas e Investigaciones Clínicas "Norberto Quirno". CEMIC-CONICET; ArgentinaFil: Herlax, Vanesa Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner"; ArgentinaFil: Maté, Sabina María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner"; ArgentinaFil: Farina, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Anandamide regulates the production of key molecules for labour onset

El inicio del trabajo de parto está controlado por diversas moléculas y estudios recientes han postulado al sistema endocannabinoide como un mediador clave en este proceso. Se observó que anandamida (AEA), uno de los principales endocannabinoides, aumenta en el plasma de pacientes con trabajo de parto [1]. Nuestro objetivo fue estudiar la implicancia de AEA sobre la producción de prostaglandinas (PGs) y óxido nítrico (NO) en la placenta humana a término. Para ello utilizamos explantos de placentas a término provenientes de partos vaginales (TP, trabajo de parto) o de cesáreas electivas (sin trabajo de parto). Las placentas de TP presentan menor contenido proteico y actividad de FAAH, la enzima que degrada a AEA, que las placentas de cesárea. Esto sugiere un aumento intraplacentario de AEA durante el trabajo de parto. En cultivos de placentas de TP, AEA provocó un aumento de la concentración de PGs y una disminución en los niveles de NO. Contrariamente, en placentas de cesárea AEA provocó una disminución en la concentración de PGs y un incremento en la producción de NO. Nuestros resultados sugieren que AEA actuaría como un modulador en la placenta, regulando la producción de moléculas claves en el desencadenamiento del parto.Fil: Accialini, Paula Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Aban, Cyntia Estefania. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Etcheverry, Tomás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Leguizamón, Gustavo. Centro de Educaciones Médicas e Investigación Clínica "Norberto Quirno"; ArgentinaFil: Maté, Sabina María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner". Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata "Prof. Dr. Rodolfo R. Brenner"; ArgentinaFil: Farina, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaIII Simposio Colombiano de Placenta e Interacción Materno FetalColombiaPontificia Universidad Javerian

Downregulation of E-cadherin in pluripotent stem cells triggers partial EMT

Epithelial to mesenchymal transition (EMT) is a critical cellular process that has been well characterized during embryonic development and cancer metastasis and it also is implicated in several physiological and pathological events including embryonic stem cell differentiation. During early stages of differentiation, human embryonic stem cells pass through EMT where deeper morphological, molecular and biochemical changes occur. Though initially considered as a decision between two states, EMT process is now regarded as a fluid transition where cells exist on a spectrum of intermediate states. In this work, using a CRISPR interference system in human embryonic stem cells, we describe a molecular characterization of the effects of downregulation of E-cadherin, one of the main initiation events of EMT, as a unique start signal. Our results suggest that the decrease and delocalization of E-cadherin causes an incomplete EMT where cells retain their undifferentiated state while expressing several characteristics of a mesenchymal-like phenotype. Namely, we found that E-cadherin downregulation induces SNAI1 and SNAI2 upregulation, promotes MALAT1 and LINC-ROR downregulation, modulates the expression of tight junction occludin 1 and gap junction connexin 43, increases human embryonic stem cells migratory capacity and delocalize β-catenin. Altogether, we believe our results provide a useful tool to model the molecular events of an unstable intermediate state and further identify multiple layers of molecular changes that occur during partial EMT.Fil: Aban, Cyntia Estefania. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; ArgentinaFil: Lombardi, Antonella. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; ArgentinaFil: Neiman, G.. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; ArgentinaFil: Biani, María Celeste. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; ArgentinaFil: La Greca, A.. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; ArgentinaFil: Waisman, Ariel. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; ArgentinaFil: Moro, Lucía Natalia. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; ArgentinaFil: Sevlever, Gustavo. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; ArgentinaFil: Miriuka, Santiago Gabriel. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; ArgentinaFil: Luzzani, Carlos Daniel. Fundacion P/la Lucha C/enferm.neurologicas Infancia. Instituto de Neurociencias. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Neurociencias.; Argentin

Extracellular vesicles from pluripotent stem cell-derived mesenchymal stem cells acquire a stromal modulatory proteomic pattern during differentiation

Mesenchymal stem/stromal cells (MSCs) obtained from pluripotent stem cells (PSCs) constitute an interesting alternative to classical MSCs in regenerative medicine. Among their many mechanisms of action, MSC extracellular vesicles (EVs) are a potential suitable substitute for MSCs in future cell-free-based therapeutic approaches. Unlike cells, EVs do not elicit acute immune rejection, and they can be produced in large quantities and stored until ready to use. Although the therapeutic potential of MSC EVs has already been proven, a thorough characterization of MSC EVs is lacking. In this work, we used a label-free liquid chromatography tandem mass spectrometry proteomic approach to identify the most abundant proteins in EVs that are secreted from MSCs derived from PSCs (PD-MSCs) and from their parental induced PSCs (iPSCs). Next, we compared both datasets and found that while iPSC EVs enclose proteins that modulate RNA and microRNA stability and protein sorting, PD-MSC EVs are rich in proteins that organize extracellular matrix, regulate locomotion, and influence cell–substrate adhesion. Moreover, compared to their respective cells, iPSCs and iPSC EVs share a greater proportion of proteins, while the PD-MSC proteome appears to be more specific. Correlation and principal component analysis consistently aggregate iPSCs and iPSC EVs but segregate PD-MSC and their EVs. Altogether, these findings suggest that during differentiation, compared with their parental iPSC EVs, PD-MSC EVs acquire a more specific set of proteins; arguably, this difference might confer their therapeutic properties.Facultad de Ciencias MédicasConsejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnica

Analysis of the expression of PIWI-interacting RNAs during cardiac differentiation of human pluripotent stem cells

PIWI-interacting RNAs (piRNAs) are a class of non-coding RNAs initially thought to be restricted exclusively to germline cells. In recent years, accumulating evidence has demonstrated that piRNAs are actually expressed in pluripotent, neural, cardiac and even cancer cells. However, controversy remains around the existence and function of somatic piRNAs. Using small RNA-seq samples from H9 pluripotent cells differentiated to mesoderm progenitors and cardiomyocytes we identified the expression of 447 piRNAs, of which 241 were detected in pluripotency, 218 in mesoderm and 171 in cardiac cells. The majority of them originated from the sense strand of protein coding and lncRNAs genes in all stages of differentiation, though no evidences for secondary piRNAs (ping-pong) were found. Genes hosting piRNAs in cardiac samples were related to critical biological processes in the heart, like contraction and cardiac muscle development. Our results indicate that somatic piRNAs might have a role in fine-tuning the expression of genes involved in differentiation of pluripotent cells to cardiomyocytes.Fil: la Greca, Alejandro Damián. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Scarafia, Maria Agustina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Hernández Cañás, María Clara. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; ArgentinaFil: Perez, Maria Nelba. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Castañeda, Sheila Lucia. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Colli, Carolina. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Möbbs, Alan Miqueas. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Santín Velazque, Natalia Lucía. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Neiman, Gabriel. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Garate, Ximena. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Aban, Cyntia Estefania. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Waisman, Ariel. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Moro, Lucía Natalia. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sevlever, Gustavo. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; ArgentinaFil: Luzzani, Carlos Daniel. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Miriuka, Santiago Gabriel. Fundación para la Lucha contra las Enfermedades Neurológicas de la Infancia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Extracellular vesicles from pluripotent stem cell-derived mesenchymal stem cells acquire a stromal modulatory proteomic pattern during differentiation

Mesenchymal stem/stromal cells (MSCs) obtained from pluripotent stem cells (PSCs) constitute an interesting alternative to classical MSCs in regenerative medicine. Among their many mechanisms of action, MSC extracellular vesicles (EVs) are a potential suitable substitute for MSCs in future cell-free-based therapeutic approaches. Unlike cells, EVs do not elicit acute immune rejection, and they can be produced in large quantities and stored until ready to use. Although the therapeutic potential of MSC EVs has already been proven, a thorough characterization of MSC EVs is lacking. In this work, we used a label-free liquid chromatography tandem mass spectrometry proteomic approach to identify the most abundant proteins in EVs that are secreted from MSCs derived from PSCs (PD-MSCs) and from their parental induced PSCs (iPSCs). Next, we compared both datasets and found that while iPSC EVs enclose proteins that modulate RNA and microRNA stability and protein sorting, PD-MSC EVs are rich in proteins that organize extracellular matrix, regulate locomotion, and influence cell–substrate adhesion. Moreover, compared to their respective cells, iPSCs and iPSC EVs share a greater proportion of proteins, while the PD-MSC proteome appears to be more specific. Correlation and principal component analysis consistently aggregate iPSCs and iPSC EVs but segregate PD-MSC and their EVs. Altogether, these findings suggest that during differentiation, compared with their parental iPSC EVs, PD-MSC EVs acquire a more specific set of proteins; arguably, this difference might confer their therapeutic properties.Fil: la Greca, Alejandro Damián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Solari, Claudia María. Ministerio de Ciencia. Tecnología e Innovación Productiva. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Furmento, Verónica Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lombardi, Antonella. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Biani, María Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Aban, Cyntia Estefania. Ministerio de Ciencia. Tecnología e Innovación Productiva. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica; ArgentinaFil: Moro, Lucía Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: García, Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Guberman, Alejandra Sonia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Sevlever, Gustavo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Miriuka, Santiago Gabriel. Universidad Nacional de La Plata; ArgentinaFil: Luzzani, Carlos Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

TPRV-1 expression in human preeclamptic placenta

Preeclampsia is a multisystem disorder unique to human pregnancy, characterized by abnormal placentation. Although its causes remain unclear, it is known that the expression of several transporters is altered. Transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV-1) is a nonselective cation channel, present in human placenta. Here, we evaluated the expression of TRPV-1 in preeclamptic placentas. We observed a deregulation in TRPV-1 expression in these placentas which may explain the impaired Ca2+ homeostasis found in preeclampsia.Fil: Martinez, Nora Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Aban, Cyntia Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Leguizamon, Gustavo Federico. Centro de Estudios Médicos e Investigaciones Clínicas. Dirección de Asistencia Médica. Departamento de Ginecología y Obstetricia; Argentina. Centro de Educación Médica e Investigaciones Clínicas “Norberto Quirno”; ArgentinaFil: Damiano, Alicia Ermelinda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Biología Celular y Molecular; ArgentinaFil: Farina, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Differential expression of endocannabinoid system in normal and preeclamptic placentas: effects on nitric oxide synthesis.

Anandamide (AEA) is a lipid mediator that participates in the regulation of several reproductive functions. This study investigated the endocannabinoid system in normal (NP) and preeclamptic (PE) placentas, and analyzed the potential functional role of AEA in the regulation of nitric oxide synthesis. The protein expression and localization of NAPE-PLD, FAAH and CB1 receptor were analyzed in normal and preeclamptic pregnancies using immunoblotting and immunohistochemistry. NAPE-PLD expression was shown to be significantly higher (p < 0.05) in PE tissues than in NP. In contrast, a decrease in FAAH protein (p < 0.001) was detected in placentas collected from women with preeclampsia. Both enzymes were mainly located in the syncytiotrophoblasts from normal and preeclamptic tissues. No differences were seen in CB1 receptor from both groups of placental villous. Exogenous and endogenous AEA significantly increased NOS activity. Although pre-incubation with AM251 (CB1 antagonist) had no effect, co-incubation with both AEA and AM251 diminished NOS activity from normal term placentas. We observed increased NOS activity in placental villous from women with preeclampsia compared with normotensive pregnant women. Furthermore, NOS activity from preeclamptic tissues was diminished by co-treatment with AM251, illustrating that the NO levels could be modulated by AEA.These data suggest that AEA may be one of the factors involved in the regulation of NOS activity in normal and preeclamptic placental villous. Interestingly, the differential expression of NAPE-PLD and FAAH suggests that AEA could play an important role in the pathophysiology of PE.Fil: Aban, Cyntia Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Leguizamon, Gustavo. Centro de Educación Médica E Investigaciones Clínicas "norberto Quirno"; ArgentinaFil: Cella, Maximiliano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Damiano, Alicia Ermelinda. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Franchi, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Farina, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires; Argentin

Evidence for insulin-mediated control of AQP9 expression in human placenta

The AQP9 gene contains a negative insulin response element, suggesting that it may be modulated by insulin. Previously, we reported AQP9 overexpression in preeclamptic placentas but a lack of functionality of AQP9 in water and mannitol transport. We also observed high serum levels of insulin and TNFain preeclamptic women. Objective: To evaluate whether AQP9 expression is regulated by insulin in the human placenta, and whether the dysregulation of AQP9 observed in preeclamptic placentas may be related to the inability to respond to insulin stimuli. Methods: Explants from normal and preeclamptic placentas were cultured at different concentrations of insulin. Treatment with TNF-a was used to induce phosphorylation of insulin receptor substrate (IRS), which may desensitize insulin action. AQP9 molecular expression and water uptake was determined. Results: Insulin decreased the molecular expression of AQP9 exclusively in explants from normal placentas in a concentration-dependent manner. Treatment with TNF-a previous to insulin addition prevented these changes. Moreover, insulin treatment did not modify water uptake neither its sensitivityto HgCl2. Conclusion: AQP9 water permeability seems to be independent of its molecular expression, strongly suggesting that AQP9 might not have a key role in water transport in human placenta. We also propose another mechanism of down-regulation of AQP9 molecular expression mediated by insulin in a concentration-dependent manner in human placenta and provide new evidence that in preeclamptic placentas the mechanisms of insulin signaling may be altered, producing an overexpression of AQP9 that does not correlate with an increase in its functionality.Fil: Castro-Parodi, Mauricio Omar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Farina, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Dietrich, Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Aban, Cyntia Estefania. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Szpilbarg, Natalia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Biología Celular y Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Zotta, Elsa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Damiano, Alicia Ermelinda. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Biología Celular y Molecular; Argentin