Acute exposition to Roundup Transorb® induces systemic oxidative stress and alterations in the expression of newly sequenced genes in silverside fish (Odontesthes humensis)

Roundup Transorb® (RDT) is a glyphosate-based herbicide commonly used in agricultural practices worldwide. This herbicide exerts negative effects on the aquatic ecosystem and affects bioenergetic and detoxification pathways, oxidative stress, and cell damage in marine organisms. These effects might also occur at the transcriptional level; however, the expression of genes associated with oxidative stress has not been studied well. Odontesthes humensis is a native Brazilian aquatic species naturally distributed in the habitats affected by pesticides, including Roundup Transorb® (RDT). This study evaluated the toxic effects of short-term exposure to RDT on O. humensis. Moreover, the genes related to oxidative stress were sequenced and characterized, and their expressions in the gills, hepatopancreas, kidneys, and brain of the fish were quantified by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction. The animals were exposed to two environmentally relevant concentrations of RDT (2.07 and 3.68 mg L−1) for 24 h. Lipid peroxidation, reactive oxygen species (ROS), DNA damage, and apoptosis in erythrocytes were quantified by flow cytometry. The expression of the target genes was modulated in most tissues in the presence of the highest tested concentration of RDT. In erythrocytes, the levels of lipid peroxidation, ROS, and DNA damage were increased in the presence of both the concentrations of RDT, whereas cell apoptosis was increased in the group exposed to 3.68 mg L−1 RDT. In conclusion, acute exposure to RDT caused oxidative stress in the fish, induced negative effects on cells, and modulated the expression of genes related to the enzymatic antioxidant system in O. humensis.Fil: Martins, Amanda Weege S.. Universidade Federal de Pelotas; BrasilFil: Silveira, Tony L. R.. Universidade Federal de Pelotas; Brasil. Universidade Federal do Rio Grande; BrasilFil: Remião, Mariana H.. Universidade Federal de Pelotas; BrasilFil: Domingues, William Borges. Universidade Federal de Pelotas; BrasilFil: Dellagostin, Eduardo N.. Universidade Federal de Pelotas; BrasilFil: Varela Junior, Antônio Sergio. Universidade Federal do Rio Grande; Brasil. Universidade Federal de Pelotas; BrasilFil: Corcini, Carine D.. Universidade Federal de Pelotas; BrasilFil: Costa, Patrícia G.. Universidade Federal do Rio Grande; BrasilFil: Bianchini, Adalto. Universidade Federal do Rio Grande; BrasilFil: Somoza, Gustavo Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Robaldo, Ricardo B.. Universidade Federal de Pelotas; BrasilFil: Campos, Vinicius Farias. Universidade Federal de Pelotas; Brasi

Estudo de ovários fetais equinos: uma abordagem histológica1

RESUMO: O estudo do desenvolvimento embriológico de órgãos reprodutivos representa uma ferramenta importante para a compreensão das particularidades da espécie equina, assim como ampliar os conhecimentos sobre o desenvolvimento de folículos antrais que podem ser utilizados para produção in vitro de embriões. O presente trabalho teve como objetivo descrever as alterações morfológicas de ovários fetais equinos ocorrentes durante o desenvolvimento gestacional. Foram utilizados fetos equinos provenientes de abatedouro. Imediatamente após o abate foi realizada medição da distância cefalococcígea para o cálculo da idade gestacional em dias (dias de gestação - DG) e dissecação dos fetos para a retirada e fixação dos ovários. Foram realizadas avaliações macroscópicas e histológicas pelas técnicas de Hematoxilina-eosina e PAS. Foram utilizados 19 fetos com idade de 50-269 dias de gestação, distribuídos em 9 grupos de DG. Na avaliação macroscópica foi observada diferença entre o volume dos ovários de acordo com a idade gestacional, sendo observado maior volume ovariano entre os dias 210 a 269 de desenvolvimento gestacional. Na avaliação histológica foi observado epitélio de revestimento cúbico e distinção entre as camadas cortical e medular nos ovários fetais a partir de 50-89 DG. As principais características identificadas foram à distinção morfológica entre as camadas cortical e medular nos ovários fetais equinos: os cordões ovígeros surgiram no intervalo de 150-179 DG; o córtex iniciada como uma camada delgada e por volta do 210º dia de gestação apresentou espessamento pelo aumento da quantidade de tecido conjuntivo rico em vasos sanguíneos, o qual se manteve até os estágios finais da gestação; a região medular adquiriu uniformidade estrutural por volta do 150º dia, mostrando células similares em tamanho e vasos sanguíneos de calibre maior. A partir desta etapa, as células medulares diminuíram em tamanho e feixes de tecido conjuntivo denso tornaram esta zona parcialmente dividida

Ultrastructural Morphology and Nuclear Maturation Rates of Immature Equine Oocytes Vitrified with Different Solutions and Exposure Times

Ultrastructural morphological injuries and maturation rates were investigated in equine oocytes exposed to vitrification solutions (VS) containing synthetic ice blockers (SIBs) during different exposure times. In experiment 1, compact cumulus-oocyte complexes (COCs; n = 30) were randomly allocated to treatments: (1) fresh fixed (control); (2) VS-1 (1.4 M dimethyl sulfoxide [DMSO] + 1.8 M ethylene glycol LEG] + 1% SIB) for 3 minutes of equilibrium time and VS-2 (2.8 M DMSO + 3.6 M EG + 0.6 M sucrose + 1% SIB) for 1 minute (Eq-long); and (3) VS-1 for 1.5 minutes and VS-2 for 30 seconds (Eq-short). In experiment 2, compact (n = 248) and expanded (n = 264) COCs were evenly distributed to the following treatments: (1) immediate maturation in vitro (control); (2) vitrification using the Eq-short protocol as in experiment 1; and (3) vitrification using a stock solution containing 2.8 M formamide, 2.8 M DMSO, 2.7 M EG, 7% polyvinylpyrrolidone, and 1% SIB (Eq-short-mod). More (P <.02) oocytes with normal ultrastructural morphology were seen in fresh control and Eq-short groups than in Eq-long group. Metaphase-II (MIL) rates were higher (P <.05) for oocytes with expanded cumulus than compact cumulus in the control group, and higher (P <.05) for oocytes with expanded cumulus than compact cumulus in Eq-short and Eq-short-mod groups. No difference in MII rates was detected among groups within each type of COC. In conclusion, reduction of exposure time to VS better preserved oocyte ultrastructural features, and MII rates were higher for vitrified oocytes with expanded cumulus. This study advances our knowledge on potential alternatives for vitrification of immature equine oocytes. (C) 2014 Elsevier Inc. All rights reserved.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES