The Effects of Genetic Variant rs704 in the VTN Gene on the Pathobiology of Age-related Macular Degeneration (AMD)

Age-related macular degeneration (AMD) is a frequent disorder of the central retina. So far, the pathomechanisms of the disease are incompletely understood, precluding successful therapeutic strategies to address initiating events of the disease. In recent years, genome-wide association studies (GWAS) implicated a plethora of genetic variation affecting specific biological pathways, like extracellular matrix (ECM) organization and function, complement activation and lipid/cholesterol metabolism, as determinants of AMD. Still to date, for most genetic variants associated with AMD the molecular and biological significance remains to be functionally defined. In this doctoral thesis, a functional investigation of the AMD-associated, non-synonymous rs704C>T variant within the VTN gene, originally reported by Fritsche and colleagues (2016), was conducted. This work aimed to explore the pathological significance of the amino acid substitution (T400M) resulting from rs704 in the encoded vitronectin, a circulatory and matricellular protein implicated previously in the pathology of AMD as a key component and coordinating factor of the abnormal extracellular deposits characteristic for the disease. To this end, the non-AMD risk-associated vitronectin isoform VTN_rs704:C and the AMD risk-associated VTN_rs704:T isoform were compared in a number of in vitro assays to assess the effects of rs704 on mRNA and protein expression, processing and functional aspects of vitronectin. First, risk and non-risk associated VTN mRNA expression in human-induced pluripotent stem cells (hiPSC)-derived retinal pigment epithelium (RPE) and in retinal tissues from donors heterozygous for rs704 revealed no difference between the two VTN alleles. In turn, after heterologous expression in human embryonic kidney (HEK293-EBNA) and cultured RPE (ARPE-19) cells a dramatic increase in protein concentration and reduced endoproteolytic processing was found for the AMD risk-associated VTN_rs704:T isoform compared to the non-AMD risk-associated VTN_rs704:C isoform. Second, after partial thermal denaturation both isoforms of vitronectin revealed similar susceptibility to trypsin digestion. Likewise, vitronectin isoforms exhibited an analogous multimerization, as demonstrated by Blue Native and non-reducing SDS-PAGE. Third, in cell-binding assays, VTN_rs704:T relative to VTN_rs704:C showed a reduced ability to bind to the cell surfaces of ARPE-19, hiPSC-RPE and isolated porcine RPE cells, as well as to Y79 retinoblastoma cells and human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Both isoforms of vitronectin similarly increased the adhesion of porcine-derived RPE and ARPE-19 cells. Furthermore, the two isoforms of vitronectin inhibited extracellular signal-regulated kinase (ERK) signalling in ARPE-19 cells, with VTN_rs704:C showing a greater effect than VTN_rs704:T. In HUVECs, vitronectin isoforms reduced adhesion and tubulogenesis, while only the non-risk VTN_rs704:C isoform slightly reduced migration. The analysis revealed no effect of vitronectin on the regulation of ERK signalling in HUVECs. Both isoforms of vitronectin failed to show any effect on autophagy and cell viability in HUVECs and ARPE-19 cells. Fourth, after heterologous vitronectin expression in ARPE-19 cells, vitronectin isoforms increased the deposition and clustering of the integral ECM components fibronectin, elastin, and collagen, but not laminin. Furthermore, both isoforms increased the extracellular deposition of the angiogenic factor VEGF and the complement components C9 and CFH but had no effect on the deposition of the tissue inhibitor of metalloproteinase 3 (TIMP3). Interestingly, AMD risk-associated isoform VTN_rs704:T showed a stronger effect than non-risk-associated VTN_rs704:C. Finally, the interaction of vitronectin isoforms with vitronectin binding partner plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1), an angiogenic regulator implicated in AMD pathology, was investigated. In co-precipitation experiments, AMD-associated VTN_rs704:T showed a stronger binding to PAI-1 than non-AMD-associated VTN_rs704:C, while in enzyme activity assays both isoforms similarly maintained PAI-1 activity. Exposure of ARPE-19 cells and HUVECs to VTN_rs704:C and VTN_rs704:T similarly increased expression and ECM deposition of PAI-1. Taken together, the results of the thesis confirm and strengthen the contribution of vitronectin to the pathogenesis of AMD and suggest new biological pathways through which this protein might influence the pathological events leading to this devastating disease

Análisis comparativo del perfil sociodemográfico y educativo de los alumnos que cursaron Estadística aplicada a la psicología en La Plata y en Chivilcoy, en el primer cuatrimestre del año 2017

El presente trabajo tiene como objetivo realizar un estudio comparativo de las características demográficas y socioeducativas de los estudiantes que cursaron Estadística Aplicada a la Psicología en la sede central de la Facultad de Psicología y en la sede de Chivilcoy, en el primer cuatrimestre del presente año lectivo. Los datos se construyeron a partir de un cuestionario autoadministrado. La muestra estuvo conformada por 357 alumnos que cursaron en La Plata y 81 alumnos que lo hicieron en Chivilcoy, el porcentaje de varones es de 25 por ciento y 17 por ciento, respectivamente.The present work aims to perform a comparative study of the sociodemographic and educational characteristics of students who studied Statistics Applied to Psychology in La Plata and Chivilcoy in the first quarter of 2017. The data were constructed from a Selfadministered questionnaire. The sample consisted of 357 students who attended in La Plata and 81 who did in Chivilcoy, the percentage of males is 25% and 17% respectively. In La Plata, Chivilcoy shows a higher percentage of pupils coming from private schools, 49%, and 22% respectively.Mesa de trabajos libres: Psicología y EducaciónFacultad de Psicologí

Análisis comparativo del perfil sociodemográfico y educativo de los alumnos que cursaron Estadística aplicada a la psicología en La Plata y en Chivilcoy, en el primer cuatrimestre del año 2017

El presente trabajo tiene como objetivo realizar un estudio comparativo de las características demográficas y socioeducativas de los estudiantes que cursaron Estadística Aplicada a la Psicología en la sede central de la Facultad de Psicología y en la sede de Chivilcoy, en el primer cuatrimestre del presente año lectivo. Los datos se construyeron a partir de un cuestionario autoadministrado. La muestra estuvo conformada por 357 alumnos que cursaron en La Plata y 81 alumnos que lo hicieron en Chivilcoy, el porcentaje de varones es de 25 por ciento y 17 por ciento, respectivamente.The present work aims to perform a comparative study of the sociodemographic and educational characteristics of students who studied Statistics Applied to Psychology in La Plata and Chivilcoy in the first quarter of 2017. The data were constructed from a Selfadministered questionnaire. The sample consisted of 357 students who attended in La Plata and 81 who did in Chivilcoy, the percentage of males is 25% and 17% respectively. In La Plata, Chivilcoy shows a higher percentage of pupils coming from private schools, 49%, and 22% respectively.Mesa de trabajos libres: Psicología y EducaciónFacultad de Psicologí

The refusals of heteronormativity in the XXI Century. Alienated love practices. Gender constructions. What we understand for affective responsibility

A la luz de un cambio de paradigma sociocultural que atañe tanto a los modos de producción subjetivos, como imaginarios y colectivos, se vuelve imperativo repensar los conceptos universales que priman en las relaciones vinculares actuales. Se presenta la necesidad de construcción de nuevas legalidades, dado que las culturalmente proporcionadas carecen de legitimidad, se visibiliza el corte histórico, a modo de brecha, donde las generaciones actuales no pueden investir los mismos preceptos significantes que han investido, y de hecho sostienen, sus progenitores. Hablamos de un modelo vencido, sin previo aviso, ante el que los jóvenes reaccionan creando nuevas formas de identificarse, primero en lo privado y singular, luego en la conjunción subjetiva al encontrarse con que no están solos en este desasosiego simbólico. Dentro del conglomerado de conceptos universalmente naturalizados por la cultura de nuestro país, haremos foco en aquellos que refieren a la heteronormatividad, la construcción de sexualidades bajo el régimen de la monogamia, el binarismo como categorización consecuente, y las respectivas problemáticas que van surgiendo en materia de géneros y disidencias. ¿Qué procesos identitarios se ponen en juego en cada uno de nosotros que nos lleva a ser reproductores de un modelo que nada tiene de propio? ¿Qué nos lleva a perpetuar dichas prácticas desigualitarias, aun reconociendo su acabamiento? El objetivo de este trabajo apuntará a dar cuenta de los procesos de construcción de nuevas legalidades que no son parte de la norma. No institucionalizadas. Cuestionando las formas discursivas que pujan por regir esta deconstrucción.In the light of a socio - cultural paradigm shift that concerns subjective, imaginary and collective modes of production, it becomes imperative to rethink about the universal concepts that prevail in current bonding relationships. The need to build new legalities is presented, given that culturally proportionate ones lack legitimacy, the historical court is visible, as a breach, where new generations cannot invest the same significant precepts their parents have invested, and actually argue against. We speak of a defeated model, without prior notice, to which young people react by creating new ways of identifying themselves, first in the private and singular place, then in the subjective conjunction when they find that they are not alone in this symbolic restlessness. Inside the conglomerate of concepts universally naturalized by the culture of our country, we will focus on those that refer to heteronormativity, the construction of sexualities under the regime of monogamy, binaries as a consequent categorization, and the respective problems that arise in the matter of gender and dissent. Which identity processes are put into play in each one of us that leads us to be reproducers of a model that has nothing of our own? What leads us to perpetuate these unequal practices, even recognizing that they are done with? The objective of this work is to show the construction processes of new legalities that are not a part of the norm, since they are not institutionalized, thus questioning the discursive forms that bid to lead this deconstruction.Facultad de Psicologí

Sack’s incomplete phrases test. Attitude towards the unity of the family

Este trabajo se inscribe en el marco de la investigación que se realiza en la Facultad de Psicología de la UNLP dirigida por la Lic. Adriana Luque “Actualización del Test de Frases Incompletas”. Siguiendo los lineamientos desarrollados por el psicoanálisis, como técnica proyectiva, y basada en las respuestas del sujeto, tiene por finalidad evidenciar proyecciones inconscientes bajo la forma de deseos, hostilidades, afectos, amores e impulsos. La información que nos brinda puede ser utilizada en distintas áreas de aplicación del psicodiagnóstico. Las 60 frases se agrupan en áreas. En esta ocasión se presentarán las respuestas obtenidas en la muestra piloto conformada por 100 personas, 50 de cada sexo, en relación a la familia, Actitud frente a la unidad de la familia. La familia, para la psicología, implica una suma de relaciones que son consideradas como fundamental en el desarrollo de la personalidad. Concebida como campo clave de comprensión del funcionamiento social, considerada como núcleo natural en donde un ser humano nace, aprende normas de convivencia, y se establece vínculos parentales, que incidirán en su construcción subjetiva. Conclusión: daremos cuenta la importancia que requiere la actualización de la técnica como instrumento de exploración, debido a que poder interpretar los resultados se requiere de parámetros contextualizados y actualizados.This research work forms part of the project being developed by the School of Psychology UNLP conducted by Lic. Adriana Luque on Sack’s Incomplete Phrases. Following the developed guidelines by psychoanalysis, as a projective technique, and based on the subject answers, it aims to make evident unconscious projections under the form of desires, hostilities, affection, loves and impulses. The information it provides can be used in different areas of the application of the psychodiagnosis. The 60 phrases that constitute it are clustered in areas. In this opportunity, the obtained answers will be presented in the pilot sample made up by 100 persons, 50 of each gender in relation to the family, attitude towards the unity of the family. The family, in psychological terms, implies an addition of relationships considered fundamental in the development of personality. Conceived as a key area in the comprehension of the social functioning, considered as a natural core where the human being is born learns coexistence norms, and it establishes parents’ relationships that will influence on the subjectivity construction. As a conclusion an account of the importance that requires the updating of the technique as a tool for exploration will be given to be able to interpret the required updated and contextualized parameters results.Facultad de Psicologí

Evolución de la enseñanza de la estadística aplicada a la psicología

En el intento de transmitir un conocimiento, o tal vez a causa de ella, al finalizar los cursos de Estadística Aplicada a la Psicología, de la Facultad de Psicología de la Universidad Nacional de La Plata, la mayoría de los alumnos no están en condiciones de explicar claramente la lógica implícita en las técnicas que han aprendido. De este aprendizaje, se han tomado dos aspectos metodológicos básicos para optimizar la construcción de los conceptos que hacen a la Estadística aplicada: Poner el acento en el aspecto interpretativo por encima del aspecto matemático. Explicar cada tema de manera clara y simple. Para ello, se establecieron cinco ejes temáticos diferenciales, de acuerdo a la formación de los alumnos que cursarán la asignatura Estadística Aplicada a la Psicología, teniendo en cuenta la posición teórica, y los usos y prácticas que se hace de sus contenidos en el ámbito de aplicación profesional de los títulos de grado que se obtienen -Licenciatura y Profesorado en Psicología-.Facultad de Psicologí

Profile of the students who are taking the subject Statistics Applied to Psychology. 2019

El presente trabajo, correspondiente al primer cuatrimestre del año 2019, es el resultado de un objetivo planteado por la cátedra Estadística Aplicada a la Psicología, que se cursa en el segundo año de la carrera de Psicología de la Universidad Nacional de La Plata. La cátedra realiza con continuidad estos trabajos desde el año 1998. El planteamiento de esta tarea ha tenido desde su inicio un doble propósito. El primero pedagógico, que incluye a la totalidad de los alumnos cursantes de la materia, quienes en forma online, responden a un cuestionario elaborado ad hoc, que permitirá luego, durante el desarrollo de los trabajos prácticos, elaborar el procesamiento de la información relevada y aplicar las técnicas estadísticas pertinentes. El segundo propósito es institucional, intenta contribuir a brindar una mayor información para la Facultad, porque entendemos que el conocimiento del perfil del alumno contribuye a organizar, planificar y tomar decisiones académicas más adecuadas, ya que permitiría caracterizar a los alumnos en etapas tempranas de la carrera.This work, belonging to the first four-month period of the year 2019, is the result of an objective set by the chair of Statistics Applied to Psychology, which is taken in the second year of the Psychology degree at UNLP. The chair has been carrying out these works continually since 1998. The approach to this task has had a double purpose since its inception. The first, a pedagogical one, which includes all students taking the subject who answer an ad hoc online questionnaire, which later, during the development of practical work, allows developing the processing of relevant information and applying the relevant statistical techniques. The second purpose is institutional, it consist in trying to contribute to provide more information for the School of Psychology, because we understand that the knowledge of the student's profile helps to organize, planning and making more appropriate academic decisions, since it would allow characterizing the students in early stages of the career.Facultad de Psicologí

Evolución de la enseñanza de la estadística aplicada a la psicología

En el intento de transmitir un conocimiento, o tal vez a causa de ella, al finalizar los cursos de Estadística Aplicada a la Psicología, de la Facultad de Psicología de la Universidad Nacional de La Plata, la mayoría de los alumnos no están en condiciones de explicar claramente la lógica implícita en las técnicas que han aprendido. De este aprendizaje, se han tomado dos aspectos metodológicos básicos para optimizar la construcción de los conceptos que hacen a la Estadística aplicada: Poner el acento en el aspecto interpretativo por encima del aspecto matemático. Explicar cada tema de manera clara y simple. Para ello, se establecieron cinco ejes temáticos diferenciales, de acuerdo a la formación de los alumnos que cursarán la asignatura Estadística Aplicada a la Psicología, teniendo en cuenta la posición teórica, y los usos y prácticas que se hace de sus contenidos en el ámbito de aplicación profesional de los títulos de grado que se obtienen -Licenciatura y Profesorado en Psicología-.Facultad de Psicologí

Evolución de la enseñanza de la estadística aplicada a la psicología

En el intento de transmitir un conocimiento, o tal vez a causa de ella, al finalizar los cursos de Estadística Aplicada a la Psicología, de la Facultad de Psicología de la Universidad Nacional de La Plata, la mayoría de los alumnos no están en condiciones de explicar claramente la lógica implícita en las técnicas que han aprendido. De este aprendizaje, se han tomado dos aspectos metodológicos básicos para optimizar la construcción de los conceptos que hacen a la Estadística aplicada: Poner el acento en el aspecto interpretativo por encima del aspecto matemático. Explicar cada tema de manera clara y simple. Para ello, se establecieron cinco ejes temáticos diferenciales, de acuerdo a la formación de los alumnos que cursarán la asignatura Estadística Aplicada a la Psicología, teniendo en cuenta la posición teórica, y los usos y prácticas que se hace de sus contenidos en el ámbito de aplicación profesional de los títulos de grado que se obtienen -Licenciatura y Profesorado en Psicología-.Facultad de Psicologí

Altered Protein Function Caused by AMD-associated Variant rs704 Links Vitronectin to Disease Pathology

PURPOSE. Vitronectin, a cell adhesion and spreading factor, is suspected to play a role in the pathogenesis of age-related macular degeneration (AMD), as it is a major component of AMD-specific extracellular deposits (e.g., soft drusen, subretinal drusenoid deposits). The present study addressed the impact of AMD-associated non-synonymous variant rs704 in the vitronectin-encoding gene VTN on vitronectin functionality. METHODS. Effects of rs704 on vitronectin expression and processing were analyzed by semi-quantitative sequencing of VTN transcripts from retinal pigment epithelium (RPE) cells generated from human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) and from human neural retina, as well as by western blot analyses on heterologously expressed vitronectin isoforms. Binding of vitronectin isoforms to retinal and endothelial cells was analyzed by western blot. Immunofluorescence staining followed extracellular matrix (ECM) deposition in cultured RPE cells heterologously expressing the vitronectin isoforms. Adhesion of fluorescently labeled RPE or endothelial cells in dependence of recombinant vitronectin or vitronectin-containing ECM was investigated fluorometrically or microscopically. Tube formation and migration assays addressed effects of vitronectin on angiogenesis-related processes. RESULTS. Variant rs704 affected expression, secretion, and processing but not oligomerization of vitronectin. Cell binding and influence on RPE-mediated ECM deposition differed between AMD-risk-associated and non-AMD-risk-associated protein isoforms. Finally, vitronectin affected adhesion and endothelial tube formation. CONCLUSIONS. The AMD-risk-associated vitronectin isoform exhibits increased expression and altered functionality in cellular processes related to the sub-RPE aspects of AMD pathology. Although further research is required to address the subretinal disease aspects, this initial study supports an involvement of vitronectin in AMD pathogenesis