Entwicklung einer neuen Echtzeit-Methode zur Untersuchung des erytrozytärer Lebenszyklus von Plasmodium falciparum mit Schwingquarzbiosensoren

Previous studies carried out by the Biosensor Research Group of the Institute of Clinical and Experimental Transfusion Medicine at the Tübingen University had successfully demonstrated determination of various blood types through the interaction of erythrocytes with immobilised antibodies on a QCM. These studies have opened the possibility to test new applications of this technique for the study of infectious diseases. In our case, studies of the erythrocyte life cycle of P. falciparum, particularly during the last six hours preceding the merozoite release and studies related to reinfection of erythrocytes by merozoites were the focus of our investigation. Release of malaria parasites of P. falciparum from infected erythrocyte at the end of their asexual erythrocyte cycle occurs approximately every 48 hours, asynchronously in parasite culture and synchronously in vivo. This process is poorly studied due to: (I) merozoite release is a very short event (<60 s), (II) schizont stages have high sensitivity for culture conditions like pH, medium, osmotic pressure, gas atmosphere and temperature. (III) Schizont conditions are not easy to maintain under the miscrocope, making miscroscopical real time observation of the release difficult. The aim of the presented project was to study the release of Plasmodium falciparum merozoites from erythrocytes with the QCM sensor technique. In this way, the frequency shift due to the change of mass associated to the merozoite release and, on a second QCM, the reinfection of healthy erythrocytes are monitored in real time. Our QCM experiments included the following stages: (I) Adaptation and optimisation of the immobilisation of biological layers to capture the erythrocytes on the quartz. (II) Optimisation of parasite culture conditions in a QCM chamber. (III) Observation of the frequency signal both for infected and non-infected erythrocytes samples and correlation of the signal with the release of merozoites. (IV) Reinfection of healthy erythrocytes on a second quartz within one QCM system. (V) Test of inhibition of merozoite release and reinfection by antimalarial compounds. The results showed that there was significant increase of ~1000 Hz for QCM with infected erythrocyte compared to QCM with healthy erythrocytes, where the frequency remained stable. Microscopical observation of the quartz surface at different times during the experiment (TEM and optical) demonstrated a correlation between the increase in frequency and merozoite release. At this point, approximately more than 80% of the infected erythrocytes on the quartz are involved in the release. Reinfection of new erythrocytes was observed on a second QCM. pH of the system (7.2), Temperature (37°C+/-0.1), flow of the medium (9 µL/min), sterility of the process (BactAlert), gas atmosphere (O2 5%, residual N2) were established to ensure parasite development and survival. External controls using flow cytometry 24 hours after the reinfection showed a parasitemia percentage of >1% in the erythrocytes infected in situ. Our results show, that the QCM technique is an appropriate and important new tool to elucidate the biology of the re-invasion process of Plasmodia.Frühere Studien, ausgeführt durch die Biosensor-Forschungsgruppe des Instituts für Klinische und Experimentelle Transfusionsmedizin an der Universität Tübingen, hatten die Blutgruppenbestimmung durch die Wechselwirkung von Erythrozyten mit immobilisierten Antikörpern auf einem Schwingquarzbiosensor (SQ) erfolgreich demonstriert. Diese Studien haben die Möglichkeit eröffnet, neue Anwendungen dieser Technik für die Untersuchung von Infektionskrankheiten zu evaluieren. In unserem Fall waren Studien des erythrozytären Lebenszyklus von P. falciparum, besonders die letzten sechs Stunden, die der Merozoiten-Freisetzung vorangehen, und Studien verbunden mit der Reinfektion durch Merozoiten der Schwerpunkt unserer Forschung. Die Freisetzung von Malaria-Parasiten von P. falciparum aus infizierten Erythrozyten am Ende ihres asexuellen erythrozytären Lebenzyklus erfolgt alle 48 Stunden und ist asynchron in Parasiten-Kultur und ist synchron in vivo. Dieser Prozess ist wenig untersucht worden. Die Hindernisse sind: (I) Freisetzung der Merozoiten findet in einer kurzen Zeit statt (<60 s) (II) Das Schizonten-Stadium der Parasiten hat eine hohe Empfindlichkeit gegenüber den Labor Bedingungen: pH-Wert und Zusammensetzung des Mediums, osmotischer Druck, Gas-Atmosphäre und Temperatur. (III) Die Erhaltung des Schizonten-Stadiums unter dem Mikroskop ist problematisch, so dass die Freisetzung der Merozoiten schwierig in Echtzeit zu beobachten ist. Das Ziel des Projektes war, die Freisetzung von Merozoiten von Plasmodium falciparum aus Erythrozyten mit der Schwingquarzbiosensor-Technik zu studieren. Dabei wurde die Änderung der Frequenz, aufgrund der Massenänderung bei der Freisetzung von Merozoiten, und auf einem zweiten Quarz die Reinfektion der nicht infizierten Erythrozyten durch die freigesetzten Merozoiten in Echtzeit beobachtet. Unsere SQ-Experimente beinhalten die folgenden Schritte: (I) Anpassung und Optimierung der Immobilisierung von biologischen Schichten, um Erythrozyten auf dem Quarz zu binden. (II) Optimierung von Bedingungen der Parasiten-Kultur in einer Schwingquarz-Messzelle. (III) Beobachtung des Frequenzsignals für infizierte und nicht-infizierte Erythrozyten und die Korrelation des Signals mit der Freisetzung von Merozoiten. (IV) Reinfektion gesunder Erythrozyten auf einem zweiten Quarz innerhalb eines SQ-System. (V) Test der Hemmung der Freisetzung der Merozoiten und der Reinfektion durch Merozoiten unter Einwirkung von Malariamedikamenten. Die Ergebnisse zeigten einen signifikanten Anstieg von ~ 1000 Hz am SQ für infizierte Erythrozyten, im Vergleich zu einem SQ mit gesunden Erythrozyten, wo das Frequenzsignal stabil geblieben ist. Mikroskopische Beobachtung der Oberfläche des Quarzes zu unterschiedlichen Zeitpunkten während des Experiments (REM und optisch) zeigte eine Korrelation zwischen dem Anstieg der Frequenz und der Freisetzung von Merozoiten. An diesem Punkt sind etwas mehr als 80% der infizierten Erythrozyten auf dem Quarz an dem Release beteiligt. Reinfektion neuer Erythrozyten wurde auf einem zweiten Quarz beobachtet. pH-Wert des Systems (7.2), Temperatur (37 ° C + / -0,1), Durchfluss des Mediums (9 uL / min), Sterilität des Prozesses (BactAlert), Gas-Atmosphäre (5% O2, Rest N2) wurden eingerichtet, um die Entwicklung der Parasiten und ihr Überleben sicher zu stellen. Externe Kontrollen mitttels Durchflusszytometrie 24 Stunden nach der Reinfektion zeigten einen Prozentsatz von Parasitämie von >1% in den in situ infizierten Erythrozyten. Unsere Ergebnisse zeigen, dass die Schwingquarz-Technologie ein geeignetes und wichtiges neues Instrument ist, um die Biologie des Re-Invasions-Prozesses der Plasmodien aufzuklären

"Capital Stock and Unemployment: Searching for the Missing Link"

The purpose of this paper is to examine the proposition that capital stock relative to aggregate output has been an important variable in the determination of the U.S. NAIRU (Non-Accelerating Inflation Rate of Unemployment) over the last four decades. We present new empirical evidence, obtained from the application of the cointegrated VAR methodology to U.S. time-series data, that lends strong support to the claim that the aggregate capital-output ratio, the real price of imports, and aggregate capacity utilization were determinants of the NAIRU in the period considered. The same evidence also shows that technical progress and changes in long-term unemployment did not affect the NAIRU. We believe this evidence suggests that, insofar as the aggregate capital-output ratio is affected by changes in real interest rates, the stance of monetary policy is one determinant of the NAIRU.

Estilos de liderazgo y la motivación de los colaboradores de una institución financiera de la ciudad de Trujillo, 2019

La presente investigación tuvo como objetivo determinar la relación entre los estilos de liderazgo y la motivación de los colaboradores de una institución financiera de la ciudad de Trujillo, en el año 2019; para lo cual se planteó como hipótesis que los estilos de liderazgo tienen relación directa y significativa con la motivación de los colaboradores en una institución financiera de la ciudad de Trujillo, se trabajó bajo un diseño no experimental, correlacional y de corte transversal, y la técnica empleada fue la encuesta con su instrumento el cuestionario para medir por separado los estilos de liderazgo y la motivación, la unidad de análisis fueron los colaboradores de la institución financiera. Llegándose al resultado que existe una relación positiva y altamente significativa entre los estilos de liderazgo y la motivación de los colaboradores de una institución financiera de la ciudad de Trujillo, 2019 con un valor de sig. 0.000 < 0.01 con coeficiente de correlación de Rho de Spearman de 0.871.The purpose of this research was to determine the relationship between leadership styles and the motivation of employees of a financial institution in the city of Trujillo, in the year 2019; for which it was hypothesized that leadership styles have a direct and significant relationship with the motivation of employees in a financial institution in the city of Trujillo, it is reduced under a nonexperimental, correlational and cross-sectional design, and technique Employer was the survey with his instrument the questionnaire to measure leadership styles and motivation separately, the unit of analysis were the collaborators of the financial institution. Reaching the result that there is a positive and highly significant relationship between leadership styles and the motivation of employees of a financial institution in the city of Trujillo, 2019 with a value of sig. 0.000 <0.01 with Spearman's Rho correlation coefficient of 0.871

Efectos de 12 semanas de desentrenamiento en la retención de condición física y calidad de vida en mujeres mayores de 30 años tras un programa de nueve meses de pilates y comparación con mujeres sedentarias

Objetivos: a) Determinar el efecto del desentrenamiento en mujeres mayores de 30 años tras un programa de Pilates y tres meses de inactividad. b) Comprobar si con tres meses de inactividad se alcanzan valores de condición física iguales a personas que no practican actividad física. Método: Se utilizó un diseño de corte longitudinal follow-up (seguimiento) en el que participaron 21 mujeres ((>30 años) y se repartieron en grupo experimental (realizó nueve meses Pilates) y en grupo control (sedentarias)) Se recogieron las características clínicas que incluyeron FCreposo (frecuencia cardiaca de reposo), PADreposo (presión arterial diastólica en reposo), PASreposo (presión arterial sistólica en reposo), IMC (índice de masa corporal), ICC (índice de cintura-cadera). Se midió la calidad de vida (SF-36). Se evaluó la condición física a través de la Senior Fitness test. Resultados: Los sujetos obtuvieron menores niveles de flexibilidad y los valores disminuyeron en la prueba de prensión manual. Conclusión: este estudio muestra que tras tres meses de desentrenamiento en Pilates existen pérdidas en flexibilidad y fuerza medida con dinamometría manual aunque los resultados obtenidos siguen siendo más favorecedores que los del grupo control por lo que no se ha producido una pérdida total. Aplicación práctica. Un mantenimiento de al menos 9 meses continuados de Pilates permitirá un mantenimiento de la condición física necesaria para el desarrollo de las habilidades de la vida diaria.Objectives: a) To determine the effect of detraining in women over 30 years of age after a Pilates program after three months of inactivity. b) Furthermore, we wanted to determine whether after three months of inactivity fitness values would be equal to physically inactive people Methods: We used a longitudinal followup design. The 21 women (> 30 years) were divided into an experimental group (9 months Pilates) and a control group (sedentary) were collected clinical features included HRrest, SBPrest, DBPrest, BMI, WHR. Quality of life was assessed through (SF-36 questionnaire). Fitness was evaluated through the Senior Fitness Test. Results: The participants had lower levels of flexibility and decreased values in the handgrip test, although no significant differences were found in any of the variables, except in the level of physical activity performed. Conclusion: This study shows that after three months of detraining in Pilates. Flexibility and losses in strength are measured by hand dynamometry although the results are still more flattering than the control group so there not been a total loss. Pilates also has a positive effect on resting DBP and SBP rest. Practical implication: Maintenance of at least 9 consecutive months of Pilates will allow maintaining physical condition necessary for the development of the skills of daily livin

Systemic Inflammation in Duchenne Muscular Dystrophy: Association with Muscle Function and Nutritional Status

Inflammation described in patients with Duchenne muscular dystrophy (DMD) may be related to loss of muscle function or to obesity. It is unknown if circulating proinflammatory cytokines (IL-6, IL-1, and TNF-) levels are associated with muscle function. The purpose was to evaluate whether an association exists between systemic inflammation with muscle function and nutritional status in DMD patients. In 66 DMD patients without corticosteroid treatment, the following were evaluated in serum: cytokines (IL-1, IL-6, and TNF-), C-reactive protein (CRP), leptin, adiponectin, and creatine kinase (CK). Muscle function was evaluated using Vignos Scale. Patients with better muscle function had the highest concentration of CK, IL-1, and TNF-compared with less muscle function. No differences in IL-6 and adiponectin concentration were identified among groups with different levels of muscle function. Also, no differences were observed in the concentration of cytokines among groups with different nutritional status levels (underweight, normal weight, and overweight/obese). However, CRP and leptin were increased in the obese group compared with normal and underweight subjects. Systemic inflammation is increased in patients with better muscle function and decreases in DMD patients with poorer muscle function; nevertheless, systemic inflammation is similar among different levels of nutritional status in DMD patients

Molecular characterization of autophagic and apoptotic signaling induced by sorafenib in liver cancer cells

Sorafenib is the unique accepted molecular targeted drug for the treatment of patients in advanced stage of hepatocellular carcinoma. The current study evaluated cell signaling regulation of endoplasmic reticulum (ER) stress, c-Jun-N-terminal kinase (JNK), Akt, and 5′AMP-activated protein kinase (AMPK) leading to autophagy and apoptosis induced by sorafenib. Sorafenib induced early (3–12 hr) ER stress characterized by an increase of Ser51P-eIF2α/eIF2α, C/EBP homologous protein (CHOP), IRE1α, and sXBP1, but a decrease of activating transcription factor 6 expression, overall temporally associated with the increase of Thr183,Tyr185P-JNK1/2/JNK1/2, Thr172P-AMPKα, Ser413P-Foxo3a, Thr308P-AKt/AKt and Thr32P-Foxo3a/Foxo3a ratios, and reduction of Ser2481P-mammalian target of rapamycin (mTOR)/mTOR and protein translation. This pattern was related to a transient increase of tBid, Bim EL, Beclin-1, Bcl-xL, Bcl-2, autophagy markers, and reduction of myeloid cell leukemia-1 (Mcl-1) expression. The progressive increase of CHOP expression, and reduction of Thr308P-AKt/AKt and Ser473P-AKt/AKt ratios were associated with the reduction of autophagic flux and an additional upregulation of Bim EL expression and caspase-3 activity (24 hr). Small interfering-RNA (si-RNA) assays showed that Bim, but not Bak and Bax, was involved in the induction of caspase-3 in sorafenib-treated HepG2 cells. Sorafenib increased autophagic and apoptotic markers in tumor-derived xenograft model. In conclusion, the early sorafenib-induced ER stress and regulation of JNK and AMPK-dependent signaling were related to the induction of survival autophagic process. The sustained drug treatment induced a progressive increase of ER stress and PERK-CHOP-dependent rise of Bim EL, which was associated with the shift from autophagy to apoptosis. The kinetic of Bim EL expression profile might also be related to the tight balance between AKt- and AMPK-related signaling leading to Foxo3a-dependent BIM EL upregulation.Ministerio de Economía y Competitividad BFU2016‐75352‐PInstituto de Salud Carlos III PI15/00034, PI13/ 00021, PI16/00090, PI14/01349Ministerio de Educación FPU16/05127, FPU12/01433, FPU13/01237Junta de Andalucía CTS-6264, PI-00025-2013, PI-0127-2013, PI-0198-201

Scindapsus aureus as potential biomarker of polluted environment

Living organisms are subject to different environmental effects, including physical, biological or chemical factors. In front of pollution, which can be defined as an aggression, the organisms must be adapted to survive. In microsomal fraction of cells, there is an oxidase enzymatic complex, whose central element is the cytochrome P450, able to eliminate certain harmful substances. The main action of P450 system is to introduce a functional group to foreign lipophilic compound, which deveins water-soluble and it excretion was facilitated. In this study a method, originally designed to measure P450 activity in animal cells, was modified and adapted for application in plant cells from contaminated environments. Scindapsus aureus also namely Epipremnum aureum, is considered between the best plants with air purification ability. The aim of this work was to study the effect of polluted environments on this plant species, to determining its potential use as contamination biomarker. The results indicated that P450 activity was manifested only in saturated cell-free extract dialysates from those plants exposed to high contamination during periods longer than 30 days. The induction of this enzyme, with detoxificant power, could depend of pollutant type, and/or exposure times. Few studies using plants as air contamination biomarker by CO were conducted. The results obtained allow recommend susceptible species for quantifying indirect pollution in offices, laboratories, factories, where the workers are exposed 8 h daily, during several years.Fil: Cruz, Rosa Magdalena. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Farmacia. Cátedra de Salud Publica; ArgentinaFil: Fuentes de Curia, Maria Elena. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Farmacia. Cátedra de Salud Publica; ArgentinaFil: Khouri, Eduardo Alejandro. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Farmacia. Cátedra de Salud Publica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rollan, Graciela Celestina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Centro de Referencia para Lactobacilos; ArgentinaFil: Gonzalez, Silvia Nelina. Universidad Nacional de Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Instituto de Biotecnología Farmacéutica y Alimentaria; Argentina. Universidad Nacional de Tucuman. Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia. Instituto de Farmacia. Cátedra de Salud Publica; Argentin

Imported malaria cases: the connection with the European ex-colonies

Background: Imported malaria is increasing in non-endemic areas due to the increment of international travels, migration and, probably, other unknown factors. The objective of this study was to describe the epidemiological and clinical characteristics of malaria cases in a region of Spain; analyse the possible association between the variables of interest; compare this series with others; and evaluate the characteristics of imported malaria cases according to the country of origin, particularly cases from Equatorial Guinea (Spanish ex-colony) and from the rest of sub-Saharan Africa. Methods: A descriptive observational study was carried out with a retrospective data collection of cases of malaria reported in Aragon from 1996 to 2017. Univariate and bivariate analysis of clinical-epidemiological variables was performed. In addition, an analysis of cases from sub-Saharan Africa was carried out using logistic regression, calculating odds ratio with its 95% confidence interval. Results: 609 cases of malaria were recorded in Aragon from 1996 to 2017. An autochthonous case in 2010. 50.33% were between 15 and 39 years old. 45.65% of the cases were notified of the 4-weeks 9 to 12. 82.6% reside in the main province, urban area, of which 65.4% were VFR (Visiting Friends and Relatives), 23.8% new immigrants and 10.9% travellers. The infectious Plasmodium species par excellence was Plasmodium falciparum (88%). Analysing the cases from sub-Saharan Africa (95.2% of the total), 48.1% were from Equatorial Guinea. Comparing these with the cases from the rest of sub-Saharan Africa, it was observed that the cases from the Spanish ex-colony have association with the female gender, being under 5 years old, residing in the main province (urban area) and being a new immigrant. Conclusions: The epidemiological profile of imported malaria cases can be defined as VFR between 15 and 39 years old, coming from sub-Saharan Africa, particularly from Equatorial Guinea. Immigrants education about the importance of chemoprophylaxis when travelling to visit friends and relatives, emphasizing on those who are originally from the ex-colonies of destination country, is necessary; as well as to raise awareness among health professionals to make advice in consultations, specially before summer vacations

Educación alimentaria como estrategia para la reducción de la anemia en ocho regiones del Perú - 2020

Introducción: En el Perú, aunque se observa una disminución de la anemia del 3,4% en el año 2019, con relación al 2018, la prevalencia continúa desde hace más de una década, con cifras que la califican como un problema severo de salud pública, pues afecta a un promedio de 620 000 niños a nivel nacional. La prevalencia de anemia en niños y niñas menores de 36 meses es más alta en la zona rural y en la sierra. A pesar de que Lima Metropolitana tiene una de las prevalencias más bajas del país (3 de cada 10 niños presentan anemia), concentra el mayor número de niños con anemia, con cifras similares al número de niños que obtenemos al sumar las cuatro o cinco regiones con mayor prevalencia en el país. Objetivo: Evaluar si la estrategia en educación alimentaria permite una reducción de la anemia en los niños de 6 a 35 meses. Métodos: Estudio retrospectivo en el que se aplicó una estrategia de educación alimentaria para la reducción de la anemia con evaluación pretest y postest. La educación alimentaria incluye componentes educativos, comunicacionales y tecnológicos. Se analizaron los datos correspondientes a las réplicas de la educación alimentaria en ocho regiones del Perú, de quienes cumplieron con una frecuencia de 2 veces por semana, durante dos meses. El reclutamiento de padres, madres o cuidadores (350) estuvo dirigido a quienes tenían niños de 6 a 35 meses, usuarios de un establecimiento de salud y con un diagnóstico de anemia utilizando como indicador la hemoglobina (Hb) del niño(a) al inicio y al final de la educación alimentaria. Resultados: El mayor porcentaje de niños se encuentra en el rango de 12 a 23 meses. El promedio general del diferencial de hemoglobina (evaluación final-evaluación inicial) fue de 1,07g/dL ± 0,80g/dL (p &lt; 0,01), y se observó que el incremento era mayor mientras más alto era el nivel de anemia. Hubo diferencia entre Lima Metropolitana y las regiones (p &lt; 0,01), y entre algunas regiones. Conclusiones: La educación alimentaria como estrategia que incluye preparaciones de recetas ricas en hierro, mejoró el estado de dicho mineral en los niños menores de 36 meses. Se sugiere la implementación de programas de educación alimentaria de acuerdo con la disponibilidad de alimentos en cada región. Palabras clave: anemia, educación alimentaria, estrategia, hierr

Food education as a strategy to reduce anemia in eight regions of Peru- 2020

En el Perú, aunque se observa una disminución de la anemia del 3,4% en el año 2019, con relación al 2018, la prevalencia continúa desde hace más de una década, con cifras que la califican como un problema severo de salud pública, pues afecta a un promedio de 620 000 niños a nivel nacional. La prevalencia de anemia en niños y niñas menores de 36 meses es más alta en la zona rural y en la sierra. A pesar de que Lima Metropolitana tiene una de las prevalencias más bajas del país (3 de cada 10 niños presentan anemia), concentra el mayor número de niños con anemia, con cifras similares al número de niños que obtenemos al sumar las cuatro o cinco regiones con mayor prevalencia en el país. Objetivo: Evaluar si la estrategia en educación alimentaria permite una reducción de la anemia en los niños de 6 a 35 meses. Métodos: Estudio retrospectivo en el que se aplicó una estrategia de educación alimentaria para la reducción de la anemia con evaluación pretest y postest. La educación alimentaria incluye componentes educativos, comunicacionales y tecnológicos. Se analizaron los datos correspondientes a las réplicas de la educación alimentaria en ocho regiones del Perú, de quienes cumplieron con una frecuencia de 2 veces por semana, durante dos meses. El reclutamiento de padres, madres o cuidadores (350) estuvo dirigido a quienes tenían niños de 6 a 35 meses, usuarios de un establecimiento de salud y con un diagnóstico de anemia utilizando como indicador la hemoglobina (Hb) del niño(a) al inicio y al final de la educación alimentaria. Resultados: El mayor porcentaje de niños se encuentra en el rango de 12 a 23 meses. El promedio general del diferencial de hemoglobina (evaluación final-evaluación inicial) fue de 1,07g/dL ± 0,80g/dL (p < 0,01), y se observó que el incremento era mayor mientras más alto era el nivel de anemia. Hubo diferencia entre Lima Metropolitana y las regiones (p < 0,01), y entre algunas regiones. Conclusiones: La educación alimentaria como estrategia que incluye preparaciones de recetas ricas en hierro, mejoró el estado de dicho mineral en los niños menores de 36 meses. Se sugiere la implementación de programas de educación alimentaria de acuerdo con la disponibilidad de alimentos en cada región