Macroautophagy in lymphatic endothelial cells inhibits T cell-mediated autoimmunity.

Lymphatic endothelial cells (LECs) present peripheral tissue antigens to induce T cell tolerance. In addition, LECs are the main source of sphingosine-1-phosphate (S1P), promoting naive T cell survival and effector T cell exit from lymph nodes (LNs). Autophagy is a physiological process essential for cellular homeostasis. We investigated whether autophagy in LECs modulates T cell activation in experimental arthritis. Whereas genetic abrogation of autophagy in LECs does not alter immune homeostasis, it induces alterations of the regulatory T cell (T reg cell) population in LNs from arthritic mice, which might be linked to MHCII-mediated antigen presentation by LECs. Furthermore, inflammation-induced autophagy in LECs promotes the degradation of Sphingosine kinase 1 (SphK1), resulting in decreased S1P production. Consequently, in arthritic mice lacking autophagy in LECs, pathogenic Th17 cell migration toward LEC-derived S1P gradients and egress from LNs are enhanced, as well as infiltration of inflamed joints, resulting in exacerbated arthritis. Our results highlight the autophagy pathway as an important regulator of LEC immunomodulatory functions in inflammatory conditions

Implication des lymphocytes T régulateurs dans les traitements cibés de la polyarthrite rhumatoïde

Les médiateurs de l inflammation ont un rôle central dans l immuno-pathogénèse de la polyarthrite rhumatoïde (PR), la preuve étant le succès des traitements ciblant les cytokines telles que l interleukine (IL-6). Les lymphocytes T régulateurs (Tregs) ont pour fonction le maintien de la tolérance et sont en déficit fonctionnel dans cette pathologie. De nombreuses cytokines participent à la régulation des Tregs. Ainsi, l IL-6 joue u rôle central dans l immuno-pathogénèse de la PR notamment par son action sur le développement périphérique des Tregs. Récemment l interleukine (IL)-35 a été définie comme une cytokine exclusivement secrétée par les Tregs et serait donc impliquée dans les fonctions régulatrices des Tregs humains et murins. L objectif de ce travail de thèse était d évaluer le rôle des Tregs dans les mécanismes d action des traitements ciblés dans la PR et l un de ces modèles. Tout d abord nous avons souhaité mieux définir la contribution des Tregs dans les traitements ciblant le récepteur de l IL-6 dans la PR et l arthrite expérimentale au collagène (AEC). Dans ce travail, nous avons démontré pour la première fois que le traitement par un anticorps ciblant le récepteur de l IL-6, chez les patients atteints de PR ou chez les souris arthritiques, stimule les Tregs CD39 . Au regard de cette première étude, cette population cellulaire se présente comme une cible thérapeutique intéressante. En second lieu nous avons étudié les propriétés biologiques de l IL-35 et son rôle sur les Tregs dans l AEC ; Afin d évaluer ses effets biologiques, nous avions administré l IL-35 par électrotransfert de plasmides codant son gène dans l AEC. L ensemble de cette étude apporte un regard nouveau sur l IL-35 puisque nous montrons pour la première fois un rôle délétère de l IL-35 da,s l AEC. Bien que nous ne puissions pas exclure que ce rôle délétère ne soit pas la résultante d un effet synergique de l électrotransfert, notre étude suscite des interrogations quant à son utilisation thérapeutique.PARIS13-BU Sciences (930792102) / SudocSudocFranceF

Rôle des cellules T immuno-modulatrices dans des modèles expérimentaux de Polyarthrite Rhumatoïde

Les cellules T régulatrices (Tregs) et les cellules iNKT constituent deux sous populations lymphocytaires engagées dans la régulation de l auto-immunité et donc impliquées dans physiopathologie de la polyarthrite rhumatoïde (PR). Notre travail avait pour objectif d élucider l implication des ces deux sous population dans des modèles expérimentaux de PR. Nous avons d abord étudié le rôle naturel des cellules iNKT au cours de l arthrite expérimentale au collagène (AEC). Nous montrons que les cellules iNKT sont fonctionnellement activées et délétères en phase d induction de l AEC. Leur blocage en début de maladies est d ailleurs thérapeutique via une diminution de la maturation des cellules présentatrices d antigènes (CPA). Nos travaux mettent en évidence l implication des cellules iNKT dans la PR et suggèrent qu elles puissent être considérées comme des cibles thérapeutiques dans cette pathologie. Ensuite, nous avons cherché à comprendre le lien existant entre les Tregs et l inflammation responsable de la synovite dans un modèle d arthrite induit par une surexpression de hTNF-a. Nos travaux montrent que la surexpression de hTNF-a est liée à un défaut en Tregs chez les souris en début de vie, mais une fois l inflammation chronique installée, la fréquence et le nombre de Tregs augmentent avec l âge et le pourcentage de Tregs exprimant TNFR2 également. Par ailleurs, le blocage du hTNF-a induit une augmentation de la fréquence des Tregs, une augmentation de leurs capacités suppressives, ainsi que l expansion de Tregs n exprimant pas CD62L. Cette étude montre l existence d un lien étroit entre les Tregs et le TNF-a au cours de l inflammation chronique. En résumé, l ensemble de nos travaux a permis de préciser le rôle des ces deux sous populations cellulaires (iNKT et Tregs) dans des modèles de PR, définissant ainsi de nouvelles cibles thérapeutiques dans cette maladie.Regulatory T cells (Tregs) and iNKT cells are two lymphocyte populations engaged in the regulation of autoimmunity and thus involved in rheumatoid arthritis (RA) pathophysiology. The aim of our work was to better define the implication of these two subpopulations in experimental models of RA. We have first studied the physiological role of iNKT cells during collagen-induced arthritis (CIA). We show that iNKT cells are functionally activated and deleterious during the phase of induction of CIA. Their neutralization in the early phase of the disease is therefore therapeutic through decrease maturation of dendritic cells and of antigen presenting cells (APC). Our studies demonstrate the involvement of iKNT cells and suggest that they could be used as therapeutic target in this disease. Then, we sought to better define the relationship between Tregs and inflammation responsible of the synovitis in a RA model induced by hTNF-a overexpression. Our work shows that hTNF-a overexpression is link to an initial defect in Tregs in young mice, but after chronic inflammation establishment, Tregs frequency and number increase with age and the frequency of Tregs expressing TNFR2 also. Otherwise, hTNF-a blockade induces an increase Tregs frequency, an increase biological activity of these cells and the emergence of CD62L- Tregs population. This study shows the existence of a link between Tregs and TNF-a during chronic inflammation. In brief, all of our work has clarified the role of these two cell populations (iNKT and Tregs) in RA models, thus defining new therapeutic target in this disease.PARIS13-BU Sciences (930792102) / SudocSudocFranceF

Développement et utilisation de vecteurs viraux et cellulaires en thérapie génique anti-inflammatoire (application à un modèle de polyarthrite rhumatoïde)

PARIS7-Bibliothèque centrale (751132105) / SudocSudocFranceF

Etude du rôle des cellules iNKT dans un modèle expérimental de Polyarthrite Rhumatoïde

Les cellules iNKT constituent une sous population lymphocytaire impliquée dans la régulation de l'autoimmunité et représentent une source importante de cytokines Th2 ayant un rôle protecteur dans les maladies autoimmunes. Le ligand synthètique a-galactosylceramide (a-GalCer) des cellules iNKT exerce un rôle thérapeutique dans le diabète de type 1. Notre travail s'est articulé en deux parties: comprendre les mécanismes d'action thérapeutique de l'a-GalCer dans l'arthrite expérimentale au collagène (AEC), modèle murin validé de la polyarthrite rhumatoïde. Nous avons montré que la stimulation des iNKT par a-GalCer induisait un effet protecteur dépendant de la cytokine IL-10, suggèrent un rôle clè de l'IL-10 dans la protection contre l'AEC par stimulation des iNKT puis étudier le rôle naturel, en absence de stimulation, des cellules iNKT au cours de l'AEC. En phase d'induction de la maladie les cellules iNKT étaient fonctionnellement actives et délétères et leur blocage inhibait le développement de la maladie par induction d'une diminution de la maturation des cellules présentatrices d'antigènes (CPA) mais sans effet sur le nombre de Tregs. Notre travail montre que les cellules iNKT contribuent à la pathogènèse de la PR et peuvent être considérées comme des cibles thérapeutiques.iNKT cells are a unique lymphocyte subtype implicated in the regulation of autoimmunity and a good source of protective Th2 cytokines. Agonist a-galactosylceramide (a-GalCer) of iNKT cells exerts a therapeutical effect in type 1 diabetes. To investigated whether iNKT activation with a-GalCer was protective in collagen-induced arthritis (CIA) in DBA/1 mice, a sdtandard model of rheumatoid arthritis. Stimulation of iNKT cells by a-GalCer induced a protective effect IL-10-dependent suggesting a key role for IL-10 in the protection against CIA by activated inkt cells, next to elucidate the physiological role of iNKT cells in CIA, a model of RA in mice. We demonstrated that, in the early phases of the disease, iNKT were activated and deleterious and their blockage abrogated CIA development by induction of the decrease in antigen-presenting cells (APC) but has no effect on Tregs. These findings suggest that, in the begining of the disease, iNKT cells are deleterious. Our resukts show that iNKT cells may contribute to the pathogenesis of arthritis and can therefore be considered as therapeutic target.PARIS13-BU Sciences (930792102) / SudocSudocFranceF

Rôle de l'angiogénèse dans la polyarthrite rhumatoïde

PARIS7-Bibliothèque centrale (751132105) / SudocSudocFranceF

Influenza dell' immunnita 'anti vettore aav e analisi dei sierotipi aav per una possibile applicazione della terapia genica inra-articolaire nell'artrite reumatoide

PARIS13-BU Sciences (930792102) / SudocSudocFranceF