A avidez de anticorpos específicos anti-toxoplasma da classe IgG e sua utilização na diferenciação entre toxoplasmose recente e crônica em caprinos

Foi avaliada a avidez de anticorpos IgG como marcador sorológico de infecção recente e crônica pelo Toxoplasma gondii, através da dissociação do complexo antígeno-anticorpo com uréia. A avaliação foi realizada medindo-se a percentagem de queda (%Q) da absorbância, pelo ELISA, após a lavagem do complexo Ag - Ac formado com solução de uréia. Ficou determinado que a concentração dc uréia 9 Molar (M) foi a que melhor diferenciou infecções recentes e crônicas de cabras experimentalmente infectadas com Toxoplasma gondii, e que a %Q da absorbância decresce com o tempo de infecção do animal, tornando-se estável em torno do 100º. dia após a inoculação. Em um grupo de 116 amostras de soro, coletadas de caprinos naturalmente infectados, foram demonstrados perfis característicos de toxoplasmose recente, crônica ou em fase de transição. Os perfis foram previamente determinados pela avaliação da evolução dos níveis de anticorpos IgG pela reação de imunofluorescência indireta. Os animais caracterizados como portadores de toxoplasmose crônica apresentaram uma %Q da absorbância de 26,32 ± 10,84. Para toxoplasmose recente a %Q da absorbância observada foi de 77,61 ± 13,89 e para o perfil de transição, 46,22 ± 11,94

Toxoplasma - specific IgG antibodies avidity ELISA and its role in the differentiation between recent and chronic toxoplasmosis in goats

For serological characterization of recent Toxoplasma infection in goats low avidity IgG specific antibodies were studied. Avidity was evaluated as the decrease of absorbance in ELISA test after treating plates with 3, 6 and 9M urea, as a dissociating solution of low avidity antigen-antibody complexes. A concentration of 9M urea best discriminated between recent and old infections in goats experimentally infected with Toxoplasma gondii. Absorbance after treating plates with 9M urea decreased in relation to the duration of infection, levelling off about the 100th day after inoculation. In a group of 116 serum samples from naturally infected goats patterns of recent, transitional or chronic toxoplasmosis were demonstrated. Serological patterns were previously determined by immunofluorescent assay. For chronic toxoplasmosis infection, the observed decrease of absorbance was 26.32 ± 10.84. For recent toxoplasmosis it was 77.61 ± 13.89, and for transitional pattern, 46.22 ± 11.94.Foi avaliada a avidez de anticorpos IgG como marcador sorológico de infecção recente e crônica pelo Toxoplasma gondii, através da dissociação do complexo antígeno-anticorpo com uréia. A avaliação foi realizada medindo-se a percentagem de queda (%Q) da absorbância, pelo ELISA, após a lavagem do complexo Ag - Ac formado com solução de uréia. Ficou determinado que a concentração dc uréia 9 Molar (M) foi a que melhor diferenciou infecções recentes e crônicas de cabras experimentalmente infectadas com Toxoplasma gondii, e que a %Q da absorbância decresce com o tempo de infecção do animal, tornando-se estável em torno do 100º. dia após a inoculação. Em um grupo de 116 amostras de soro, coletadas de caprinos naturalmente infectados, foram demonstrados perfis característicos de toxoplasmose recente, crônica ou em fase de transição. Os perfis foram previamente determinados pela avaliação da evolução dos níveis de anticorpos IgG pela reação de imunofluorescência indireta. Os animais caracterizados como portadores de toxoplasmose crônica apresentaram uma %Q da absorbância de 26,32 ± 10,84. Para toxoplasmose recente a %Q da absorbância observada foi de 77,61 ± 13,89 e para o perfil de transição, 46,22 ± 11,94

Use of dried blood sample for serological diagnosis of toxoplasmosis in goats

Eluates of 183 dried caprine blood samples on filter paper were tested for anti-Toxoplasma gondii antibodies, using IFA, ELISA and dot-ELISA, and compared with results obtained by direct observations on comparable sera, usin the same tests. The results has showed that papers with dried blood can be preserved for up to 45 days at room temperature and for six months at 4°C, provided they are protected against humid conditions by using desiccating agents such as silica-gel. Comparison between serum and eluate reactions revelated 97-100% correspondance. The antibody titers remained constant throughout the study period.Foi realizada pesquisa de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em 183 amostras de sangue dessecado em papel de filtro utilizando as reações de imunofluorescência indireta ELISA e dot-ELISA, tomando como referência os resultados obtidos nos soros. A análise dos resultados demonstrou que papéis com sangue dessecado podem ser conservados por um período mínimo de 45 dias à temperatura ambiente e por seis meses a 4°C, desde que mantidos livres de umidade pela utilização de agentes dessecantes como a sílica-gel. A reprodutibilidade das reações, avaliada por meio da curva dos títulos de anticorpos no decorrer do tempo após a coleta do sangue em papéis de filtro, demonstrou uma concordância de 97 a 100% entre os resultados obtidos nos soros e eluatos. Os títulos de anticorpos permaneceram estáveis durante o período observado. Os resultados obtidos com eluato de sangue dessecado foram semelhantes na RIFI, ELISA e dot-ELISA, indicando que qualquer uma das três reações pode ser utilizada em eluatos de sangue dessecado para o diagnóstico da toxoplasmose caprina

Hemocultures for the parasitological diagnosis of human chronic Chagas' disease.

With the purpose of standardization of an hemoculture technique presenting a higher positive rate in the parasitological diagnosis of chronic Chagas’ disease in patients with reactive serology (IFT, HA, CFT) the following schedule was used. Thirty ml of venous blood was collected with heparin and the plasma was separated by centrifugation (2.000 rpm/30'). The packed cells were washed with LIT medium or PBS which was then removed by centrifugation (2.000 rpm/15’). This material was sampled in 6 screw-tubes 18x200 with 6 ml of LIT medium and incubated at 28°C. These incubated cultures at 28°C were examined after 15, 30, 45 and 60 days. When the hemoculture was not immediately processed after blood collection, the plasma was removed and the sediment enriched with LIT medium and preserved at 4°C. The Xenodiagnosis was performed according to Schenones method used here as a reference technique. Among the various groups of patients examined by both techniques the best results obtained were: 55.08% ofpositivity for hemocultures against 27.5% forxenodiagnosis (X^ = 4.54, p = 0.05), with a tubepositivity of 26.6%. Recommendation for screening trials of drug assays is the repetition of method on a same patient 2 or more times in different occasions, as used in xenodiagnosis

Epidemiologia da infecção por Toxoplasma gondii no município de Ribeirão das Neves, MG: I. importância dos animais domésticos como fonte de infecção do T. gondii para o homem

Foi realizado um estudo retrospectivo ou caso controle em uma amostra de 500 pessoas selecionadas aleatoriamente da população de Ribeirão das Neves, MG, Brasil, durante o período de junho de 1983 a janeiro de 1984, para verificar se variáveis ligadas ao contato com animais no domicílio estariam associadas a ocorrência da infecção humana por Toxoplasma gondii. Foram obtidas associações estatisticamente significativas com relação ao contato com gatos, galinhas e porcos no domicílio e nenhuma associação quanto ao consumo de carne, leite e ovos.During a six month period (June 1983 to January 1984), a case-control study was carried out to determine if the variables associated with domestic animals contact would be correlated with the prevalence of Toxoplasma gondii infection. A randomized sample of 500 subjects from the population of Ribeirão das Neves, Minas Gerais, Brazil was studied. A statistically significant correlation was found with cat, chicken and pig contact but none with consumption of meat, milk and eggs

Epidemiologia da infecção por Toxoplasma gondii no município de Ribeirão das Neves, MG: I. importância dos animais domésticos como fonte de infecção do T. gondii para o homem

Foi realizado um estudo retrospectivo ou caso controle em uma amostra de 500 pessoas selecionadas aleatoriamente da população de Ribeirão das Neves, MG, Brasil, durante o período de junho de 1983 a janeiro de 1984, para verificar se variáveis ligadas ao contato com animais no domicílio estariam associadas a ocorrência da infecção humana por Toxoplasma gondii. Foram obtidas associações estatisticamente significativas com relação ao contato com gatos, galinhas e porcos no domicílio e nenhuma associação quanto ao consumo de carne, leite e ovos