Desenvolvimento e validação de um método para quantificação de citrato de sildenafila em CLAE-UV/ Development and validation of a method for quantification of sildenafil citrate in UV-HPLC

O citrato de sildenafila é um inibidor potente e seletivo da PDE5, presente em vários tecidos, tais como o vascular e o muscular liso. É comercializado por diferentes origens no mercado, que podem não estar em conformidade com as especificações da legislação brasileira. Com isso, é essencial a identificação e quantificação do princípio ativo mencionado no rótulo do produto. Utilizou-se amostras de medicamentos referência, genérico e similar, em forma de comprimido, na dose de 50 mg. O método foi desenvolvido por meio de CLAE acoplado a um detector de espectroscopia UV de comprimento de onda fixo com os seguintes parâmetros: fase estacionária foi a coluna Kinetex C18 de fase reversa 150 x 4,6 mm (5 μm) com fase móvel constituída por acetonitrila e água em modo isocrático com fluxo de 0,8 mL/min e injeção de 20 μL com detecção a 230 nm. O desenvolvimento e validação de método analítico foram realizados conforme os parâmetros segundo a RDC 166/2017.Na linearidade, foi feita uma curva de calibração de 5 pontos, com coeficiente de variação (CV) menores que 1,85, cada um em triplicata, resultando em: r= 0,9995, y= 159085,8x + (-3102497). A exatidão foi testada com injeções em triplicata, resultando nas seguintes médias: 39,884; 49,940 e 60,123 respectivamente. Na precisão do método realizou-se a injeção da solução de 50 µg/mL em dois dias diferentes, por diferentes analistas, totalizando 18 injeções e resultando em CV abaixo de 1,85. Para o efeito matriz, seguiu-se do mesmo modo da linearidade, obtendo-se: r= 0,9924221 e y= 154533.3x + (-3080449). A robustez foi avaliada injetando-se 6 vezes a solução padrão e teste (1 e 2), resultando no CV de 0,84; 1,08; 1,22 na devida ordem. No doseamento dos medicamentos de referência, genérico e similar, o teor resultou de 95,43-100,00; O método desenvolvido através de CLAE revelou-se adequado para a quantificação de Sildenafila em comprimido. Os três produtos analisados, todos obtiveram dados dentro da faixa preconizada pela RDC 166/2017 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA)

Solubilization of phosphorus by endofhytic bacteria

Os microrganismos do solo influenciam diretamente a fertilidade e a produtividade vegetal. Dentre estes, os solubilizadores de fosfato inorgânico aumentam a disponibilidade do fósforo e podem aumentar a eficiência de fertilizantes fosfatados. Este trabalho visou selecionar bactérias solubilizadoras de fosfato inorgânico como potencial promotoras de crescimento vegetal. Na primeira etapa, isolados previamente obtidos, a partir de folhas e raízes de cana de açúcar cultivada no Estado de Pernambuco, foram testados em meios de cultura sólidos com diferentes fontes de fósforo. Na segunda etapa, três dos isolados mais solubilizadores, três considerados pouco solubilizadores, um isolado não solubilizador, e uma estirpe padrão Pseudomonas fluorescens (R-243) foram testados em dois meios de cultura líquidos para avaliar modificação do pH e solubilização de P ao longo do tempo. Os mesmos isolados, além da ausência de inoculação, foram testados em vasos de Leonard com fontes de fósforo de alta e baixa solubilidade, utilizando feijão caupi como planta indicadora. Na colheita, aos 44 dias após o plantio, foi avaliada a massa seca da parte aérea, o teor de fósforo solúvel no substrato e na parte aérea e o conteúdo de fósforo na parte aérea. A composição do meio, tanto sólido quanto líquido, influenciou na capacidade de solubilização de fosfato pelas bactérias endofíticas. Como isolados considerados pouco solubilizadores em meio sólido,baseado em avaliação semi-quantitativa, apresentaram alto potencial de solubilização no meio líquido, com base em determinação, podemos considerar que o meio líquido apresenta resultados mais confiáveis para a seleção de isolados. Esta solubilização não está diretamente relacionada apenas com a redução do pH, já que diferentes isolados, que baixaram o pH para o mesmo ponto, apresentaram diferentes solubilizações de P. Os isolados UAGC 17, 19 e 65 foram os solubilizadores mais fortes em meio de cultura, porém não demonstraram a mesma eficiência quando inoculados em feijão caupi.Soil microorganisms directly affect fertility and plant yield. Among these, inorganic phosphate solubilizers enhance phosphorus availability, and may increase phosphorus fertilizers efficiency. This work aimed to select inorganic phosphorus solubilizing bacteria as potential plant growth promoters. On the first stage, previously obtained isolates, from leaves and roots of sugarcane cultivated in Pernambuco, were tested in solid culture media with different phosphorus sources. On the second stage, three of the most solubilizing isolates, three of the least solubilizing, one considered as non-solubilizer, and a reference strain of Pseudomonas fluorescens (R-243) were tested in two liquid culture media to evaluate pH change and P solubilization over time. These isolates, and absence of inoculation, were tested in Leonard jars high and low solubility phosphorus sources, using cowpea as an indicator plant. At harvest, 44 days after planting, shoot dry mass, soluble phosphorus content on the substrate and phosphorus content on the shoot, and total shoot phosphorus were evaluated. Media composition, both for solid and liquid media, affected phosphorus solubilization ability of the endophytic bacteria. As isolates considered as low solubilizers in solid media, based on a semi-quantitative evaluation, presented high solubilization potential in liquid media, based on aquantitative determination, this evaluation system may be considered as more reliable for isolate selection. This solubilization was not directly related only to pH lowering, since different strains which lowered the media pH to the same point, had different soluble phosphorus yields. Isolates UAGC 17, 19 and 65 were the strongest solubilizers in culture media, but did not show the same efficiency when inoculated in cowpea.Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNP

Avaliação de testes estatísticos de comparações múltiplas de médias

O objetivo deste trabalho foi verificar a eficiência e uniformidade das respostas de diferentes testes de comparações múltiplas entre médias, bem como a taxa de ocorrência do erro tipo I. Quatro diferentes testes de comparações múltiplas de médias foram aplicados a 200 experimentos e a 10 variáveis, criadas com valores aleatórios, para avaliação do número de níveis; concordância com o teste F; taxa de ocorrências do erro tipo I por variável e por experimento. Os testes diferiram em seus resultados para todas as variáveis analisadas. As maiores divergências de resultados foram encontradas quando se utilizou o teste LSD. Quanto ao nível de significância adotado, maior concordância foi encontrada por meio do teste de Tukey

Evaluation methods used for phosphate-solubilizing bacteria

Phosphorus solubilizers naturally acidify rhizospheric soil and increase phosphorus availability; therefore, their evaluation may help to reduce phosphorus fertilizer use. This work aimed to evaluate the different selection methods and select inorganic phosphorus-solubilizing bacteria as potential plant-growth promoters. Bacterial isolates obtained from sugarcane roots and soil were tested using solid growth media containing bicalcium phosphate and Irecê Apatite ground rock phosphate as phosphorus sources. Seven isolates with high (3), moderate (3) and low solubilization indices (1) and the Pseudomonas fluorescens R-243 strain were tested in two liquid growth media, followed by the pH and soluble P in the solution. The same isolates, in the absence of inoculation, were tested in Leonard jars with two high- and low-solubility sources using cowpea as a test species. Forty-four days after planting aboveground dry mass, the phosphorus content and total aboveground phosphorus and substratum phosphorus contents were evaluated. The growth media affected phosphorus solubilization by the bacteria. Evaluation of liquid media was the most reliable method for analyzing bicalcic phosphorus solubilization by the bacteria not linked to pH reduction. Isolates UAGC 17, 19 and 65 should be better studied because they were the best solubilizers in culture media; however, they did not demonstrate the same efficiency when inoculated on cowpea.Keywords: Solubilization, phosphate, P-solubilizing-microorganism

Nodulação e produção do caupi (Vigna unguiculata L. Walp) sob efeito de plantas de cobertura e inoculação Nodulation and yield of cowpea (Vigna unguiculata L. Walp) under inoculation and cover crops

Um experimento de campo foi realizado no município de Crato - Ceará para estudar como a planta de cobertura afeta a nodulação e produtividade de caupi (Vigna unguiculata (L.) Walp), submetido a diferentes inoculações. Empregou-se o delineamento em blocos casualizados, no esquema em parcelas subsubdivididas, com quatro repetições. Os tratamentos consistiram de plantas de cobertura, formando a parcela principal; inoculação, como subparcela; e amostragens quinzenais, como subsubparcela. As plantas de cobertura foram: milheto - Pennisetum americanum; mucuna-preta - Stizolobium aterrimum ou vegetação espontânea, enquanto as fontes de N foram: sem inoculação; sem inoculação + 50 kg ha-1 de N na forma de uréia; inoculação com estirpes rizobianas (Bradyrhizobium sp.) recomendadas pela RELARE -BR 3301 + BR 3302; ou pela UFRPE - NFB 6156 + NFB 700. Foi utilizada a cultivar Patativa de caupi, recomendada para a região. A partir de sete dias após a emergência e até a maturidade final da cultura, foram realizadas amostras quinzenais, colhendo-se duas plantas, por subparcela para determinação do número de nódulos, matéria seca de nódulos e matéria seca da parte aérea. A partir dos 60 dias após emergência, foram realizadas colheitas semanais da área útil da subparcela, para determinação da produtividade de grãos. A mucuna aumentou a nodulação do caupi não-inoculado. A inoculação do caupi com estirpes recomendadas, ou o aumento da população nativa, permitiu produção de biomassa e grãos semelhante da adubação com 50 kg ha-1 de N.<br>A field experiment was conducted at Crato - Ceará to study how green manuring affects nodulation and yield of cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp) which received different inoculation treatments. The experiment was conducted under a randomized block design, split-split-plot arrangement with four replicates. Treatments were green manures for the main plot, nitrogen sources for the split-plot and bi-weekly plant samplings for the split-split-plot. The green manures under study were pearl millet - Pennisetum americanum; velvet beans - Stizolobium aterrimum; or spontaneous vegetation, while nitrogen sources were Native rhizobial population; nitrogen fertilizer 50 kg ha-1 of N as urea; inoculation with RELARE recommended rhizobial strains - BR 3301 + BR 3302; or UFRPE recommended rhizobial strains - NFB 6156 + NFB 700. Cowpea cultivar Patativa was used, which is recommended by regional extension services. From seven days after germination up to final physiological maturity bi-weekly two-plant samples were collected for nodule number and dry mass determination and aerial part dry mass determination. From 60 days after germination weekly harvests of each split-plot were conducted for grain yield determination. Velvet bean increased uninoculated cowpea nodulation. Cowpea inoculation with recommended strains or native population increase allowed biomass and grain production similar to fertilization with 50 kg ha-1 of N