225 research outputs found
A New Luminescence Assay for Autoantibodies to Mammalian Cell–Prepared Insulinoma-Associated Protein 2
OBJECTIVE—Insulinoma-associated protein 2 (IA-2) is a major autoantigen in type 1 diabetes, and IA-2 autoantibodies are routinely detected by a liquid-phase radioimmunoprecipitation assay. The present experiments were initiated to develop a new assay that does not require the use of radioisotopes or autoantigens prepared in bacteria or by in vitro transcription/translation
Two Major Autoantibody Clusters in Systemic Lupus Erythematosus
Systemic lupus erythematosus is a chronic autoimmune disease of complex clinical presentation and etiology and is likely influenced by numerous genetic and environmental factors. While a large number of susceptibility genes have been identified, the production of antibodies against a distinct subset of nuclear proteins remains a primary distinguishing characteristic in disease diagnosis. However, the utility of autoantibody biomarkers for disease sub-classification and grouping remains elusive, in part, because of the difficulty in large scale profiling using a uniform, quantitative platform. In the present study serological profiles of several known SLE antigens, including Sm-D3, RNP-A, RNP-70k, Ro52, Ro60, and La, as well as other cytokine and neuronal antigens were obtained using the luciferase immunoprecipitation systems (LIPS) approach. The resulting autoantibody profiles revealed that 88% of a pilot cohort and 98% of a second independent cohort segregated into one of two distinct clusters defined by autoantibodies against Sm/anti-RNP or Ro/La autoantigens, proteins often involved in RNA binding activities. The Sm/RNP cluster was associated with a higher prevalence of serositis in comparison to the Ro/La cluster (P = 0.0022). However, from the available clinical information, no other clinical characteristics were associated with either cluster. In contrast, evaluation of autoantibodies on an individual basis revealed an association between anti-Sm (P = 0.006), RNP-A (P = 0.018) and RNP-70k (P = 0.010) autoantibodies and mucocutaneous symptoms and between anti-RNP-70k and musculoskeletal manifestations (P = 0.059). Serologically active, but clinically quiescent disease also had a higher prevalence of anti-IFN-α autoantibodies. Based on our findings that most SLE patients belong to either a Sm/RNP or Ro/La autoantigen cluster, these results suggest the possibility that alterations in RNA-RNA-binding protein interactions may play a critical role in triggering and/or the pathogenesis of SLE
Розробка та впровадження систем документообігу і менеджменту навчального процесу магістерської підготовки
Визначальною рисою розвитку людства в світлі сучасних соціально-економічних перетворень суспільства загалом та в освіті зокрема виступає інтеграція навчальних технологій у глобальному інноваційному мультимедійному просторі інформаційного середовища. Рівень вимог до якості навчально-виховного процесу в освітніх закладах, що їх сьогодні висуває суспільство, не може бути забезпечений без впровадження сучасних інформаційних систем. Тому актуальна проблема дослідження інноваційних навчальних технологій вимагає не лише нового підходу до цієї проблематики на рівні методичних розробок, а й глибокого порівняльного аналізу існуючих інформаційних засобів, синтезу новітніх програмних ресурсів та структур.The defining feature of humanity in the light of current socio-economic transformation of society in general and education in particular favor the integration of educational technologies in innovative multimedia space global information environment
Розробка автоматизованої системи формування розкладу магістратури
Розроблено модель автоматизованої системи формування розкладу магістратури. Система реалізує методику складання розкладу, орієнтованого на організацію навчального процесу магістрантів наукового напрямку Вінницького національного технічного університету. Методика враховує специфіку індивідуальних планів магістрантів, адаптованих до вимог Болонського процесу. Дана розробка є структурним модулем автоматизованої системи документообігу Інституту магістратури, аспірантури та докторантури
Розробка автоматизованої системи дослідження надійності технічних систем
Розроблено автоматизовану систему дослідження надійності технічних систем, орієнтовану на використання структурних схем надійності. Система передбачає вибір методу оцінювання надійності, містить інструментальні засоби формування та дослідження структурних схем надійності. Розглянуто моделі та засоби програмної реалізації автоматизованої системи
Розробка автоматизованої системи формування розподілу навантаження дисциплін магістерської підготовки
У статті розроблено моделі автоматизованої системи розподілу навантаження дисциплін магістерської підготовки. Система реалізує запропоновану методику формування розподілу кафедрального навантаження дисциплін магістратури наукового напрямку. Методика базується на реалізації вимог Болонського процесу щодо формування навантаження блоків дисциплін вільного вибору студента та специфіки організації навчального процесу інститутом магістратури, аспірантури та докторантури Вінницького національного технічного університету щодо забезпечення міжкафедрального розподілу навантаження інтегральних дисциплін і потокових дисциплін фахової підготовки магістрів за напрямками відповідних спеціальностей аспірантури
Система автоматизованого ведення документообігу рад вищих навчальних закладів
Розроблено моделі автоматизованого ведення документообігу вчених, методичних та виховних рад навчального закладу вищої школи, які реалізовані в інтерактивному програмному комплексі, що забезпечує вибір режимів роботи системи та можливість віддаленого доступу користувачів із забезпеченням авторизації прав доступу
Novel prokaryotic expression of thioredoxin-fused insulinoma associated protein tyrosine phosphatase 2 (IA-2), its characterization and immunodiagnostic application
Background
The insulinoma associated protein tyrosine phosphatase 2 (IA-2) is one of the immunodominant autoantigens involved in the autoimmune attack to the beta-cell in Type 1 Diabetes Mellitus. In this work we have developed a complete and original process for the production and recovery of the properly folded intracellular domain of IA-2 fused to thioredoxin (TrxIA-2ic) in Escherichia coli GI698 and GI724 strains. We have also carried out the biochemical and immunochemical characterization of TrxIA-2icand design variants of non-radiometric immunoassays for the efficient detection of IA-2 autoantibodies (IA-2A).
Results
The main findings can be summarized in the following statements: i) TrxIA-2ic expression after 3 h of induction on GI724 strain yielded ≈ 10 mg of highly pure TrxIA-2ic/L of culture medium by a single step purification by affinity chromatography, ii) the molecular weight of TrxIA-2ic (55,358 Da) could be estimated by SDS-PAGE, size exclusion chromatography and mass spectrometry, iii) TrxIA-2ic was properly identified by western blot and mass spectrometric analysis of proteolytic digestions (63.25 % total coverage), iv) excellent immunochemical behavior of properly folded full TrxIA-2ic was legitimized by inhibition or displacement of [35S]IA-2 binding from IA-2A present in Argentinian Type 1 Diabetic patients, v) great stability over time was found under proper storage conditions and vi) low cost and environmentally harmless ELISA methods for IA-2A assessment were developed, with colorimetric or chemiluminescent detection.
Conclusions
E. coli GI724 strain emerged as a handy source of recombinant IA-2ic, achieving high levels of expression as a thioredoxin fusion protein, adequately validated and applicable to the development of innovative and cost-effective immunoassays for IA-2A detection in most laboratories.Fil: Guerra, Luciano Lucas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Faccinetti, Natalia Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Trabucchi, Aldana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Rovitto, Bruno David. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Sabljic, Adriana Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Poskus, Edgardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Iacono, Ruben Francisco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Valdez, Silvina Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentin
Chromosomal localization of the large subunit of mouse replication factor C in the mouse and human
Peer Reviewedhttp://deepblue.lib.umich.edu/bitstream/2027.42/47015/1/335_2004_Article_BF00350900.pd
- …