Improved ways to screen for patients with Fabry disease, involving optometry in a multidisciplinary approach

Purpose: Fabry disease is considered a rare disease, based on its prevalence. It is recognized, however, that there are many individuals aff ected who are unscreened. This article aims to demonstrate how optometrists can help to defi ne improved ways to screen patients aff ected by this rare metabolic disorder, in a multidisciplinary perspective. Methods: A screening model, based on continuous education for optometrists was developed. Under this model, suspect patients identifi ed by optometrists are referred to Université de Montréal's vision clinic (EOUM) for further testing and assessment. Should ocular manifestations and/or case history prove relevant to these rare diseases, a urinary test is then performed to fi nd related biomarkers. When suspicions narrow to probable Fabry disease, the subjects are referred to metabolic disorder specialists for complete DNA testing and medical follow-up of their condition. Results: Continuous education lectures were given across Quebec, reaching nearly 60% of the province’s optometrists. Sixteen months following the model's implementation, ten suspected patients were referred. Of these, two new Fabry patients were confi rmed, leading to the diagnosis of fi ve other relatives with the disease. Two additional persons, diagnosed as Fabry patients, but lost to medical follow-up for many years, were once again placed under the care of Fabry experts. To this point, because of optometric involvement, seven new patients of Fabry were diagnosed and two were brought back under experts care.  Conclusion: Continuous education lectures were given across Quebec, reaching near 60% of the province’s optometrists. Sixteen months following the model's implementation, ten suspected patients were referred. Of these, two new Fabry patients were confi rmed, leading to the diagnosis of fi ve other relatives with the disease. Two additional persons, diagnosed as Fabry patients, but lost to medical follow-up for many years, were once again placed under the care of Fabry experts. To this point, because of optometric involvement, seven new patients of Fabry were diagnosed and two were brought back under experts care

A biobank management model applicable to biomedical research

BACKGROUND: The work of Research Ethics Boards (REBs), especially when involving genetics research and biobanks, has become more challenging with the growth of biotechnology and biomedical research. Some REBs have even rejected research projects where the use of a biobank with coded samples was an integral part of the study, the greatest fear being the lack of participant protection and uncontrolled use of biological samples or related genetic data. The risks of discrimination and stigmatization are a recurrent issue. In light of the increasing interest in biomedical research and the resulting benefits to the health of participants, it is imperative that practical solutions be found to the problems associated with the management of biobanks: namely, protecting the integrity of the research participants, as well as guaranteeing the security and confidentiality of the participant's information. METHODS: We aimed to devise a practical and efficient model for the management of biobanks in biomedical research where a medical archivist plays the pivotal role as a data-protection officer. The model had to reduce the burden placed on REBs responsible for the evaluation of genetics projects and, at the same time, maximize the protection of research participants. RESULTS: The proposed model includes the following: 1) a means of protecting the information in biobanks, 2) offers ways to provide follow-up information requested about the participants, 3) protects the participant's confidentiality and 4) adequately deals with the ethical issues at stake in biobanking. CONCLUSION: Until a governmental governance body is established in Quebec to guarantee the protection of research participants and establish harmonized guidelines for the management of biobanks in medical research, it is definitely up to REBs to find solutions that the present lack of guidelines poses. The model presented in this article offers a practical solution on a day-to-day basis for REBs, as well as researchers by promoting an archivist to a pivotal role in the process. It assures protection of all participants who altruistically donate their samples to generate and improve knowledge for better diagnosis and medical treatment

Le consentement libre et éclairé dans la recherche en génétique humaine: réalité ou utopie

Résumé: L 'avancement fulgurant de nouvelles techniques de biologie moléculaire a permis un essor majeur de la recherche en génétique humaine: l' identification de gènes responsables de maladies génétiques, la connaissance de leur pathogénie, l' apport d' un traitement, et le désir de vaincre et de prévenir ces maladies. Par contre, ladite recherche a aussi mené à une problématique d ' envergure face au respect de l' autonomie, de l' intégrité et de la dignité du sujet participant tout au long du projet. De fait, la recherche en génétique humaine devrait être un partenariat sujet-chercheur. Malheureusement, le sujet se retrouve souvent mal informé lors du recrutement, ne comprend pas le formulaire de consentement, ou n ' a pas saisi toutes les utilisations possibles de son ADN. L ' auteur présente le rôle que devraient jouer le chercheur et son équipe pour s'assurer d ' un choix informé de la part du sujet, garantir sa protection et respecter la confidentialité des données tout au long du projet de recherche. L ' implication déterminante du comité d ' éthique de la recherche y est aussi soulevée, particulièrement dans l' aspect éducationnel des chercheurs et dans le suivi du projet de recherche en génétique . Finalement, des principes fondamentaux sont proposés pour responsabiliser les chercheurs et les comités d ' éthique de la recherche et leur permettre d'atteindre un but commun: obtenir un "réel" consentement libre et éclairé dans un projet de recherche en génétique humaine.||Abstract: The considerable advancement of molecular biology techniques has given way to major developments in human genetic research such as: the identification of genes responsible for genetic diseases , the understanding of their pathogeny, the possibility of treatment and the desire to conquer and prevent those diseases. However genetic research has also brought forth major problems regarding autonomy, integrity and dignity of the participant. Human genetic research should be a partnership between the researcher and the human subject. Unfortunately, the participant is often illinformed when being recruited by the researcher or he may also Jack a full understanding of the consent form or the eventual uses of DNA samples collected throughout the project. The author presents the role that should be played by the researcher and the research ethics committee in order to guarantee an informed choice by the human subject and ensure his protection as weil as data confidentiality throughout the project. The importance of the educational role of the ethics research committee towards the researcher, as weil as the follow-up of the research project is presented. Finally, fundamental principles are proposed in order for the researcher as weil as the research ethics committee to attain a common goal, which is to ensure an informed consent in ali human genetic research projects

Association entre le génotype et l'excrétion du globotriaosylcéramide chez les patients atteints de la maladie de Fabry et la gestion de biobanques dans la recherche en génétique humaine

La maladie de Fabry est une maladie métabolique héréditaire liée au chromosome X et est causée par un déficit de l'enzyme l'[alpha]-galactosidase A. Plus de 350 mutations ont été répertoriées chez les patients atteints. L'incidence de la maladie de Fabry est variable à travers le monde: entre 1:3 100 en Italie à 1:833 000 au Portugal, avec une moyenne évaluée à 1:40 000. Les hommes hémizygotes présentent une expression clinique très variable et sont souvent atteints plus sévèrement que les femmes hétérozygotes, qui peuvent aussi manifester des symptômes. Un biomarqueur est excrété de façon prédominante dans l'urine de ces patients, le globotriaosylcéramide (Gb[indice inférieur 3]), un glycosphingolipide qui provient des cellules épithéliales rénales. Nous avons entrepris l'élaboration d'une méthode d'analyse du biomarqueur Gb[indice inférieur 3] dans l'urine déposée sur papier filtre de patients hémizygotes et hétérozygotes atteints de la maladie de Fabry, en utilisant la spectrométrie de masse en tandem couplée à la chromatographie en phase liquide. Suite au développement et à la validation de cette méthodologie, nous l'avons raffinée et améliorée de façon à pouvoir analyser simultanément le Gb[indice inférieur 3] et la créatinine (multiplex) à l'intérieur d'un temps plus court, soit en 2.6 minutes. Le dosage de la créatinine permet de normaliser les valeurs obtenues du Gb[indice inférieur 3]. Cette méthodologie répond à plusieurs impératifs cliniques: permettre un dépistage à haut risque de la maladie de Fabry et assurer le suivi et le monitoring des patients atteints qui sont sous thérapie enzymatique de remplacement. Nous répondons aussi à la question concernant l'étude de faisabilité d'analyse du Gb[indice inférieur 3] sur l'ensemble d'une population donnée. Aussi, l'établissement d'un diagnostic précoce avant l'apparition de troubles cliniques irréversibles est potentiellement important pour le patient et permet d'offrir un conseil génétique. Des corrélations phénotype-génotype hautement significatives ont pu être établies avec les taux d'excrétion du Gb[indice inférieur 3], à savoir que l'excrétion du Gb[indice inférieur 3] urinaire est en corrélation directe avec les types de mutations à l'étude, le sexe du patient et le traitement. Par contre, il n'y a pas de corrélation significative entre l'âge du patient et l'excrétion du Gb[indice inférieur 3]. Nous avons pu constater que certaines mutations non-sens provoquent une excrétion plus forte du Gb[indice inférieur 3] urinaire que d'autres types de mutations. Aussi, par les différences des moyennes des moindres carrés, nous avons trouvé une corrélation significative au niveau de l'excrétion urinaire du Gb[indice inférieur 3] et des mutations faux-sens et non-sens, de même qu'au niveau des mutations non-sens et des mutations de jonctions d'épissage. Aucune différence significative n'a été relevée entre deux groupes de patients avec la même mutation faux-sens, l'un provenant d'une région de la Nouvelle-Écosse où il subsiste un effet fondateur et l'autre issu de plusieurs régions à travers le monde. En réponse aux interrogations d'ordre éthique, nous avons élaboré un modèle de gestion des biobanques dans la recherche institutionnelle qui répond à toutes les questions soulevées précédemment et assure donc la protection du sujet participant et la confidentialité des informations génétiques correspondantes. Compte tenu de la complexité et des conséquences de tout projet de recherche impliquant des biobanques, nous avons élaboré un processus de formation continue sur le thème des bonnes pratiques éthiques applicables aux biobanques. Ce processus implique l'investigateur principal, le personnel de recherche, le comité d'éthique et l'institution qui travaillent en synergie en vue d'assurer une participation informée du sujet

Lentivirus-mediated gene therapy for Fabry disease

Enzyme and chaperone therapies are used to treat Fabry disease. Such treatments are expensive and require intrusive biweekly infusions; they are also not particularly efficacious. In this pilot, single-arm study (NCT02800070), five adult males with Type 1 (classical) phenotype Fabry disease were infused with autologous lentivirus-transduced, CD34+-selected, hematopoietic stem/progenitor cells engineered to express alpha-galactosidase A (α-gal A). Safety and toxicity are the primary endpoints. The non-myeloablative preparative regimen consisted of intravenous melphalan. No serious adverse events (AEs) are attributable to the investigational product. All patients produced α-gal A to near normal levels within one week. Vector is detected in peripheral blood and bone marrow cells, plasma and leukocytes demonstrate α-gal A activity within or above the reference range, and reductions in plasma and urine globotriaosylceramide (Gb3) and globotriaosylsphingosine (lyso-Gb3) are seen. While the study and evaluations are still ongoing, the first patient is nearly three years post-infusion. Three patients have elected to discontinue enzyme therapy

Lentivector Iterations and Pre-Clinical Scale-Up/Toxicity Testing: Targeting Mobilized CD34+ Cells for Correction of Fabry Disease

Fabry disease is a rare lysosomal storage disorder (LSD). We designed multiple recombinant lentivirus vectors (LVs) and tested their ability to engineer expression of human α-galactosidase A (α-gal A) in transduced Fabry patient CD34+ hematopoietic cells. We further investigated the safety and efficacy of a clinically directed vector, LV/AGA, in both ex vivo cell culture studies and animal models. Fabry mice transplanted with LV/AGA-transduced hematopoietic cells demonstrated α-gal A activity increases and lipid reductions in multiple tissues at 6 months after transplantation. Next we found that LV/AGA-transduced Fabry patient CD34+ hematopoietic cells produced even higher levels of α-gal A activity than normal CD34+ hematopoietic cells. We successfully transduced Fabry patient CD34+ hematopoietic cells with “near-clinical grade” LV/AGA in small-scale cultures and then validated a clinically directed scale-up transduction process in a GMP-compliant cell processing facility. LV-transduced Fabry patient CD34+ hematopoietic cells were subsequently infused into NOD/SCID/Fabry (NSF) mice; α-gal A activity corrections and lipid reductions were observed in several tissues 12 weeks after the xenotransplantation. Additional toxicology studies employing NSF mice xenotransplanted with the therapeutic cell product demonstrated minimal untoward effects. These data supported our successful clinical trial application (CTA) to Health Canada and opening of a “first-in-the-world” gene therapy trial for Fabry disease

Le consentement libre et éclairé dans la recherche en génétique humaine: réalité ou utopie

Résumé: L 'avancement fulgurant de nouvelles techniques de biologie moléculaire a permis un essor majeur de la recherche en génétique humaine: l' identification de gènes responsables de maladies génétiques, la connaissance de leur pathogénie, l' apport d' un traitement, et le désir de vaincre et de prévenir ces maladies. Par contre, ladite recherche a aussi mené à une problématique d ' envergure face au respect de l' autonomie, de l' intégrité et de la dignité du sujet participant tout au long du projet. De fait, la recherche en génétique humaine devrait être un partenariat sujet-chercheur. Malheureusement, le sujet se retrouve souvent mal informé lors du recrutement, ne comprend pas le formulaire de consentement, ou n ' a pas saisi toutes les utilisations possibles de son ADN. L ' auteur présente le rôle que devraient jouer le chercheur et son équipe pour s'assurer d ' un choix informé de la part du sujet, garantir sa protection et respecter la confidentialité des données tout au long du projet de recherche. L ' implication déterminante du comité d ' éthique de la recherche y est aussi soulevée, particulièrement dans l' aspect éducationnel des chercheurs et dans le suivi du projet de recherche en génétique . Finalement, des principes fondamentaux sont proposés pour responsabiliser les chercheurs et les comités d ' éthique de la recherche et leur permettre d'atteindre un but commun: obtenir un "réel" consentement libre et éclairé dans un projet de recherche en génétique humaine.||Abstract: The considerable advancement of molecular biology techniques has given way to major developments in human genetic research such as: the identification of genes responsible for genetic diseases , the understanding of their pathogeny, the possibility of treatment and the desire to conquer and prevent those diseases. However genetic research has also brought forth major problems regarding autonomy, integrity and dignity of the participant. Human genetic research should be a partnership between the researcher and the human subject. Unfortunately, the participant is often illinformed when being recruited by the researcher or he may also Jack a full understanding of the consent form or the eventual uses of DNA samples collected throughout the project. The author presents the role that should be played by the researcher and the research ethics committee in order to guarantee an informed choice by the human subject and ensure his protection as weil as data confidentiality throughout the project. The importance of the educational role of the ethics research committee towards the researcher, as weil as the follow-up of the research project is presented. Finally, fundamental principles are proposed in order for the researcher as weil as the research ethics committee to attain a common goal, which is to ensure an informed consent in ali human genetic research projects

Association entre le génotype et l'excrétion du globotriaosylcéramide chez les patients atteints de la maladie de Fabry et la gestion de biobanques dans la recherche en génétique humaine

La maladie de Fabry est une maladie métabolique héréditaire liée au chromosome X et est causée par un déficit de l'enzyme l'[alpha]-galactosidase A. Plus de 350 mutations ont été répertoriées chez les patients atteints. L'incidence de la maladie de Fabry est variable à travers le monde: entre 1:3 100 en Italie à 1:833 000 au Portugal, avec une moyenne évaluée à 1:40 000. Les hommes hémizygotes présentent une expression clinique très variable et sont souvent atteints plus sévèrement que les femmes hétérozygotes, qui peuvent aussi manifester des symptômes. Un biomarqueur est excrété de façon prédominante dans l'urine de ces patients, le globotriaosylcéramide (Gb[indice inférieur 3]), un glycosphingolipide qui provient des cellules épithéliales rénales. Nous avons entrepris l'élaboration d'une méthode d'analyse du biomarqueur Gb[indice inférieur 3] dans l'urine déposée sur papier filtre de patients hémizygotes et hétérozygotes atteints de la maladie de Fabry, en utilisant la spectrométrie de masse en tandem couplée à la chromatographie en phase liquide. Suite au développement et à la validation de cette méthodologie, nous l'avons raffinée et améliorée de façon à pouvoir analyser simultanément le Gb[indice inférieur 3] et la créatinine (multiplex) à l'intérieur d'un temps plus court, soit en 2.6 minutes. Le dosage de la créatinine permet de normaliser les valeurs obtenues du Gb[indice inférieur 3]. Cette méthodologie répond à plusieurs impératifs cliniques: permettre un dépistage à haut risque de la maladie de Fabry et assurer le suivi et le monitoring des patients atteints qui sont sous thérapie enzymatique de remplacement. Nous répondons aussi à la question concernant l'étude de faisabilité d'analyse du Gb[indice inférieur 3] sur l'ensemble d'une population donnée. Aussi, l'établissement d'un diagnostic précoce avant l'apparition de troubles cliniques irréversibles est potentiellement important pour le patient et permet d'offrir un conseil génétique. Des corrélations phénotype-génotype hautement significatives ont pu être établies avec les taux d'excrétion du Gb[indice inférieur 3], à savoir que l'excrétion du Gb[indice inférieur 3] urinaire est en corrélation directe avec les types de mutations à l'étude, le sexe du patient et le traitement. Par contre, il n'y a pas de corrélation significative entre l'âge du patient et l'excrétion du Gb[indice inférieur 3]. Nous avons pu constater que certaines mutations non-sens provoquent une excrétion plus forte du Gb[indice inférieur 3] urinaire que d'autres types de mutations. Aussi, par les différences des moyennes des moindres carrés, nous avons trouvé une corrélation significative au niveau de l'excrétion urinaire du Gb[indice inférieur 3] et des mutations faux-sens et non-sens, de même qu'au niveau des mutations non-sens et des mutations de jonctions d'épissage. Aucune différence significative n'a été relevée entre deux groupes de patients avec la même mutation faux-sens, l'un provenant d'une région de la Nouvelle-Écosse où il subsiste un effet fondateur et l'autre issu de plusieurs régions à travers le monde. En réponse aux interrogations d'ordre éthique, nous avons élaboré un modèle de gestion des biobanques dans la recherche institutionnelle qui répond à toutes les questions soulevées précédemment et assure donc la protection du sujet participant et la confidentialité des informations génétiques correspondantes. Compte tenu de la complexité et des conséquences de tout projet de recherche impliquant des biobanques, nous avons élaboré un processus de formation continue sur le thème des bonnes pratiques éthiques applicables aux biobanques. Ce processus implique l'investigateur principal, le personnel de recherche, le comité d'éthique et l'institution qui travaillent en synergie en vue d'assurer une participation informée du sujet