UTILIZAÇÃO DE NITRATO DE AMÔNIO E DE URÉIA COMO FONTES DE NITROGÊNIO NA MICROPROPAGAÇÃO DE AMOREIRA-PRETA

The high cost allied to the difficulty in the acquisition of the ammonium nitrate has been taking the accomplishment of works looking for an alternative for the substitution of this source of nitrogen. It was aimed at to study the technical viability of the substitution of the ammonium nitrate for urea, as source of nitrogen in the culture media for the blackberry in vitro cv. Tupy (Rubus sp). Nodal segments were used, already established in vitro, were inoculated in culture media MS and 50% MS, added of 1.0 mg. dm-3 of BAP, solidified with 6 g.dm-3 of agar, pH was adjusted for 5,8 and sterilized to 121 ºC and 0,1 mPa for 20 min. The treatments consisted of the substitution of 0; 20; 40; 60; 80 and 100% of NH4NO3 for urea, and the swinging of nitrogen supplied by the culture media MS it was not altered. The explants were maintained by 60 days in growth room with temperature of 27±1 ºC, photoperiod of 16 h and luminous intensity of 32 mmol m-2 s-1. The experiment was arranged in a completely randomized design, in factorial (6 x 2) using four repetitions with 16 plants each one. From the obtained results it can be concluded that the urea doesn't substitute NH4NO3 in the culture media MS as nitrogen source in the culture vitro of blackberry.   O elevado custo do nitrato de amônio, aliado à dificuldade de aquisição do mesmo, tem levado à realização de trabalhos, no sentido de buscar alternativas para a substituição dessa fonte de nitrogênio. Objetivou-se estudar a viabilidade técnica da substituição do nitrato de amônio por uréia, como fonte de nitrogênio no meio de cultura para o cultivo in vitro de amoreira-preta (Rubus sp) cultivar Tupy. Segmentos nodais de brotações pré-estabelecidas in vitro, foram inoculados em meio de cultura MS (Murashige & Skoog) e 50% MS, acrescido de 1,0 mg dm-3 de BAP, solidificado com 6 g dm-3 de ágar, pH ajustado para 5,8 e esterilizado a 121 °C e 0,1 mPa por 20 min. Os tratamentos consistiram da substituição de 0; 20; 40; 60; 80 e 100% do NH4NO3 por uréia, não sendo alterado o balanço de nitrogênio fornecido pelo meio MS. Os explantes foram mantidos por 60 dias em sala de crescimento com temperatura de 27±1 ºC, irradiância de 32 mmol m–2 s–1 e fotoperíodo de 16 h. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualisado, em esquema fatorial (6 x 2), utilizando-se de quatro repetições constituídas de quatro tubos contendo um explante cada. Com base nos resultados obtidos, pode-se concluir que é possível a substituição parcial do nitrato de amônio no meio MS na micropropagação da amoreira-preta cv. Tupy.  

GLOBULAR AND CORDIFORM COFFEE SOMATIC EMBRYOS INDUCED BY BAP E SUCROSE

The conventional breeding programs for coffee plants require a long period for obtaining new cultivars. Techniques of tissue culture are used to minimize such problem. The effect of BAP and sucrose in somatic embryogenesis of coffee plants was evaluated. Calli of Coffea arabica L. Acaiá Cerrado were inoculated in test tubes containing 15 ml of a R regeneration semi-solid culture medium. The treatments consisted of different BAP concentrations (0, 2, 4, 6 and 8 mg.L-1) and sucrose (0, 15, 30 and 60 g.L-1), and the culture medium was supplemented with 7 g.L-1 agar. The pH was adjusted to 5.8 before being sterilized at 121 ºC and 1.5 atm for 20 minutes. The calli were inoculated in test tubes in laminar flow chamber and the cultures were kept in a growth room at 27 ± 1 ºC, 16-hour photoperiod and 32 mM.m-2.s-1 light intensity. The highest number of globular and cordiform embryos were obtained by using 8 mg.L-1 of BAP combined to 60 mg.L-1 sucrose which provided a total of 247 and 182 embryos per explant, respectively.Os programas convencionais de melhoramento de cafeeiro requerem um período longo para obtenção de novas cultivares. Uma alternativa para minimizar tal problema é a utilização das técnicas de cultura de tecidos. Objetivou-se estudar o efeito de BAP e sacarose na embriogênese somática de cafeeiro. Calos de Coffea arabica L. cv. Acaiá Cerrado foram inoculados em tubos de ensaio, contendo 15 ml do meio de cultura semi-sólido R de regeneração. Os tratamentos consistiram de combinação de diferentes concentrações de BAP (0, 2, 4, 6 e 8 mg.L-1) e sacarose (0, 15, 30 e 60 g.L-1), acrescido de 7 g.L-1 de ágar e pH ajustado para 5,8, antes da autoclavagem a 121 ºC e 1,5 atm por 20 minutos. A inoculação foi realizada em câmara de fluxo laminar e os calos foram mantidos em sala de crescimento com temperatura de 27±1ºC, fotoperíodo de 16 horas e 32mM.m-2.s-1 de intensidade luminosa. Maior número de embriões globulares e cordiformes foi obtido utilizando-se 8 mg.L-1 de BAP associado a 60 mg.L-1 de sacarose, proporcionando um total de 247 e 182 embriões por explante, respectivamente

Análises bioquímicas e hsitológicas na micropropagação de abacaxizeiro 'Gomo de Mel' submetido a reguladores vegetais

Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da aplicacao exogena de poliaminas e TIBA (antiauxina) na micropropagacao e anatomia foliar de plantulas de abacaxizeiro eIAC Gomo-de-mel f e analisar os teores de poliaminas endogenas, atividade de peroxidase, proteina, IAA-oxidase e a provavel relacao com as diferentes fases da micropropagacao. Inicialmente, retiraram-se as gemas da coroa de frutos sadios e a assepsia foi realizada com hipoclorito de sodio comercial (2 a 2,5% de cloro ativo) a 30% por 20 minutos e lavadas por 3 vezes em agua destilada e autoclavada. Em seguida, inocularam-se as gemas em meio MS solido contendo diferentes combinacoes de BAP (0; 0,5; 1,0 e 1,5 mg L-1) e NAA (0; 0,5 e 1,0 mg L-1). Apos 60 dias, foram selecionados os melhores tratamentos para proliferacao das brotacoes, que foram individualizadas e transferidas para estes meios por mais trinta dias, em meio MS liquido. Plantas oriundas do experimento anterior tiveram as folhas cortadas e apenas segmentos de 1 cm foram inoculados em meio MS liquido contendo os diferentes tratamentos: T1-MS, T2-MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA, T3-MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA + 10 mM SPD, T4-MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA + 10 mM SPM, T5-MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA + 10 mM PUT, T6-MS + 10 mM SPD, T7-MS + 10 mM SPM e T8-MS + 10 mM PUT. Na ultima fase, segmentos foram inoculados em meio MS liquido contendo os tratamentos: T1-MS, T2-MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA, T3-MS + 0,5 ÊM TIBA, T4-MS + 1,0 ÊM TIBA, T5-MS + 2,0 ÊM TIBA, T6-MS + 4,0 ÊM TIBA, T7-MS + 8,0 ÊM TIBA e T8-MS + 16,0 ÊM TIBA. Apos, as plantas foram aclimatizadas em substrato Plantmax e houve 100% de sobrevivencia, independente do tratamento. Foram realizados cortes histologicos foliares para estudar a influencia das poliaminas e TIBA na anatomia foliar...The effects of exogenous polyamines and TIBA (antiauxin) application in the micropropagation, leaf anatomy of pineapple plants IAC Gomo-de-mel and the contents of endogenous polyamines, peroxidase activity, protein, IAA-oxidase and probable relationship with the different micropropagation phases were studied. Initially, the axillary bud explants were excised from the crown of healthy fruits and the asepsis was accomplished with sodium hypochloride (2 to 2,5% of active chlorine) 30% for 20 minutes and washed 3 times in distilled and autoclaveted water. After, the axillary buds were inoculated in MS solid medium containing the different BAP (0; 0,5; 1,0 and 1,5 mg L-1) and NAA (0; 0,5 and 1,0 mg L-1) combinations. After 60 days, the best treatments were selected for shoot proliferation that were individualized and transferred to these media for more 30 days, in MS liquid medium. Plants from the previous experiment had the leaves cut and just 1 cm segments were inoculated in MS liquid medium containing the different treatments: T1-MS, T2-MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA, T3-MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA + 10 mM SPD, T4- MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA + 10 mM SPM, T5-MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA + 10 mM PUT, T6-MS + 10 mM SPD, T7-MS + 10 mM SPM and T8-MS + 10 mM PUT. In the last phase, segments were inoculated in MS liquid medium containing the treatments: T1-MS, T2-MS + 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA, T3-MS + 0,5 mM TIBA, T4-MS + 1,0 mM TIBA, T5-MS + 2,0 mM TIBA, T6-MS + 4,0 mM TIBA, T7-MS + 8,0 mM TIBA and T8-MS + 16,0 mM TIBA. After, the plants were acclimatizated in Plantmax substrate and there were 100% survival, independent of the treatment. Leaf cuts were made to study polyamines and TIBA influence in the leaf anatomy. The highest shoot number wasobserved with 1,0 mg L-1 BAP + 0,5 mg L-1 NAA, however with hyperhydricity...(Complete abstract click electronic access below

Estudo das poliaminas na morfogênese in vitro de Hemerocallis sp.

Em cultura de tecidos, ações de indução do desenvolvimento vegetal e também controle oxidativo de células e tecidos, podem ser atribuídas às poliaminas. Neste sentido, propôs-se investigar a participação das poliaminas espermidina (SPD), espermina (SPM) e putrescina (PUT) na indução da diferenciação de calos e no controle oxidativo de células e tecidos de Hemerocallis sp cultivados in vitro. Massas celulares, oriundas de calos produzidos in vitro, foram cultivadas em meio de cultura MS, suplementado com SPD, SPM e PUT em diferentes concentrações e combinações, avaliando-se teores endógenos de poliaminas e proteínas solúveis, atividade das peroxidases (EC 1.11.1.7), número e altura dos brotos, porcentagem de microbrotações, hiperhidricidade e necrose, e formação de calos. Os resultados apontam uma participação das poliaminas não só na indução da morfogênese, mas também no que se refere aos padrões oxidativos de células e tecidos. Ao final do experimento, a aplicação de PUT, isolada (10µM PUT) ou combinada com SPD (10µM SPD + 10 µM PUT) ou SPM (10µM SPM +10µM PUT), induziu as maiores médias em relação ao número e à altura de brotos diferenciados. Já a combinação das três poliaminas no meio de cultura (10µM SPD + 10µM SPM + 10µM PUT) induziu maior porcentagem (60%) de formação de microplantas nos calos. A combinação de SPD e SPM (10µM SPD + 10µM SPM) induziu maior quantidade de tecido necrosado (65%). Verificou-se que SPM aplicada exogenamente no meio de cultura (10µM SPM) pode atuar como antioxidante celular na cultura de calos desta espécie.In tissue culture, the action of induction of the vegetal development and also oxidative control of cells and tissues are attributed to the polyamines. This study was aimed at verifing the participation of the polyamines spermidine (SPD), spermine (SPM) and putrescine (PUT) in the induction of callus differentiation and in the oxidative control at Hemerocallis sp. cultivated in vitro. Cell mass produced by callus in vitro were cultivated in medium MS, supplemented with SPD, SPM and PUT in different concentrations and combinations, by evaluating endogenous contents of polyamines and soluble proteins, and peroxidase activity (EC 1.11.1.7), number and height of shoots, hyperhydricity and necrosis, and formation of calluses. The results indicate that polyamines participate not only at the morphogenesis induction, but also to the oxidative standards of cells and tissues. At the end of the study PUT, isolated (10µM PUT) or with SPD (10µM 10 SPD + 10µM PUT) or SPM (10µM SPM + 10µM PUT), induced the biggest average related to number and height of differentiated shoots. Already the combination of the three polyamines in the medium (10µM SPD + 10µM SPM + 10µM PUT) induced mayor parts (60%) of micro shoots in the callus. The SPD and SPM combination (10µM SPD + 10µM SPM) induced the biggest quantity of necrosis tissue (65%). It was verified that SPM, applied exogenously in the medium (10 µM SPM) can act as antioxidant in the tissue culture of this species.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq

Uréia como fonte alternativa de nitrogênio na micropropagação de abacaxizeiro cv. Pérola = Micropropagation of pineapple cv. Pérola with urea as nitrogen source

Objetivou-se estudar a viabilidade da substituição parcial ou total do nitrato de amônio por uréia como fonte de nitrogênio no meio de cultura para o cultivo in vitro do abacaxizeiro cv. Pérola. Plantas oriundas das gemas da coroa do fruto com massa fresca em torno de 80 mg foram inoculadas em meio MS (líquido e sólido) substituindo-se 100, 80, 60, 40, 20 e 0% do nitrato de amônio por uréia. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com quatro repetições e três plantas/repetição. Após 60 dias,observou-se a possibilidade da substituição parcial de 40% de nitrato de amônio por uréia para as variáveis analisadas e melhor desenvolvimento das plantas em meio de cultura sólido.<br><br>The partial or total substitution viability of the ammonium nitrate for urea, as source of nitrogen in the culture medium for the in vitro culture of pineapple cv. Pérola was studied. Plants originating from fruit crown buds with fresh weight matter around 80 mg was inoculated on MS medium (liquid and solid) with substitution of 100, 80, 60, 40, 20 and 0% of the ammonium nitrate for urea. These treatments were arranged in a completely randomized design, with four replications and three plants/replications. After 60 days, thepossibility of 40% ammonium nitrate for urea partial substitution was observed for the analyzed variables. In addition, better plant development in solid culture medium was observed as well

Enraizamento in vitro do porta-enxerto de videira ‘VR043-43’: efeito do ANA e NaCl

A micropropagação do porta-enxerto de videira é utilizada, entre outros fatores, na obtenção de plantas livres de vírus, em curto espaço de tempo e na preservação de germoplasma. Objetivou-se testar diferentes concentrações de NaCl e ANA adicionados ao meio ½ MS, no crescimento e enraizamento in vitro do porta-enxerto de videira. Segmentos nodais, oriundos de brotações preestabelecidas in vitro foram excisados e imediatamente inoculados em tubos de ensaio contendo 15 mL do meio de cultura. Os tratamentos consistiram de concentrações de NaCl e de ANA, em combinações que resultaram em 25 tratamentos e do porta-enxerto de videira ‘VR043-43’. O meio foi acrescido de 30 g L-1 de sacarose, solidificado com 6,0 g L-1 de ágar e o pH ajustado para 5,8, antes da autoclavagem a 121ºC e 1 atm por 20 minutos. Posteriormente à inoculação, os explantes foram transferidos para sala de crescimento a 25 +/- 2ºC, irradiância de 35 mmol m-2 s-1 e fotoperíodo de 16 horas. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualisado, utilizando-se de quatro repetições com 16 brotações cada. Após 70 dias, observou-se, mesmo em meio salino, a presença de raízes em brotações de ‘VR043-43’. Em altas concentrações de ácido naftaleno acético, o porta-enxerto de videira se desenvolve e se enraíza bem