Análise da diversidade genética de raças autóctones caprinas

De todos os marcadores moleculares disponíveis, os microssatélites têm-se revelado os mais utilizados em estudos ligados à genética de populações. A popularidade destes marcadores relaciona-se com a sua densa distribuição ao longo do genoma, com a sua grande variabilidade, com o facto de terem uma herança co-dominante, não serem influenciados por factores ambientais, gozarem de neutralidade (possuem pouco ou nenhum valor de adaptação ou selecção) e serem facilmente amplificados por PCR, necessitando-se de quantidades ínfimas de DNA. Estando cientes da necessidade de preservar as nossas raças autóctones, uma vez que elas ocupam um importante lugar nos sistemas de produção natural e possuem várias implicações no meio rural. Revela-se de extrema importância todo o esforço para conhecermos as nossas raças tanto a nível produtivo como em termos genéticos. Assim para um conhecimento a nível genético foram recolhidas amostras de sangue em cinco raças autóctones portuguesas (Bravia, Serrana, Charnequeira, Serpentina e Algarvia) para além de duas raças exóticas (Saanen e Alpina). Após a amplificação de 23 microssatélites, a identificação dos alelos realizou-se mediante electroforese vertical em gel de poliacrilamida, em condições desnaturantes. A variabilidade encontrada entre as raças autóctones caprinas portuguesas foi semelhante e, em alguns casos, superior mesmo á encontrada entre raças autóctones de outros países. A análise de componentes principais, assim como a distância utilizada (Da), revelaram um afastamento das raças Bravia e Algarvia relativamente ao conjunto formado pela Serpentina, Charnequeira e Serrrana. Por outro lado, observou-se um afastamento nítido entre as raças Bravia e Algarvia. A análise dos dendrogramas revelou uma imprecisão no posicionamento das raças Bravia e Serrana e uma proximidade entre as raças Bravia e Charnequeira

Estudo da variabilidade e relações genéticas em raças caprinas autóctones mediante microssatélites

Num cenário de declínio de diversidade genética a nível mundial, estamos cientes da necessidade de preservar as raças autóctones portuguesas. Com este estudo pretendemos fazer face à ausência de caracterização da estrutura e das possíveis relações genéticas entre as diferentes raças autóctones caprinas portuguesas. Assim, na revisão bibliográfica procurou-se dar ênfase às possíveis causas e aos efeitos da erosão genética que se vem operando ao longo dos tempos. Por outro lado, deu-se importância ao género Capra, particularizando aspectos relativos às raças autóctones caprinas portuguesas, tais como: caracterização morfológica, distribuição geográfica de origem e principais aptidões. Os dois últimos capítulos foram dedicados às diferentes metodologias laboratoriais e estatísticas disponíveis e necessárias para levar a cabo o trabalho experimental. Foram recolhidas amostras de sangue de cinco raças autóctones portuguesas (Bravia, Serrana, Charnequeira, Serpentina e Algarvia) e respectivos ecótipos, para além de duas raças exóticas (Saanen e Alpina) que serviram como termo de comparação. A extracção de DNA foi realizada pelo método de MILLER et al. (1988). Após a escolha de 23 microssatélites, a sua amplificação foi realizada através da técnica de Polimerase Chain Reaction (PCR), utilizando um termociclador. A identificação dos alelos dos marcadores microssatélicos realizou-se mediante electroforese vertical em gel de poliacrilamida, em condições desnaturantes. Os marcadores foram analisados num sequenciador automatizado ALF Express R DNA Sequencer, utilizando-se para posterior análise genotípica o programa Allele Links. As frequências génicas foram calculadas através de contagem directa, o equilíbrio de Hardy-Weinberg foi estimado usando o programa GENETIX 4.02 (BELKHIR, 2000) e os desvios comparados segundo o Exact Test (GUO e THOMPSON, 1992). utilizando o programa GENEPOP 1.2 (RAYMOND e ROUSSET, 1995). A heterozigotia foi calculada segundo NEI (1987). A análise de componentes principais foi realizada recorrendo-se ao programa STATISTICA para Windows 5.1. Por fim, as distâncias genéticas e os dendrogramas foram obtidos usando o programa NJBAFD (TAKEZAKI, 1997). Neste estudo foi possível estabelecer um conjunto de microssatélites que podem ser amplificados em multiplex e que se revelaram apropriados à realização de estudos populacionais, podendo no futuro serem utilizados em várias vertentes da conservação de raças caprinas. viii A variabilidade encontrada entre as raças autóctones caprinas portuguesas foi semelhante e, em alguns casos, superior mesmo à encontrada entre raças autóctones de outros países. A análise de componentes principais, assim como as distâncias utilizadas, revelaram um afastamento das raças Bravia e Algarvia relativamente ao conjunto formado pela Serpentina, pela Charnequeira e pela Serrana. Por outro lado, observou-se um afastamento nítido entre as raças Bravia e Algarvia. A análise dos dendrogramas revelou algumas diferenças relativamente à metodologia multivariante, nomeadamente uma imprecisão no posicionamento das raças Bravia e Serrana e uma proximidade entre as raças Bravia e Charnequeira. Neste tipo de análise, os ecótipos da raça Serrana mostraramse mais próximos. Por fim, verificou-se uma proximidade entre as raças Algarvia e Serpentina. Embora se verifique a necessidade de utilizar modelos matemáticos que se ajustem melhor ao comportamento dos microssatélites, estes marcadores moleculares revelaram ser, até ao momento actual, os mais apropriados a estudos de variabilidade genética e de relações populacionais. En el presente estudio se ha realizado un análisis de las relaciones genéticas entre razas autóctonas de ganado caprino portugués utilizando marcadores de tipo microsatélite. En la Revisión bibliográfica se hace especial hincapié en las posibles causas y los efectos de la erosión genética que viene actuando en los últimos años. Por otro lado, se realizó una revisión sobre el origen de los diferentes grupos del género Capra, particularizando en los aspectos relativos a las razas autóctonas caprinas portuguesas, tales como la caracterización morfológica, la distribución geográfica, el origen y sus principales aptitudes. Los dos últimos capítulos se dedicaron a las distintas metodologías laboratoriales y estadísticas disponibles y necesarias para llevar a cabo el trabajo experimental. Para la realización de esta Tesis, se recogieron muestras de sangre de cinco razas autóctonas portuguesas (Bravia, Serrana, Charnequeira, Serpentina y Algarvía) con sus respectivos ecotipos, además de dos razas foráneas (Saanen y Alpina) que se utilizaron como poblaciones de referencia. La extracción del DNA se llevó a cabo por el método de MILLER et al. (1998). Se analizaron 23 marcadores de tipo microsatélite mediante amplificación por la técnica de Reacción en cadena mediante la polimerasa (PCR) utilizando un termociclador. La identificación de los alelos de los marcadores microsatélites se realizó mediante electroforesis vertical en geles de poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes utilizando para ello un secuenciador automático y el programa del análisis Allele Links. Se utilizó el programa GENETIX 4.02 (BELKHIR, 2000) para el cálculo de las frecuencias génicas y la heterocigosis. La adecuación de las poblaciones al equilibrio Hardy-Weinberg se estimó utilizando el test exacto propuesto por GUO y THOMPSON (1992) mediante el programa GENEPOP 1.2 (RAYMOND y ROUSSET, 1995). Las distancias genéticas y los dendrogramas se obtuvieron con el programa NJBAFD (TAKEZAKI, 1997) y el análisis de componentes principales y la clasificación poblacional con el paquete estadístico STATISTICA para Windows 5.1 En la presente memoria se obtuvo un conjunto de microsatélites que pueden ser amplificados de forma conjunta (multiplex) y que se muestran como muy útiles para la realización de estudios poblacionales, pudiendo en un futuro utilizarlos en diferentes aspectos de la conservación de las razas caprinas. La variabilidad encontrada en las razas caprinas autóctonas portuguesas fue similar, e incluso superior, a la que presentan las poblaciones de cabras de otros países. El análisis de componentes principales puso de manifiesto una separación de las razas Bravía y Algarvía x con respecto al bloque formado por Serpentina, Charnequeira y Serrana. Por otro lado, se observó una separación muy clara entre las poblaciones de Bravía y Algarvía. El análisis de los dendrogramas obtenidos a partir de las distancias genéticas estimadas puso de manifiesto un posicionamiento poco definido de las razas Serrana y Bravía, una relativa proximidad entre las razas Algarvía y Serpentina así como una clara proximidad de las razas Bravía y Charnequeira. En este tipo de análisis los ecotipos de la raza Serrana se mostraron muy próximos entre sí. Aunque se deben desarrollar modelos matemáticos que se ajusten mejor a los comportamientos mutacionales de los microsatélites, estos marcadores moleculares son, hasta el momento actual los más apropiados para los estudios de variabilidad genética y de relaciones poblacionales. While biodiversity is decreasing worldwide we are aware of the need to preserve Portuguese autochthonous breeds. This study aims to face the lack of structural characterization and possible genetics relationships between the different Portuguese autochthonous goat breeds. The bibliographic review focused on possible causes and effects of the genetic erosion taking place throughout time. An especially emphasis was paid to genre Capra, particularly to Portuguese autochthonous breeds features as morphological characterization, geographic area of origin and production performances. Lab and statistical methodologies necessaries to experimental work were reviewed on the last two chapters. Blood samples were collected from five Portuguese autochthonous breeds – Bravia, Serrana, Charnequeira, Serpentina and Algarvia – and respective ecotypes and two exotic breeds – Saanen and Alpina – for comparative purposes. DNA extraction was preformed according to MILLER et al. (1988) protocol. After selecting 23 microsatellites they were amplified by the Polimerase Chain Reaction (PCR) technique using a termocyclator. Microsatellites markers alleles were identified by poliacrilamide gel vertical electrophoresis under denatured conditions. Markers were assayed on an automatic sequencer and genotype analysis performed using the ALLELE LINKS program. Genomic frequencies were calculated by direct count, Hardy-Weinberg equilibrium (EHW) estimated using the GENETIX 4.02 program (BELKHIR, 2000) and deviations analysis accomplished using the Exact Test (GUO and THOMPSON, 1992) of the GENOPOP 1.2 program (RAYMOND and ROUSSET, 1995). Heterozigosity was calculated according to NEI (1987). Main components analysis was performed using the STATISTICA program for Windows 5.1. At last genetic distances and dendrograms were achieved using the NJBAFD program (TAKEZAKI, 1997). A conjugation of microsattelites that could be amplified as multiplex was established on this study. It seemed appropriated to study population and it may be used on different aspects of goat breeds conservation in the future. Portuguese autochthonous goat breeds variability was identical or even higher than those found among other breeds in other countries. Main components analysis as genetic distances used showed a detachment between Bravia and Algarvia breeds and Serpentina, Charnequeira and Serrana set of breeds. A clear detachment between Bravia and Algarvia breeds was also found. Dendrogram analysis showed some diferences toward xii multivariance methodology, resulting in an imprecise positioning of Bravia and Serrana breeds and in Bravia and Charnequeira breeds’ vicinity. Serrana ecotypes seemed closer under this analysis. Finally proximity between Algarvia and Serpentina breeds was identified. Although it is necessary to use mathematic models more adjusted to microsatellites conduct, these molecular markers are presently the most appropriated to study genetic variability and population relationships.PRODEP II, Acção 5.2- Formação avançada no Ensino superior, Concurso de 1/96. Universidade de León - Espanha. Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro

Anestro pós-parto em cabras da raça Serrana paridas no fim do Inverno

Este trabalho foi desenvolvido com o objectivo de estudar a duração do período anovulatório pós-parto, em cabras da raça Serrana, ecótipo Transmontano, paridas no fim do Inverno. Nele foi utilizado um grupo de 18 cabras da raça Serrana, ecótipo Transmontano, com 2 a 9 anos de idade. No conjunto das cabras estudadas, a duração do intervalo de dias entre o parto e a primeira subida das concentrações plasmáticas de progesterona pós-parto acima dos 0,5ng/ml (PSNPP) foi de 82,4 ± 17,1 dias. A administração de melatonina exógena não favoreceu significativamente nenhum dos parâmetros reprodutivos estudados. Nesta altura do ano, o regresso à actividade ovárica cíclica afigura-se difícil.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Caracterização reprodutiva das cabras Serranas, ecótipo Transmontano

A produção caprina continua a desempenhar um papel fundamental no desenvolvimento socioeconómico das populações rurais, particularmente nas regiões agro-florestais mais desfavorecidas, pois permite o aproveitamento e a valorização de recursos naturais de baixo valor económico. No nosso País, ela continua a assentar na criação de animais de raças autóctones, perfeitamente adaptados às condições edafo-climáticas locais, aproveitando as disponibilidades naturais de alimentos (escassas no Inverno e no Verão) e incorporando quase nenhuma tecnologia. Lamentavelmente, a informação disponível sobre o potencial produtivo e reprodutivo destes animais continua a ser reduzido. Sem ela é virtualmente impossível estabelecer estratégias eficazes de desenvolvimento do sector. São vários os aspectos reprodutivos que condicionam a rentabilidade das explorações animais, ainda que todos eles devam ditar a redução dos períodos improdutivos, a elevação das taxas de fertilidade aparente, de prolificidade e de fecundidade e o ajustamento dos ciclos de produção (oferta) aos mercados (procura). A sazonalidade reprodutiva destes caprinos é um sério obstáculo à persecução destes objectivos. O presente trabalho visa a compilação de toda a informação científica publicada até à data por investigadores do Instituto Politécnico de Bragança - Escola Superior Agrária (IPB-ESA) na área da reprodução de caprinos da raça Serrana, ecótipo Transmontano.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Utilização de implantes de melatonina em ovinos

A sazonalidade reprodutiva é uma característica adaptativa que se desenvolveu ao longo de milhões de anos, a fim de ajustar os momentos em que as necessidades energéticas dos animais são máximas

Control hormonal de la actividad ovárica en ovinos

El control de la reproductiva es una técnica de manejo fundamental en las modernas explotaciones de ovinos, pues permite aumentar su rentabilidad. Es necesario conocer los diversos métodos aplicables y elegir el más adecuado a cada situación en concreto. La tarea no se augura fácil, dado que la dinámica folicular en ovinos no es tan clara como en otras espécies

Relação entre as medidas testiculares e escrotais in vivo e o volume e peso testiculares postmortem dos bodes da raça Serrana

Neste trabalho procurou-se estudar, fundamentalmente, as correlações existentes entre várias medidas testiculares e escrotais, tomadas em vida, e o peso testicular obtido após abate. Um grupo de seis bodes maduros da raça Serrana, variedade Transmontana, escolhidos aleatoriamente da cabrada experimental da UTAD, nascidos e criados nesta instituição, foi abatido durante os meses de Junho e Julho. Sobre estes animais foram realizadas várias medições testiculares e escrotais, tanto em vida como após o seu abate. Em vida, estes bodes, com uma idade aproximada de 2 anos e 2 meses e um peso corporal de sensivelmente 55,2 kg, apresentavam, em média, um perímetro escrotal de 26,5 cm, um comprimento testicular de 11,2 cm, um diâmetro testicular de 5,5 cm e um volume escrotal de 132,3 cm3. Após o abate, verificou-se que estes animais apresentavam uma espessura escrotal de 0,23 mm, um volume testicular de 148,1 cm3, um peso testicular de 151,8 g e uma densidade testicular de 1,03 g/cm3. Os testículos destes animais mostraram ser bastante simétricos. Das diferentes medidas testiculares e escrotais tomadas in vivo, apenas o volume escrotal se correlacionou significativamente com o volume testicular (r = 0,931; P≤0,01); nenhuma destas medidas, no entanto, se correlacionou significativamente com o peso testicular (P>0,05). Ambas as medidas realizadas postmortem, ou seja, o peso e o volume testiculares, mostraram estar positivamente correlacionadas (r = 0,897; P≤0,05).The relationship between testicular and scrotal in vivo and postmortem measurements was study on a group of six mature Serrana (variety Transmontana) bucks slaughted on the months of June and July. These bucks were aproximatly two years old and weighted 55.2 kg. They presented an average testicular circumference of 26.5 cm, testicular lenght of 11.2 cm, testicular diameter of 5.5 cm and scrotal volume of 132.3 cm3 (in vivo measures), testicular weight of 151.8 g, testicular volume of 148.1 cm3 and testicular density of 1.03 g/cm3 (postmortem measures). Among all the in vivo measures the scrotal volume was the only one significantly correlated to the testicular volume (r = 0.931; P≤0.01); none of these measures was significantly correlated to the testicular weight (P>0.05)

Estudo preliminar de alterações anátomo-histológicas em caprinos intersexuais sem cornos da raça Serrana

Este estudo teve como principal objectivo identificar possíveis alterações anátomo-histológicas em caprinos Serranos, sem cornos e intersexuais, relativamente a caprinos da mesma raça, com cornos e sexualmente normais. Neste sentido, quatro caprinos da raça portuguesa Serrana, ecótipo transmontano, com aproximadamente um ano de idade, foram utilizados na realização deste ensaio. Dois deles tinham cornos e eram sexualmente normais (testemunhas), enquanto os outros dois eram sem cornos e apresentavam fenómenos de intersexualidade. Os dois caprinos intersexuais estudados apresentavam diferentes graus de masculinização do seu tracto genital e eram estéreis. Um deles revelou-se pseudomacho e o outro hermafrodita bilateral

Maneio reprodutivo em ovinos e caprinos 4. Controlo da atividade reprodutiva - métodos naturais

Os pequenos ruminantes são animais poliéstricos sazonais, exibindo atividade reprodutiva preferencialmente em dias de fotoperíodo "decrescente" ou "curto", para que os partos ocorram na primavera, altura em que as condições ambientais são mais favoráveis tanto para a fêmea como para as crias. Na nossa latitude, a sazonalidade reprodutiva tende a ser pouco marcada. No norte de Portugal, a estacão reprodutiva começa por volta do solstício de verão e a estação de anestro após o solstício de inverno. A domesticação dos pequenos ruminantes não alterou o seu padrão reprodutivo, pois durante milhares de anos a sua criação continuou a estar muito dependente das condições ambientais, particularmente das disponibilidades naturais de alimentos. Atualmente, esta característica constitui um dos maiores obstáculos à maximização da rentabilidade das explorações intensivas e semi-intensivas destes animais. O controlo da atividade reprodutiva é uma das técnicas de maneio mais importantes em qualquer exploração animal. Possibilita um melhor planeamento das seguintes atividades: Alimentação dos reprodutores, conforme as disponibilidades alimentares e o estádio fisiológico das fêmeas (l, 2); . Maneio reprodutivo mais eficiente, com redução dos períodos improdutivos e incremento do progresso genético (l, 3-5); . Épocas de cobrição e de parição, segundo as variações anuais dos preços de mercado e das disponibilidades de mão de obra (l, 4, 6); Melhor assistência aos partos e consequente diminuição da mortalidade perinatal( 7); Maneio sanitário, de acordo com as principais patologias locais, o estádio fisiológico das fêmeas e o momento da venda dos produtos finais (l, 2).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Controlo reprodutivo em ovelhas Awassi x Sarda

O presente estudo teve com principal objectivo avaliar a eficácia de tratamentos progestagénicos curtos (6 dias) + eCG no controlo da actividade reprodutiva de ovelhas Awassi x Sarda, quando aplicado no mês de Maio. Simultaneamente procurou-se avaliar os efeitos da administração prévia de melatonina exógena e comparar a eficácia de dois progestagénios –FGA vs. MAP– e a via de administração da PGF2α – intramuscular vs. subcutânea. O ensaio foi realizado em Carviçais, Torre de Moncorvo, mais precisamente na exploração comercial Mateus Lda.. Foram utilizadas 57 ovelhas lactantes e 5 carneiros Awassi x Sarda. Inicialmente, as ovelhas foram divididas em dois grupos (30 de Março): Controlo (n = 28) e Melatonina (n = 29). As ovelhas Melatonina receberam um implante subcutâneo de melatonina (18 mg). Cinquenta dias depois (19 Maio), 31 ovelhas foram tratadas com esponjas vaginais com 20 mg de FGA e 26 ovelhas com esponjas vaginais com 60 mg de MAP. Nessa altura, todas as ovelhas foram injectadas intramuscular (n = 28) ou subcutaneamente (n = 29) com 100 μg de PGF2α. Os tratamentos progestagénicos duraram 6 dias. Quando da remoção das esponjas vaginais, todas as ovelhas receberam uma injecção de 500 UI de eCG. Avaliou-se a ciclicidade pré e pós-tratamentos progestagénicos curtos + eCG, a resposta comportamental e a percentagem de ovelhas gestantes 73 dias pós-tratamentos. Concluiu-se que os tratamentos progestagénicos curtos foram eficazes no controlo da actividade reprodutiva das ovelhas Awassi x Sarda. A melatonina exógena foi eficaz na interrupção do anestro sazonal, mas não melhorou a resposta reprodutiva das ovelhas aos tratamentos aplicados. Os efeitos de ambos os progestagénios foram muito positivos. O MAP apenas foi superior ao FGA na promoção da resposta ovárica. A administração subcutânea de PGF2α apenas favoreceu a percentagem de ovelhas que formaram, pelo menos, um CL.info:eu-repo/semantics/publishedVersio