The sperm epigenome : its relationship with sperm and in vitro fertilization parameters in humans and its effect on offspring in mice

Al hablar de herencia podemos hablar de eventos transgeneracionales para hacer referencia a alteraciones del fenotipo de los organismos como consecuencia de la exposición de los progenitores al ambiente. Estos eventos están siendo ampliamente estudiados tanto en machos como en hembras con el fin de evaluar cómo el ambiente actúa sobre las generaciones futuras. Sin embargo, principalmente se basan en el estudio de la transferencia materna a la descendencia y poco se sabe de cómo el ambiente, actuando a través de los padres, puede influir en los hijos. Se ha reportado que las marcas epigenéticas del espermatozoide están implicadas en la funcionalidad del cigoto post-fecundación y que pueden contribuir al desarrollo embrionario. En particular, en este trabajo de tesis se plantearon dos objetivos principales: (1) evaluar en el modelo murino, el efecto del consumo paterno de etanol sobre la línea germinal y el epigenoma espermático y cómo estas posibles variaciones generan daños a la salud reproductiva de la descendencia masculina y, (2) evaluar cómo las variaciones en las marcas epigenéticas de los espermatozoides pueden alterar el éxito de las técnicas de reproducción asistida (TRA) en el modelo humano. En primer lugar, encontramos que el consumo paterno de etanol podría provocar cambios histológicos y epigenéticos, así como también daños en la integridad del DNA en la línea germinal testicular y en los espermatozoides. Estas alteraciones dieron lugar a cambios testiculares y espermáticos en la descendencia. En segundo lugar, observamos que las modificaciones epigenéticas analizadas en el modelo humano se correlacionaron con la calidad espermática y con diferentes indicadores de éxito en las TRA. En conjunto, los resultados descritos en esta Tesis aportan nuevos conocimientos de la herencia epigenética por parte del padre a la descendencia, tanto a nivel embrionario como adulto. Estos resultados podrían resultar fundamentales para dar a conocer la importancia de la exposición ambiental sobre los hombres, previo a la concepción y los efectos de dicha exposición sobre la descendencia.When speaking of inheritance, we can speak of transgenerational events to refer to alterations in the phenotype of the organisms as a consequence of the exposure of the parents to the environment. These events are being widely studied in both males and females in order to evaluate how the environment acts on future generations. However, they are mainly based on the study of the maternal transfer to the offspring and little is known about how the environment, acting through the parents, can influence the children. Sperm epigenetic markings have been reported to be involved in post-fertilization zygote functionality and may contribute to embryonic development. In particular, in this thesis work, two main objectives were proposed: (1) to evaluate in the murine model, the effect of paternal ethanol consumption on the germ line and the sperm epigenome and how these possible variations generate damage to the reproductive health of male offspring and, (2) evaluate how variations in sperm epigenetic markings can alter the success of assisted reproductive techniques (ART) in the human model. First, we found that paternal ethanol consumption could cause histological and epigenetic changes, as well as damage to DNA integrity in the testicular germ line and sperm. These alterations gave rise to testicular and sperm changes in the offspring. Second, we observed that the epigenetic modifications analyzed in the human model were correlated with sperm quality and with different indicators of success in ART. Together, the results described in this Thesis provide new knowledge of epigenetic inheritance by the father to the offspring, both at the embryonic and adult levels. These results could be essential to raise awareness of the importance of environmental exposure on men prior to conception and the effects of such exposure on offspring.Fil: Cambiasso, Maite Yael. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Murine sperm capacitation, oocyte penetration and decondensation following moderate alcohol intake

Male chronic alcohol abuse causes testicular failure and infertility. We analyzed the effects of moderate sub-chronic alcohol intake on sperm morphology, capacitation, fertilization and sperm head decondensation. CF-1 male mice were administered 15% ethanol in drinking water for 15 days; control mice received ethanol-free water. Similar patterns of tyrosine phosphorylation were observed in capacitated spermatozoa of control and treated males. Percentage of hyperactivation (H) and spontaneous (SAR) and progesterone-induced (IAR) acrosome reaction significantly decreased at 120 and 150min of capacitation in treated males compared to controls (H: 14.1±2.5 vs 23.7±2.6, P<0.05; SAR-T120min: 17.9±2.5 vs 32.9±4.1, P<0.01; IAR-150min: 43.3±3.5 vs 73.1±1.1, P<0.001, n=6). During in vitro fertilization (2.5, 3.5 and 4.5h post-insemination), there was an increased percentage of fertilized oocytes (with a decondensed sperm head and one or two pronuclei) in treated males (P<0.001, n=7). After 60min of in vitro decondensation with glutathione plus heparin, the percentage of decondensed sperm heads was significantly higher in treated males than in controls (mean±s.d.: 57.1±5.6 vs 48.3±4.5, P<0.05, n=5). The percentage of morphologically normal sperm heads was significantly decreased in treated males with respect to controls (P<0.001, n=9). These results show that short-term moderate alcohol consumption in outbred mice affect sperm morphology, hyperactivation, acrosomal exocytosis, and the dynamics of in vitro fertilization and in vitro sperm nuclear decondensation.Fil: Sanchez, Melisa Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fontana, Vanina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Galotto, Camila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Cambiasso, Maite Yael. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Sobarzo, Cristian Marcelo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Calvo, Lucrecia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Cebral, Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentin

El espermatozoide: algo más que un paquete de lujo para entregar DNA

Durante la formación del espermatozoide, en la última etapa de la espermatogénesis, llamada espermiogénesis, hay un recambio de histonas por protaminas (P1 y P2). Estas proteínas básicas empaquetan la cromatina modificando los nucleosomas por estructuras de toroides. Esto significa una condensación mucho mayor que la de una célula somática, haciendo esta cromatina transcripcionalmente inactiva, pero mucho más resistente a daños físicos y por especies reactivas de oxígeno. Luego de la penetración del espermatozoide al ovocito, el primer paso hacia la formación del pronúcleo masculino es la descondensación de esta cromatina. Este proceso se lleva a cabo con la acción del glutatión que reduce los puentes disulfuro intra e inter protaminas, como también de una molécula con alta carga negativa que permite el remplazo de las protaminas por las histonas ovocitarias. Hemos estudiado este proceso y demostrado que esa molécula es el heparán sulfato ovocitario. También estudiamos el papel de otro glicosaminoglicano con cierta capacidad descondensante, el dermatán sulfato, en espermatozoides de donantes y pacientes, en particular con respecto a la proporción de protaminas presentes en esos núcleos, demostrando una relación P1/P2 disminuida y con posibilidad de impactar en la descondensación diferencial usando dermatán sulfato o heparina (como equivalente molecular del heparán sulfato, por similitud de estructura, carga y potencia descondensante).Fil: Cambiasso, Maite Yael. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Galotto, Camila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Sanchez , María Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fontana, Vanina Andrea. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Piñeiro, Lucrecia. Universidad Favaloro. Facultad de Medicina; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Romanato, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentin

Paternal alcohol consumption has intergenerational consequences in male offspring

Purpose: Alcoholism is a heterogeneous set of disorders caused by ethanol intake. Harmful effects of paternal consumption on the offspring are poorly explored and not fully understood. We analyzed the effect of paternal alcohol consumption on both their own reproductive capacity and that of their male offspring. Methods: We used a model of ethanol consumption (15% v/v in drinking water) for 12 days in adult CF-1 male mice. DNA integrity and post-translational modifications of histones were assessed in sperm; testicular weight, histology, and DNA fragmentation were analyzed. Treated or untreated male mice were mated with non-treated females to obtain two cell embryos that were cultured for 7 days; morphology and embryonic cell death were evaluated. Males of both groups were mated with non-treated females. Adult male offspring was euthanized, and sperm and testicular parameters determined. Results: Paternal ethanol consumption caused histological and epigenetic changes, as well as damage in DNA integrity in the testicular germline and sperm. These alterations gave rise to deleterious effects on embryonic development and to testicular and spermatic changes in the offspring. Conclusion: This study provides critical information on reproductive disturbances brought about by paternal alcohol consumption and the profound impact these could have on the male progeny. The need to explore the effects of paternal alcohol consumption in detail and warn about the importance of controlling alcohol intake for the well-being of future generations should not be underscored.Fil: Cambiasso, Maite Yael. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Gotfryd, Lucila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Stinson, Marcelo Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Birolo, Sol Camila. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Salamone, Gabriela Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Romanato, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Fontana, Vanina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentin

Human sperm decondensation in vitro is related to cleavage rate and embryo quality in IVF

Purpose: To investigate whether the ability of human spermatozoa to decondense in vitro in the presence of heparin (Hep) and glutathione (GSH) is related to assisted reproduction (ART) success. Methods: Cross-sectional pilot study involving male partners of 129 infertile couples undergoing ICSI with (45) or without (84) donor oocytes at two infertility clinics in CABA, Argentina, between October 2012 and December 2013. In vitro decondensation kinetics with Hep and GSH and DNA fragmentation (TUNEL) were determined on the same sample used for ICSI. The possible relationship of decondensation parameters (maximum decondensation and decondensation velocity) and TUNEL values with ART success was evaluated. Results: Embryo quality correlated positively with decondensation velocity (D60/D30) (Spearman?s correlation, p < 0.05). According to D60/D30 values, patients were classified as slow decondensers (SlowD) (n = 68) or fast decondensers (FastD) (n = 61). Embryo quality was better in FastD (unpaired t test, p < 0.05). FastD and SlowD were subdivided according to use of donor oocytes. Among SlowD, biochemical and clinical pregnancy rates per transfer were significantly higher in donor (n = 19) vs. in non-donor (n = 31) cycles (Fisher?s exact test, p < 0.05). TUNEL values were not related to embryo quality, but no clinical pregnancies or live births were achieved in TUNEL+ SlowD (n = 7). Conclusion: Decondensation kinetics of human spermatozoa in vitro with Hep and GSH could be related to embryo quality and ART success.Fil: Galotto, Camila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Cambiasso, Maite Yael. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Julianelli, Vanina Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Procrearte; ArgentinaFil: Rey Valzacchi, Gaston Javier. Procrearte; Argentina. Hospital Italiano; ArgentinaFil: Rolando, R. N.. Hospital Italiano; ArgentinaFil: Rodriguez, M. L.. Hospital Italiano; ArgentinaFil: Calvo, L.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Romanato, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentin

Limited contextual memory and transcriptional dysregulation in the medial prefrontal cortex of mice exposed to early protein malnutrition are intergenerationally transmitted

Memory contextualization is vital for the subsequent retrieval of relevant memories in specific situations and is a critical dimension of social cognition. The inability to properly contextualize information has been described as characteristic of psychiatric disorders like autism spectrum disorders, schizophrenia, and post-traumatic stress disorder. The exposure to early-life adversities, such as nutritional deficiency, increases the risk to trigger alterations in different domains of cognition related to those observed in mental diseases. In this work, we explored the consequences of exposure to perinatal protein malnutrition on contextual memory in a mouse model and assessed whether these consequences are transmitted to the next generation. Female mice were fed with a normal or hypoproteic diet during pregnancy and lactation. To evaluate contextual memory, the object-context mismatch test was performed in both sexes of F1 offspring and in the subsequent F2 generation. We observed that contextual memory was altered in mice of both sexes that had been subjected to maternal protein malnutrition and that the deficit in contextual memory was transmitted to the next generation. The basis of this alteration seems to be a transcriptional dysregulation of genes involved in the excitatory and inhibitory balance and immediate-early genes within the medial prefrontal cortex (mPFC) of both generations. The expression of genes encoding enzymes that regulate H3K27me3 levels was altered in the mPFC and partially in sperm of F1 malnourished mice. These results support the hypothesis that early nutritional deficiency represents a risk factor for the emergence of symptoms associated with mental disorders.Fil: Fesser, Estefanía Aylén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Gianatiempo, Octavio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Berardino, Bruno Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Ferroni, Nadina Micol. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Cambiasso, Maite Yael. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Fontana, Vanina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Sonzogni, Silvina Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Cánepa, Eduardo César. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. 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Paternal short alcohol consumption impairs the offspring health in mice

Previously, we observed that male alcohol consumption delayed embryodifferentiation by deregulating peri-implantation events and altering embryo trophoblastand inner cell mass morphology in vitro.Objective: To evaluate the effects of paternal alcohol consumption on theoffspring in mice. Methods: CF-1 male mice were exposed (treated group) ornot (control group) to 15% (v/v) ethanol in drinking water ad libitum for 15 days. Control and treated males were mated withnon-treated CF-1 females (1:1), and pregnant females (vaginal plug: day1) were determined.Pregnancy outcome was evaluated and litter mortality, weight and size registered.Blood from adult offspring was analyzed in a Coulter counter. Then, they weresacrificed and dissected. Offspring´s spleen was weighed and analyzedhistologically. Spleen cell populations were determined by flow cytometry. Results:After 21 days of pregnancy, born mice from both groups were registered and, duringthe first week after birth, an increased number of deaths from treated group(p<0.001) were observed, when compared to control group. We found lessactivity and poor fur in those pups from treated vs. control groups, inaddition to an alteration in offspring?s weight. We performed a complete bloodanalysis in both groups and observed that platelet count was higher (p<0.05)and lymphocyte count was lower (p<0.05) in treated vs control groups. Besides,spleen CD19 population was increased (p<0.05) and CD8 and CD11b weredecreased in treated group vs controls (p<0.05 for both determinations). Thespleen histopathological analysis showed a follicular lymphoid hyperplasia ofwhite pulp. Conclusion: The paternal consumption of alcohol for a short periodin mice, affects the offspring?s health since we observed an alteration in theweight of the spleen and cell populations, probably causing a decrease in thesurvival of the litters in the first week of life.Fil: Gotfryd, Lucila. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Stinson, Marcelo Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Vermeulen, Elba Monica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Alcain, Julieta María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Vanzulli, Silvia. Academia de Medicina. Instituto de Estudios Oncológicos; ArgentinaFil: Cambiasso, Maite Yael. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Naguila, Zaira Soledad. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Erlejman, Alejandra Giselle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Calvo, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Salamone, Gabriela Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fontana, Vanina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaInternational Federation of Placenta AssociationsCiudad Autónoma de Buenos AiresArgentinaInternational Federation of Placenta AssociationsSociedad de Obstetricia y Ginecología de Buenos AiresSociedad Argentina de BiologíaSociedad Argentina de Investigación Bioquímica y Biología MolecularSociedad Argentina de DiabetesSociedad Argentina de Endocrinología Ginecológica y ReproductivaSociedad Argentina de Investigación Clínic