Caracterização físico-química da isoforma γ-tripsina bovina

Uma nova isoforma tripsina bovina foi purificada a partir de amostras comerciais por cromatografia de troca iônica por Sephadex SP C50®. A nova isoforma contém, além da perda do hexapeptídeo N-terminal (como encontrado na molécula progenitora β-tripsina) uma clivagem intra-cadeia entre o Lys-155 e Ser-156. A nova enzima denominada -tripsina mostrou propriedades similares com a isoforma α-tripsina que contém o mesmo número de cadeia polipeptídica (duas cadeias), massa molecular (23312 Da), estrutura secundária, volume hidrodinâmico e outros. Apesar das semelhanças estruturais e enzimáticas dessas duas isoformas, -tripsina tem uma taxa de formação inferior a partir da β-tripsina, carga superficial inferior, mas a -tripsina tem estabilidade térmica mais elevada do que a α-tripsina. Devido à facilidade de purificação das isoformas a partir de tripsina bovina de fonte comercial, e as propriedades descritas acima, esta enzima tornar-se uma alternativa interessante para a indústria de alimentos e de detergente, bem como para pesquisa de biocatalisadores.A novel bovine trypsin isoform was purified from commercial sample by ion exchange chromatography by Sephadex SP C50®. New isoform contain in addition of loss of N- terminus hexapeptide (as found in parent molecule β-trypsin) an intra-chain split between Lys-155 and Ser-156. The novel enzyme denominate gamma-trypsin showed similar properties with α-trypsin isoform in: polypeptide number chain (two chain), molecular masses (23,312 Da), secondary structure, hydrodynamic radius and others. In spite of enzymatic and structural similarities of both isoforms, -trypsin preferably has a lower rate formation from β-trypsin, a lower surface charge, but the gamma-trypsin has a higher thermal stability than α-trypsin. Due to obtaining facility of purification of bovine trypsin isoforms from commercial font, and properties described above, become this enzyme an interesting alternative for the food industry, detergent and biocatalysis research

Developing methods to compare tablet formulations of atorvastatin

Atorvastatin (ATV) is an antilipemic drug of great interest to the pharmaceutical industry. ATV does not appear in the monographs of Brazilian pharmacopoeia, and analytical methodologies for its determination have been validated. The chromatographic conditions used included: RP-18 column-octadecylsilane (250 x 4.6 mm, 5 mm), detection at 238 nm, mobile phase containing 0.1% phosphoric acid and acetonitrile (35:65% v/v), flow at 1.5 mL min-1, oven temperature at 30ºC, and injection volume of 10 mL. ATV is classified as a class II product, according to the biopharmaceutical classification system. As such, a dissolution test was proposed to evaluate pharmaceutical formulations on the market today, under the following conditions: water as a dissolution medium, 1000 mL as a volume, paddle apparatus at a rotation speed of 50 rpm, 80% (Q) in 15 minutes with UV spectrophotometer readings at 238 nm. In the pattern condition proposed as the ideal dissolution test, which appropriately differentiates amongst formulations, the generic product was not considered pharmaceutically equivalent; however, in other less differential dissolution methods, which also fall within appropriate legal parameters, this product could come to be regarded as generic.Atorvastatina (ATV) é um fármaco antilipêmico de grande interesse para a indústria farmacêutica. ATV não apresenta monografia na Farmacopéia Brasileira e metodologias analíticas para sua determinação foram validadas. As condições cromatográficas utilizadas foram: coluna RP-18-octadecilsilano (250 x 4.6 mm, 5 mm), detecção em 238 nm, fase móvel contendo ácido fosfórico 0,1% e acetonitrila (35:65% v/v), fluxo de 1,5 mL min-1, temperatura do forno de 30 ºC e volume de injeção de 10 mL. ATV é classificada como um fármaco de classe II, de acordo com o sistema de classificação biofarmacêutica (SCB). Como tal, um teste de dissolução foi proposto para avaliar as formulações farmacêuticas do mercado atual, sob as seguintes condições: água como meio de dissolução, volume de 1000 mL, aparato pá, velocidade de rotação de 50 rpm, 80% (Q) em 15 minutos com leituras espectrofotômetro UV a 238 nm. Na condição padrão proposta para o teste de dissolução, o qual seria capaz de diferenciar apropriadamente as formulações farmacêuticas, o produto genérico não foi considerado equivalente farmacêutico. No entanto, em outros métodos de dissolução menos discriminativos, que também seriam considerados apropriados pelos parâmetros legais, este produto pode vir a ser considerado como genérico

Os Aminoácidos nos Livros Didáticos de Biologia do Ensino Médio e de Bioquímica do Ensino Superior

The topic “amino acids” was analyzed in eleven textbooks of Biology for High School, approved in the National Plan of Didactic Books of 2012 and 2015, and in six Biochemistry textbooks for higher education. This particular topic allows the exemplification of pKa and Buffer systems, which is important to the understanding of structure and function of proteins and enzymes although considered hard by undergraduate students of Health Science majors. At least one problem that leads to misconceptions was identified in the Biology textbooks. On the contrary, the subject is clearly presented in the Biochemistry textbooks, although a few vices of language in the definition of the structure of amino acids”, para “in the definition of amino acids structure. A suggestion of collaborative approach that is shown to be effective in this and in related subjects is presented.O tema “aminoácidos” foi analisado em onze livros didáticos de Biologia do ensino médio aprovados no Plano Nacional do Livro Didático de 2012 e de 2015 e em seis livros textos de Bioquímica utilizados no nível superior. O tema foi escolhido por permitir a exemplificação do conceito de pKa e sistema tampão, importante no estudo de estrutura e função de proteínas e enzimas, apesar de considerado árido pelos alunos de graduação da área da Saúde. Em todos os livros de ensino médio foi identificado ao menos um problema que leva à formação de concepções alternativas. Ao contrário, nos livros de ensino superior, o assunto é abordado de forma clara apesar de terem sido identificados alguns vícios de linguagem na descrição da estrutura dos aminoácidos. Ao final, apresentamos uma sugestão de abordagem colaborativa que tem sido bastante eficaz no ensino desse e de assuntos correlatos.

Um jogo de construção para o aprendizado colaborativo de Glicólise e Gliconeogênese

The game “Glicólise e Gliconeogênese” was developed to introduce the collaborative learning of metabolic pathways to Dental School students of the Universidade Federal do Rio de Janeiro. The game starts with 11 cards with the structural formula of the glycolysis intermediates that need to be placed in the correct sequence of structural changes from glucose to pyruvic acid. After that, the students get 10 enzyme cards that indicates the reversibility (or not) of the reaction, the free energy value and activators and/or inhibitors, if this is the case. After answering questions to consolidate the content through observations of the metabolic pathway, the students get five new cards that allow the substitution of the cards need to transform glycolysis in gluconeogenesis. The evaluation by 18 students suggests that the game is a great learning strategy of metabolic pathways that can be used to others than those showed here.O jogo “Glicólise & Gliconeogênese” foi desenvolvido para auxiliar alunos do curso de Odontologia da Universidade Federal do Rio de Janeiro no aprendizado colaborativo dessas vias metabólicas. O jogo inicia com 11 cartas contendo apenas a fórmula estrutural dos intermediários da glicólise, as quais devem ser colocadas numa sequência correta de modificações estruturais, desde a glicose até o piruvato. Após completarem a via corretamente, os alunos recebem 10 cartas das enzimas, as quais indicam a reversibilidade (ou não) da reação, o valor de energia livre e os ativadores e/ou inibidores, quando for o caso. Após responderem questões de fixação do conteúdo, por meio de observações da via metabólica montada, os alunos recebem cinco novas cartas que permitem a substituição daquelas necessárias para transformar a glicólise em gliconeogênese. A avaliação por 18 alunos sugere que o jogo é uma ótima estratégia de ensino de vias metabólicas podendo ser usado para outras vias além dessas que utilizamos

Vídeos educacionais de curta duração para o ensino de Bioquímica

Short length educational videos (up to 5 min) of varied contents, are being created in the Laboratório de Biocalorimetria (LaBioCal) do IBqM/UFRJ and posted in the YouTube channel “Tempo de Ciência” do YouTube. The videos are created using PowToon over the audio previously recorded at Audacity, both freeware tools. The videos are being applied to students of Biology (Major in Teaching) from CEDERJ and are available to the general public. Therefore, the videos presented around 200 to 400 views by the time of this subscription. The purpose of this study is the introduction of a subject that should be viewed before the theoretical class but, also, to allow the viewing after the class as a revision tool of the subjects. The advantages of a short length video is to allow a better assimilation, as the viewer can keep its attention, as well as a continued revision of the subject since it is possible to pause and continue on its own time. This educational tool had great acceptance from the students as observed by spontaneous reports sent by e-mail.Vídeos educacionais de curta duração (até 5 minutos), de conteúdos distintos, estão sendo criados no Laboratório de Biocalorimetria (LaBioCal) do IBqM/UFRJ e depositados no canal “Tempo de Ciência” do YouTube (https://www.youtube.com/playlist?list=PLJO7zS-49NtHJXZr1zpunle40HxKb3BEz). Os vídeos estão sendo criados com a ferramenta PowToon com áudio previamente gravado pelo programa Audacity, ambos na versão livre. Os vídeos são utilizados, atualmente, pelos alunos do curso de Licenciatura em Ciências Biológicas do CEDERJ e estão disponíveis ao público em geral. Devido a uma atualização dos mesmos, a publicação foi refeita recentemente, levando o contador a reiniciar a contagem de visualizações. Dessa forma, os vídeos têm de cerca de 200 a 400 visualizações no momento desta inscrição. O objetivo é introduzir um tema que deve ser visualizado antes da aula teórica mas, também, permitir a visualização do mesmo após a aula, como uma forma de revisão do conteúdo. As vantagens de um vídeo de curta duração é a de permitir melhor assimilação, já que o espectador mantém sua atenção, e revisão contínua, já que o espectador tem o domínio das pausas e continuidades que ocorrem a seu tempo. A aceitação dessa ferramenta educacional pelos alunos tem sido muito grande, como observado em relatos espontâneos enviados por email.  Uma avaliação formal está sendo feita por um formulário online (em andamento)