Modulation of cathelicidins, IFNβ and TNFα by bovine alpha-herpesviruses is dependent on the stage of the infectious cycle

Production of antimicrobial peptides cathelicidins, interferons and cytokines is an important feature in airway epithelial host defense. The innate immune response to alpha-herpesvirus infection at the sites of primary replication has not been fully studied. Thus, the aim of this study was to determine the expression of innate immune components, cathelicidins, IFNβ, TNFα and TNF receptors (TNFRI and TNFRII) during acute infection and reactivation of bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) in the respiratory tract and lymphoid tissue of their natural host. We found that BoHV infection modulates mainly the expression of BMAP28, a key cathelicidin in cattle. It was downregulated by both viruses in retropharyngeal lymph nodes of acutely infected-calves, and it was accompanied by a lower expression of IFNβ, TNFα and TNFRI. BoHV-5 showed a pronounced role in the downregulation of BMAP28, even in nasal mucosa and lung. However, during reactivation, BoHV-5 upregulated both BMAP28 and IFNβ in retropharyngeal lymph nodes. Acute replication induced also TNFα mRNA and protein synthesis, and expression of TNFRI and II was positively regulated during both acute infection and reactivation, particularly in the trachea. Moreover, BMAP27 was detected during BoHV-1 reactivation suggesting a potential role at this stage. Thus, cathelicidins are implicated in alpha-herpesvirus infections of the bovine respiratory system and the response is distinct during BoHV-1 and BoHV-5 acute infection and reactivation. This demonstrates that these viruses modulate differentially the components of innate immune response, possibly influencing their pathogenesis. This study provides an initial pilot analysis of factors that might be implicated in alpha-herpesvirus infection of the bovine respiratory systemEEA BalcarceFil: Burucúa, Mercedes María. INTA, Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Agencia de Extensión Rural Tandil; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Quintana, Silvina. Fil: Quintana, Silvina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Centro de Investigación en Abejas Sociales; Argentina.Fil: Lendez, Pamela Anahí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina.Fil: Cobo, Eduardo Rubén. University of Calgary. Faculty of Veterinary Medicine; Canada.Fil: Ceriani, Maria Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina.Fil: Dolcini, Guillermina Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina.Fil: Odeón, Anselmo Carlos. INTA, Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Pérez, Sandra Elizabeth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina.Fil: Marin, Maia Solange. INTA, Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina

Transplacental infection by bovine alphaherpesvirus type 1 induces protein expression of COX-2, iNOS and inflammatory cytokines in fetal lungs and placentas

Bovine alphaherpesvirus type 1 (BoAHV-1) is associated with respiratory and reproductive syndromes. Until present the immunologic mechanisms involved in BoAHV-1 abortion are partially known. We studied key elements of the innate immune response in the placentas and fetal lungs from cattle experimentally-inoculated with BoAHV-1. These tissues were analyzed by histopathology. Furthermore, virus identification was performed by qPCR and the expression of the inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor-alpha, interleukin 1-alpha and inflammatory mediators like inducible nitric oxide synthase and cyclooxeganse-2 was evaluated by immunohistochemistry. The viral transplacental infection was confirmed by the detection of BoAHV-1 by qPCR in the placenta and fetal organs, which revealed mild inflammatory lesions. Inducible nitric oxide synthase immunolabelling was high in the lungs of infected fetuses and placentas, as well as for tumor necrosis factor-alpha in the pulmonary parenchyma and cyclooxeganse-2 in fetal annexes. However, the expression of interleukin 1-alpha was weak in these organs. To our knowledge, this is the first study that provides strong evidence of an early immune response to BoAHV-1 infection in the conceptus. Advances in the knowledge of the complex immunological interactions at the feto-maternal unit during BoAHV-1 infection are needed to clarify the pathogenesis of abortion.Fil: Burucúa, Mercedes María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Risalde, María A.. Universidad de Córdoba; EspañaFil: Cheuquepán Valenzuela, Felipe Andrés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Quintana, Silvina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones en Sanidad Producción y Ambiente. - Comisión de Investigaciones Científicas de la Provincia de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones en Sanidad Producción y Ambiente; ArgentinaFil: Perez, Sandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Canton, German. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Moore, Dadin Prando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Odeón, Anselmo C.. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Cs.agrarias. Departamento de Producción Animal; ArgentinaFil: Agulló Ros, Irene. Universidad de Córdoba; EspañaFil: Scioli, Maria Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Barbeito, Claudio Gustavo. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Histología y Embriología Descriptiva, Experimental y Comparada; . Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; ArgentinaFil: Morrell, Eleonora Lidia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Marin, Maia Solange. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentin

Reactivation and foetal infection in pregnant heifers infected with neospora caninum live tachyzoites at prepubertal age

Neospora caninum is recognised for causing cattle abortion, provoking severe economic losses in the livestock industry worldwide. The aim of the present study was to evaluate the reactivation and foetal infection in pregnant heifers inoculated with live N. caninum tachyzoites before puberty. A total of 15 30-month-old pregnant heifers were allocated into four groups: animals inoculated with live tachyzoites of NC-Argentina LP1 isolate before puberty and challenged with live tachyzoites of NC-1 strain at 210 days of gestation (DG) (Group A); animals mock inoculated before puberty and challenged with NC-1 strain at 210 DG (Group B), animals inoculated before puberty but not subsequently challenged (Group C); and noninfected and nonchallenged animals (Group D). The results of this study showed that 100% of animals infected before puberty (Groups A and C) suffered reactivation of the infection at the seventh month of gestation. In addition, in three and two calves from Groups A and C, respectively, congenital infection was confirmed. Interestingly, we provide evidence that the use of live N. caninum tachyzoites in young animals as a strategy to induce protection is neither safe nor effective.EEA BalcarceFil: Hecker, Yanina Paola. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Burucúa, Mercedes. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Fiorani, Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Fiorani, Franco. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Maldonado Rivera, Jaime. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Maldonado Rivera, Jaime. Universidad de Cuenca. Facultad de Ciencias Agropecuarias; Ecuador.Fil: Cirone, Karina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Cirone, Karina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Dorsch, Matías. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Dorsch, Matías. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria (INIA). Estación Experimental La Estanzuela; UruguayFil: Cheuquepán Valenzuela, Felipe. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Campero, Lucía. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Cantón, Germán José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Marín, Maia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Ortega Mora, Luis. Universidad Complutense de Madrid. Facultad de Ciencias Veterinarias; EspañaFil: Moore, Dadin Prando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina

Expresión de interferón lambda 3 en tejido nervioso durante la latencia y reactivación de terneros infectados con alfaherpesvirus bovinos tipos 1 y 5

Los alfaherpesvirus bovinos (BoHV) tipo 1 y 5 son virus neurotrópicos. El BoHV-5 ocasiona meningoencefalitis en terneros y el BoHV-1 solo ocasionalmente causa encefalitis. El ciclo de infección de los alfaherpesvirus se caracteriza por etapas de infección aguda, latencia y reactivación, siendo el ganglio trigémino (GT) el principal sitio de latencia. La reactivación del virus latente conduce a la transmisión y diseminación del mismo. El interferón (IFN) lambda (λ) fue recientemente identificado. Al igual que el IFN tipo I, IFNλ induce un estado antiviral, aunque no existe información respecto a su rol en la infección por BoHV. Estudios preliminares demostraron niveles elevados de expresión de IFNλ3 en corteza cerebral y GT de terneros en la etapa aguda de infección con BoHV-5 y BoHV-1, respectivamente, en concordancia con los sitios de mayor replicación de cada virus. El objetivo de este estudio fue determinar y comparar los niveles de expresión del IFNλ3 en sistema nervioso central (SNC) y GT de terneros experimentalmente infectados con BoHV-1 o BoHV-5 durante la latencia y reactivación. Para este estudio se inocularon terneros intranasalmente con 10^3 DICC50/ml de la cepa Cooper de BoHV-1 (n=4) o de la cepa 97/613 de BoHV-5 (n=4) para inducir una infección latente, realizándose la eutanasia de 2 terneros de cada grupo durante esta etapa a los 24 días post-infección (dpi). A los animales restantes se les inició un tratamiento con dexametasona (DEX) a los 21 dpi para inducir la reactivación. La eutanasia se realizó a los 25 dpi, 48 horas luego de la última dosis de DEX. Se contó con dos animales controles sin infectar, uno de los cuales también recibió tratamiento con DEX y se realizó la eutanasia a los 24 y 25 dpi, de acuerdo a los grupos infectados. Se obtuvieron muestras de corteza cerebral olfatoria, frontal y posterior, médula oblonga y GT y se analizó la expresión de IFNλ3 mediante RT-qPCR. Durante la latencia, la expresión de IFNλ3 incrementó (p≤0,05) en todas las áreas de SNC evaluadas y GT con respecto a los tejidos control. Esto fue particularmente evidente en GT infectado con BoHV-1 y corteza anterior y médula cervical de animales infectados con BoHV-5. Por el contrario, la reactivación de ambos virus inhibió la expresión de IFNλ3 (p≤0,05), excepto en GT donde IFNλ3 solo fue detectable en los terneros infectados y no en los terneros control. Al igual que en la infección aguda, la expresión de IFNλ3 coincide con los sitios preferenciales de replicación de cada virus y es probable que refleje la respuesta innata del hospedador que restringiría la replicación viral inicial hasta el establecimiento de latencia. La reactivación del virus contrarrestaría esta respuesta en SNC, propiciando su excreción y diseminación. La detección de los niveles de expresión de los IFNλ1 y 2 será necesaria para obtener un análisis global de la respuesta mediada por IFNλ en el tejido nervioso bovino.Fil: Marin, Maia Solange. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rosales Hurtado, Juan José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Burucúa, Mercedes María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Perez, Sandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaXV Congreso Argentino de Microbiología; V Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos; V Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos y XIV Congreso Argentino de Microbiología GeneralCiudad Autónoma de Buenos AiresArgentinaAsociación Argentina de Microbiologí

Infection by bovine alphaherpesvirus types 1 and 5 induces IFN-λ3 expression in neuronal-type cells and bovine neural tissues

Type III interferons (IFNs) are components of the innate immunity, with IFN lambda- (λ)3 having the most potent bioactivity in humans. IFN-λ has a predominant role in epithelial cells. However, antiviral function in certain infections of the central nervous system has also been demonstrated. IFN-λ3 expression in neural tissues of cattle has not been investigated. Thus, the aim of this study was to analyze whether an antiviral IFN-λ3 response is mounted after infection with bovine alphaherpesviruses (BoHV-1 and BoHV-5) in vitro, in neuronal-type cells, and in neural tissues from experimentally-infected calves. This study demonstrated that there is a strong IFN-λ3 response early after BoHV-1infection of undifferentiated neuroblastoma cells. During acute BoHV-1 and BoHV-5 infection of calves, low levels of IFN-λ3 expression were detected in the brain, which would favor virus spread within this tissue. Striking differences in the transcriptional levels of IFN-λ3 were observed in trigeminal ganglion, particularly in BoHV-1-acutely- and latently-infected calves. During reactivation, IFN-λ3 expression was down-regulated, which may be a requirement for virus replication and spread. Overall, different patterns of IFN-λ3 expression were detected during BoHV-1 and BoHV-5 infection, particularly during latency.Fil: Rosales Hurtado, Juan José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Nieto Farías, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Burucúa, Mercedes María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Marin, Maia Solange. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Perez, Sandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Implicancia del factor de necrosis tumoral alfa (TNFα) en la respuesta inflamatoria desencadenada por alfaherpesvirus en el sistema Nervioso de terneros infectados experimentalmente

Los herpesvirus bovinos tipo 1 (BoHV-1) y 5 (BoHV-5) son dos alfa-herpesvirus estrechamente relacionados. El BoHV-5 es el principal agente causal de encefalitis viral en terneros, mientras que el BoHV-1 solo la produce ocasionalmente. TNFα es un factor crítico en la respuesta pro-inflamatoria contra distintos patógenos. Sin embargo, su rol en la neuropatogenia de BoHV no ha sido estudiado. El objetivo de este trabajo fue determinar las variaciones en la expresión de TNFα en el sistema nervioso de terneros infectados experimentalmente con BoHV-1 o 5 durante la infección aguda [6 días post-infección (dpi)], latencia (24 dpi) y reactivación (mediante inmunosupresión con dexametasona, 25 dpi). Se utilizaron 2 animales infectados con BoHV-1 o 5 durante cada etapa del ciclo infeccioso y 2 como control. A partir de corteza olfatoria, frontal y posterior, médula cervical y ganglio trigémino (GT) se determinó la expresión génica de TNFα mediante RT-qPCR, utilizando el gen GAPDH como control. El ARNm de TNFα fue detectado en la mayoría de las muestras evaluadas. La infección aguda con BoHV-1 indujo un incremento de 3,6 veces (p<0,05) en la expresión de TNFα tanto en corteza frontal como posterior. Durante la latencia de este virus, sólo se observó una modulación en la médula cervical (0,6 veces, p<0,05), mientras que la reactivación de BoHV-1 indujo una disminución en la expresión génica de esta citoquina en la corteza olfatoria (0,4 veces) con respecto a los animales control y una sobreexpresión en corteza posterior (60,4 veces). Con respecto a BoHV-5, tanto la infección aguda como la reactivación de este virus modularon positivamente la expresión de TNF en sistema nervioso central y GT. Este incremento durante el pico de infección aguda se observó en la corteza frontal (3 veces) y particularmente en GT (129 veces), mientras que la reactivación de BoHV-5 indujo su expresión en corteza posterior (49,1 veces) y también en GT, sitio en el cual la transcripción de TNF fue detectada solo en terneros infectados y no en terneros control. Los hallazgos descriptos en este trabajo demuestran una modulación diferencial de la expresión de TNFα durante las infecciones con dos alfaherpesvirus bovinos relacionados. La inducción de esta citoquina en presencia de virus activo, particularmente de BoHV-5, podría relacionarse con la mayor respuesta inflamatoria y lesiones inducidas por este virus durante la respuesta inmune desencadenada en sistema nervioso. Trabajos previos han demostrado un aumento exacerbado en la expresión de receptores innatos (TLRs), así como de moléculas inmunomoduladoras y otras citoquinas (BMAP28 e IFNβ) durante la infección por BoHV-5, posiblemente reflejando la respuesta innata en tejido nervioso para contener la infección, asociada a la eliminación viral temprana. La comprensión del proceso inflamatorio en las infecciones hespesvirales sería útil para generar herramientas que mejoren las estrategias preventivas y terapéuticas.Fil: Burucúa, Mercedes María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Rosales Hurtado, Juan José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Perez, Sandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Odeón, Anselmo Carlos. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Marin, Maia Solange. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaXV Congreso Argentino de Microbiología; V Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos; V Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos y XIV Congreso Argentino de Microbiología GeneralCiudad de Buenos AiresArgentinaAsociación Argentina de Microbiologí

Microscopic lesions and modulation of gene expression in cervical medulla during BoAHV-1and BoAHV-5 infection: A mini-review

Bovine herpesvirus (BoAHV) types 1 and 5 are closely-related neurotropic alpha-herpesviruses. BoAHV-1 generally causes respiratory and genital disease but can occasionally cause encephalitis. BoAHV-5 is the causative agent of non suppurative meningoencephalitis in calves. During neuroinvasion, both viruses reach the central and peripheral nervous system. While brain alterations are well-described, the changes that occur in the medulla have not been fully detailed. In this work, we integrated and analyzed the virological findings, the microscopic lesions and the changes that occur in the expression of genes related to the innate immunity, cell cycle and apoptosis in the cervical medulla of calves experimentally-infected with BoAHV-1 and BoAHV-5. This will contribute to the understanding of the differential neuropathogenesis of these alpha-herpesviruses of cattle.EEA BalcarceFil: Marin, Maia Solange. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Rensetti, D. Center for Women's Infectious Disease Research-Washington University School of Medicine. Department of Molecular Microbiology; Estados Unidos.Fil: Burucúa, María Mercedes. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Rosales, J.J. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina.Fil: Martínez Cuesta, L. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina.Fil: Pérez, S. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina

Cathelicidin bovine myeloid antimicrobial peptide (BMAP) 28 is involved in the inflammatory response against alpha-herpesviruses in the bovine nervous system

The role of the local innate immune response in the neuropathogenesis of bovine herpesvirus (BoHV) type 1 and 5 remains largely unknown. This study determined the gene transcriptional expression of relevant bovine cathelicidins, TNFα and IFNβ in the nervous system of experimentally-infected cattle during the different stages of BoHV-1 and BoHV-5 infectious cycle. We studied the modulation of bovine myeloid antimicrobial peptide (BMAP) 27 and 28 by alpha-herpesviruses during acute infection of the central nervous system (CNS). However, BMAP 28 was the main cathelicidin modulated.. BoHV-5 supressed BMAP28 expression mainly in frontal cortex and cervical medulla whereas BoHV-1 slightly induced the expression of cathelicidins in the olfactory and posterior cortex. The differences in the regulation of the innate response are likely related to distinct replication rates of both alpha-herpesviruses in the CNS. During latency and reactivation, BoHV-1 and -5 decreased BMAP28 and BMAP27 expression, accompanied by high levels of TNFα and IFNβ transcripts in the posterior brain region and medulla during BoHV reactivation. In terms of cytokines, a remarkably overexpression of IFNβ was induced by BoHV-5 (133.8-fold). In trigeminal ganglion (TG) both alpha-herpesviruses induced cathelidicins gene expression at all stages of the infection cycle, while only acute BoHV-5 infection increased TNFα (129-fold) mRNA levels. This study suggests that the pronounced downregulation of BMAP28 in BoHV-5-acutely-infected CNS is due to a decreased immune stimulation during viral infection, favouring its establishment in the CNS with a low replication rate until latency. Thus, cathelicidins, together with IFNβ and TNFα, are differentially regulated by BoHV-5 and BoHV-1 infections and this regulation is dependent on the stage of virus infection in the bovine nervous system.Fil: Burucúa, Mercedes María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Perez, Sandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Odeón, Anselmo Carlos. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Cobo, Eduardo Ruben. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. University of Calgary; CanadáFil: Quintana, Silvina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Marin, Maia Solange. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentin

Differential expression of cyclins mRNA in neural tissues of BoHV-1- and BoHV-5- infected cattle

Bovine alphaherpesvirus types 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) are closely related alphaherpesviruses. BoHV-5 causes non-suppurative meningoencephalitis in calves. BoHV-1 is associated with several syndromes and, occasionally, can cause encephalitis. Although both viruses are neurotropic and they share similar biological properties, it is unknown why these alphaherpesviruses differ in their ability to cause neurological disease. Neural tissue samples were collected from BoHV-1- and BoHV-5-intranasally inoculated calves during acute infection, latency and reactivation and the levels of cyclins mRNA expression were analyzed by qRT-PCR. Striking differences in the levels of cyclins mRNA were particularly detected in trigeminal ganglion (TG). The expression levels of cyclins in TG during BoHV-5 latency suggest that these viruses utilize different strategies to persist in the host. It is apparent that a relationship between virus loads and cyclin mRNA levels can be established only during acute infection and other factors might be involved in the regulation of cell cycle components during BoHV latency and reactivation. Bovine alphaherpesviruses neuropathogenicity might be influenced by the differential control of cell cycle components by these herpesviruses. This is the first report on BoHV-5 modulation of cyclins expression in neural tissues from its natural host.Fil: Marin, Maia Solange. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Burucúa, Mercedes María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Rensetti, Daniel Ernesto. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Rosales Hurtado, Juan José. Ministerio de Ciencia, Tecnología e Innovación Productiva. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica. Fondo para la Investigación Científica y Tecnológica; ArgentinaFil: Odeón, Anselmo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Pérez, Sandra. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentin

Apoptosis and host-defense peptide cathelicidins determine different outcomes of bovine Alpha-herpesviruses neuropathogenesis

Alpha-herpesvirusesare closely related virusesthat cause neuro¬logical disease in humans and cattle. Bovine herpesvirus (BoHV) type 5 is an important cause of encephalitis in cattle. How-ever, encephalitis by BoHV-1 occurs occasionally. It is unknown how the innate immune re-sponse contri¬butes to their differences inneuro¬patho¬genesis. BoHV-5 spe¬ci¬fically induced the ex¬pression of Toll-like receptors (TLRs) in bovine neural inflamed tissue (Marin et al., 2014). Antimicrobial cathelicidin peptides modulateTLR4 expression in epithelial cells although their function in the nervous system remains elusive. These innate factors together with specific BoHV-apoptotic potential could be determinant in the neuropathogenesis as they could promote or limit the inflammatory response. In this study, we determined apoptosis and the expression of cathelicidins in thebovine nervous system during BoHV-1 and 5acute infections. Calves were inoculated with BoHV-1 Cooper or BoHV-5 97/613 strains (106.3 TCID50) or inert culture medium (control). At 6 days post-infection (dpi), different regions of central nervous system (CNS) and trigeminal ganglion (TG)were collected for immunocytochemical detection of cleaved caspase 3 and messenger gene determination of bovine cathelicidins BMAP27 and BMAP28 (RT-qPCR). At 6 dpi, caspase 3-apoptotic neurons were detected in the TG of BoHV-1-infected calves, whereas fewer numbers of caspase 3 positive neurons were observed in BoHV-5-infected calves. Cathelicidins expression was up- and down-regulated in CNS from BoHV-1- and BoHV-5-infected calves, respectively. BMAP27 was noticeably up-regulated in TG from BoHV-1-infected calves, while BMAP28 was only detected in BoHV-5-infected calves. Our find-ings suggest that modulation of apoptosis and cathelicidin expression orchestrate the final inflammatory outcomes of alpha-herpesviruses infection of the nervous system. Inhibition of both factorsmight be responsible for neurological lesionsin BoHV-5 infection. Further research will be required to determine the role of cathelicidins during infectious diseases of the CNS.Fil: Marin, Maia Solange. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Burucúa, Mercedes María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Producción y Sanidad Animal; ArgentinaFil: Rensetti, Daniel Ernesto. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Odeón, Anselmo Carlos. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Producción y Sanidad Animal; ArgentinaFil: Cobo, E.. University of Calgary; CanadáFil: Quintana, Silvina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Perez, Sandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina26th Biennial Meeting of the International Society for Neurochemistry and the European Society for NeurochemistryParísFranciaInternational Society for NeurochemistryEuropean Society for Neurochemistr