Levantamento soro-epidemiológico da infecção pelo vírus da Anemia Infecciosa Eqüina, da Influenza Eqüina-2 e do Herpesvírus Eqüino-1 em rebanhos do sul do Estado do Pará, Brasil

Os vírus da anemia infecciosa eqüina (EIAV), da influenza eqüina tipo 2 (EIV-2) e o herpesvírus eqüino tipo 1 (EHV-1) são agentes causadores de enfermidades que podem causar graves prejuízos econômicos. O objetivo deste presente estudo foi estimar a freqüência de anticorpos contra o EIAV, EIV-2 e o EHV-1 em rebanhos do sul do Estado do Pará, Brasil. Os anticorpos contra EIAV, EIV-2 e EHV-1 foram detectados pelo teste de IDGA, pelo método de inibição da hemaglutinação e pela técnica de soroneutralização (TCID50 =100), respectivamente. Amostras de sangue de 672, 514 e de 506 equídeos saudáveis e sem histórico de vacinação contra nenhum dos três vírus foram testadas, respectivamente, para EIAV, EIV-2, EHV-1. A seguinte freqüência de soro reativos foi observada: 1,34% para o EIAV; 35,79% para o EIV-2; 45,45% para o EHV-1. Estes resultados indicam que estes agentes estão presentes no rebanho paraense e a adoção de medidas de manejo e profilaxia devem ser priorizadas, garantindo deste modo, a prosperidade da eqüideocultura brasileira.Equine infectious anemia virus (EIAV), equine influenza virus type 2 (EIV-2) and equine herpesvirus type 1 (EHV-1) are the causal agents of diseases that may bring economical losses. The aim of this present study was to estimate the frequency of antibodies against EIAV, EIV-2 and EHV-1 in herds of south Pará State, Brazil. Antibodies against EIAV, EIV-2 and EHV-1 were detected by AGID, hemagglutination inhibition method and serum neutralization technique (TCID50 =100), respectively. Blood samples of 572, 514, and 506 healthy equine unvaccinated against any of the three viruses were tested, respectively, for EIAV, EIV-2 and EHV-1. The following frequencies of serum reactors animals were observed: EIAV,1,34%; EIV-2, 35,79%; EHV-1, 45,45%. These results show that the agents are present in herds from Pará herds and the adoption of measures of management and prophylaxis should be prioritized, ensuring, thereby, the prosperity of brazilian's breeding equine

Molecular and pathogenic characterization of different infectious bursal disease virus strains

O vírus da doença infecciosa bursal é um importante agente patogênico de aves e desde 1962 tem estado relacionado com grandes prejuízos econômicos. Ainda hoje não foi estabelecido um protocolo de vacinação realmente eficiente e falhas na imunização das aves são geralmente descritas. Os motivos dessas falhas vem sendo pesquisados e as causas alegadas são desde o surgimento de cepas patogênicas por mutações na região do gene que codifica para a VP2, uso mal assessorado de vacinas pouco atenuadas e a reversão vacinal. Este trabalho teve como objetivo pesquisar e comparar a patogenicidade de isolados de campo com a de cepas vacinais. Foram testadas 21 amostras de bursa que foram submetidas à Unidade de Sanidade Avícola da Universidade Federal de Viçosa com suspeita de doença infecciosa bursal e três amostras vacinais. O isolamento viral foi realizado em células VERO, sendo o vírus isolado de 14,28% (3/21) das amostras de campo e de todas as amostras vacinais. As amostras foram padronizadas pela habilidade de provocar efeito patogênico em cultivo celular e foram inoculadas em ovos embrionados de 10 dias de idade. Amostras de fígado, rins, bursa, baço e intestino de cada um dos embriões foram coletadas durante 8 dias e as alterações macroscópicas avaliadas. Metade de cada amostra coletada foi mantida à 4°C e metade foi fixada com formol 10%. As amostras fixadas foram processadas pelo método de inclusão em parafina, coradas com hematoxilina e eosina e as alterações microscópicas avaliadas. Das amostras mantidas a 4°C foi extraído o RNA total pelo método do TRIzol e testadas pela técnica de RT- PCR. Nas observações anatomopatológicas os embriões inoculados apresentavam tamanho reduzido quando comparado aos embriões controle e órgãos com lesões sugestivas de danos vasculares. Nas análises histopatológicas, os órgãos linfóides apresentaram pronunciada depleção linfóide, os hepátocitos vacuolização citoplasmática e os rins estruturas basófilas dentro de túbulos. No teste de RT-PCR foi possível detectar a presença do ácido nucléico viral em todos os tecidos, sendo que a distribuição tecidual dos isolados de campo foi maior quando comparada aos isolados vacinais. Esses resultados revelaram não haver grande diferença quando comparadas as lesões causadas pelos isolados de campo com as lesões causadas por algumas amostras vacinais. Porém há distintos padrões de distribuição em tecidos que poderia indicar uma variação na atenuação de algumas amostras vacinais. Esses resultados sugerem que as amostras vacinais podem causar lesões características da doença e que o uso de determinada cepa, mais ou menos invasiva, deve ser avaliada com cuidado pelo profissional no campo.The infectious bursal disease virus is an important pathological agent of poultry and since 1962 it has been related to great economical losses. Until now, an efficient vaccination protocol has not been established and faults in poultry immunization are generally described. These faults motifs are being searched and various causes have been quoted, from the emergence of pathogenic strains by mutations in the gene responsible for coding VP2, to bad usage of vaccines attenuated for low passage and vaccinal reversion. The aim of this work was to examine and compare field isolates pathogenicity with vaccinal strains. Twenty-one bursa samples suspicious of infectious bursal disease submitted to Unidade de Sanidade Avícola da Universidade Federal de Viçosa and three vaccinal samples were tested. The viral isolation was accomplished in VERO cells, the virus was isolated in 14,28% (3/21) of field samples and in all vaccinal samples. The samples were standardized by its ability to provoke pathogenic effect in cellular culture and were inoculated in 10 days embryonic eggs. Liver, kidney, bursa, spleen and gut samples of each embryo were collected during 8 days and the macroscopic alterations evaluated. Half of each collected sample was stored at 4°C and the other half was fixed with 10% formol. The fixed samples were processed by paraffin xinclusion method, dyed with hematoxilin and eosin and the microscopic alterations evaluated. Total RNA extraction was performed on those samples stored at 4°C by TRIzol method and tested by RT-PCR technique. In anatomopathological observations inoculated embryos presented reduced size when compared to control embryos and organs with characteristics lesions of vascular injury. In histopathological analysis lymphoid organs presented an accentuated lymphoid depletion, hepatocytes presented citoplasmatic vacuolization and kidneys basophiles structures inside tubules. In RT-PCR test was possible to detect the presence of viral nucleic acid in each and every tissues, and the distribution of field isolates was larger when compared to vaccinal isolates. The results revealed that there is not much difference between lesions caused by field isolates with lesions caused by some of vaccinal samples. However, there are distinct distribution patterns in tissues that could indicate a variation on attenuation in some vaccinal samples. These results suggest that vaccinal samples could cause characteristics disease lesions and that the use of a determinate strain more or less invasive should be evaluated with care by the field professional.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológic

Detecção do vírus da anemia infecciosa das galinhas em Minas Gerais

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-12T18:42:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_priscilla.pdf: 561130 bytes, checksum: 21219c0cc64c94140737af6da89ff91d (MD5) Previous issue date: 16Foram avaliadas por nested PCR 32 amostras obtidas de galinhas da avicultura industrial, 20 de galinhas de subsistência, 28 amostras de vacinas comerciais e 16 amostras de aves da fauna e exóticas com o objetivo de pesquisar a presença de CAV e caracterizar molecularmente as estirpes encontradas. Quatorze estirpes de CAV foram sequenciadas, incluindo 7 obtidas de galinhas da avicultura industrial, 4 de galinhas de subsistência, 2 presentes em vacinas comerciais e uma de ave da fauna (Forpus xanthopterygius). A caracterização genética foi por análise das variações encontradas na região do DNA que codifica para as proteínas VP2 e VP3 de CAV. As sequências de nucleotídeos obtidas foram comparadas com sequências de estirpes de CAV de diferentes partes do mundo disponibilizadas no GenBank. As sequências nucleotídicas e de aminoácidos deduzidas foram alinhadas à sequência da estirpe padrão Cuxhaven-1, utilizada na produção de vacinas comerciais. Os resultados obtidos com a análise filogenética demonstraram que as estirpes do estudo apresentaram similaridade com isolados de várias partes do mundo, não apresentando relação geográfica, mas apresentaram variação discreta quando comparadas à estirpe Cuxhaven-1. As substituições de nucleotídeos não acarretaram mudança na sequência de aminoácidos inferida, com exceção da substituição na posição 153 da VP2 de um AV. O CAV foi detectado em cinco vacinas, incluindo de produção embrionária (contra a doença de Newcastle e encefalomielite aviária) e de cultivo primário (doença de Marek), todas da década de 90 (1991-1996) e em nenhuma da década atual. A presença do CAV em vacinas vivas comerciais para a avicultura foi considerada decisiva para a alta disseminação do vírus tanto para as aves da avicultura industrial, como da avicultura de subsistência e eventualmente aves da fauna. Foi avaliado também a ocorrência do CAV em galinhas de subsistência, aves da região metropolitana de Belo Horizonte MG. Em 6/20 (33%) das aves testadas foram detectados o genoma de CAV. A presença de CAV e seu caráter imunodepressor podem representar um transtorno adicional à saúde das aves. A confirmação de CAV na avicultura de subsistência alerta para o trânsito do CAV entre os diferentes sistemas de produção. A infecção por CAV pode ter chegado à avicultura de subsistência a partir de galinhas e frangos industriais em trânsito/transporte para centrais de processamento ou descarte, por convívio ou proximidade com aves industriais, por vacinas contaminadas com CAV e por vacinação contra a anemia infecciosa das galinhas nas aves industriais, entre outros, embora a infecção possa também ter ocorrido de forma independente e por estirpes distintas e exclusivas dessa aviculturaA wide range study was conducted on chicken anemia virus (CAV) in order to investigate the occurrence of CAV in different chicken populations and potential sources of infection. Tissue and biological samples were studied by nested PCR and sequencing, including thirty-two industrial chickens, twenty subsistence chickens, twenty-eight commercial poultry live and inactivated vaccines and sixteen birds of the avian fauna. The fourteen CAV amplicons sequenced included materials from the poultry industry (7), from subsistence chickens (4), from vaccines (2) and from the avian fauna (1). The genetic characterization by variation analyses of the VP2 and VP3 coding regions sequences were compared to sequence data deposited in the GenBank. The nucleotide and deducted amino acid sequences were aligned to the Cuxhaven-1 (Cux-1) prototype strain sequences for comparisons. The phylogenetic analyses of local CAV indicated high similarity of sequences irrespective of source, as well as to CAV sequences published for strains in all continents, although discrete as compared to Cux-1. However, the nucleotide substitutions did not result in amino acid change, except for the VP2 153 position, in which a change from alanine to valine was deducted. CAV was detected in five (5/28; 18%) vaccines produced between 1991 and 1996, including embryo (Newcastle and avian encephalomyelitis) and fibroblast monolayer (Marek's disease) vaccine viruses, but in none produced in the present decade. The detection of CAV in five batches of commercial vaccines of three different major laboratories may be considered an important factor for the present high CAV dissemination. In the subsistence chickens of the metropolitan region of Belo Horizonte, CAV genome was detected in (6/20; 33%). CAV may be of importance for the free-range chickens, although not as yet evaluated, for its potential immunosuppressive impact. CAV infection in free-range chickens may have also epidemiological importance, as additional source and risk for industrial chickens. Although the original source to free-range chickens might have been the industrial chickens infected, vaccinated with CAV vaccines or given CAV-contaminated vaccines, as indicated by the genetic similarity of strains, native free-range strains might also occu

Effects of dietary mineral bioplex in pregnant and lactating sow diets on piglet performance and physiological characteristics

A total of thirty-six Landrace × Large White sows were inseminated with semen of Large White boars and studied in late pregnancy (30 days pre-partum) and lactation phases to determine the effects of trace mineral supplementation in organic (bioplex) and inorganic forms at two levels of supplementation (1 and 2 kg/t) on the reproductive performance of the females and on piglet performance and physiologic characteristics until weaning at 21 days of age. The trace mineral supplements contained 0.0075% selenium, 2.50% zinc, 1.00% manganese, 4.00% iron, 0.25% copper and 0.01% chromium. The experimental design was completely randomized in a 2 × 2 factorial scheme with nine replicates each. The piglets were weighed at birth and at weaning (21 days) and were given a dose of 100 mg of dextran iron on the third day of life. For performance, the mean measure of the litter, including both males and females, was considered. Blood and liver were collected from the piglets at birth (two per farrowing, one male and one female), and milk was collected 10 days thereafter. Increased weight at birth and at 21 days and increased iron content in the blood and liver were found for piglets when the sows were given the organic form of trace minerals. Increased iron content in the milk was observed for higher supplementation with organic minerals only. The blood iron levels indicated a significant increase in levels with the use of the organic minerals. These results indicate important benefits in using trace minerals in organic forms for the performance of both sows and piglets

Sequencing and phylogenetic analysis of the infectious bursal disease virus isolates from outbreak in layer flocks in the state of Minas Gerais

Sequencing and phylogenetic analysis based on the nucleotide sequence of the gene encoding VP2 protein was carried out in order to characterize the agent of two outbreaks of infectious bursal disease in layer flocks in the state of Minas Gerais in 2004. The results indicate the outbreaks could be related to the vaccinal virus