Integridade intestinal e desempenho de perus submetidos à inoculação de Salmonella Enteritidis e a uma dieta suplementada com lactulose

The objective of this work was to evaluate the effects of lactulose (0.03 mL kg-1) on the intestinal health and weight gain of turkeys subjected to the inoculation of Salmonella serovar (sv.) Enteritidis (SE). A total of 280 turkeys, with one day of age, were distributed in the following treatments: T1, negative control; T2, group that received only lactulose; T3, group subjected to the inoculation of approximately 7.0x105 CFU mL-1 SE; and T4, group subjected to the inoculation of approximately 7.0x105 CFU mL-1 SE and treated with lactulose. Poultry performance was evaluated weekly, and seven turkeys from each treatment were euthanized to collect duodenum and jejunum fragments for the histomorphometric analysis. A lower weight gain was observed in the group that received only the pathogen, and the best performance was observed in the lactulose-treated group. The histomorphometric analysis showed a higher villus:crypts ratio in the duodenum and jejunum samples of the negative control and of the group of turkeys at 7 and 21 days of age treated with the lactulose-supplemented diet. Lactulose allows of a better intestinal development of turkeys until 42 days of age, but it does not interfere with poultry performance.O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da lactulose (0.03 mL kg-1) sobre a saúde intestinal e o ganho de peso de perus submetidos à inoculação de Salmonella sorovar (vs.) Enteritidis (SE). Um total de 280 perus, com um dia de idade, foram distribuídos nos seguintes tratamentos: T1, controle negativo; T2, grupo que recebeu apenas lactulose; T3, grupo submetido à inoculação de aproximadamente 7,0x105 UFC mL-1 de SE; e T4, grupo submetido à inoculação de aproximadamente 7,0x105 UFC mL-1 de SE e tratado com lactulose. O desempenho das aves foi avaliado semanalmente, e sete perus por tratamento foram submetidos à eutanásia, para a coleta de fragmentos do duodeno e do jejuno para a análise histomorfométrica. Observou-se menor ganho de peso no grupo que recebeu apenas o patógeno, e o melhor desempenho, no grupo tratado com lactulose. A análise histomorfométrica mostrou maior relação vilos: criptas nas amostras de duodeno e jejuno do controle negativo, e dos grupos de perus, aos 7 e aos 21 dias de idade, tratados com dieta suplementada com lactulose. A lactulose proporciona melhor desenvolvimento intestinal de perus até os 42 dias de vida, mas não interfere no desempenho dessas aves

Actinobacteria from Termite Mounds Show Antiviral Activity against Bovine Viral Diarrhea Virus, a Surrogate Model for Hepatitis C Virus

Extracts from termite-associated bacteria were evaluated for in vitro antiviral activity against bovine viral diarrhea virus (BVDV). Two bacterial strains were identified as active, with percentages of inhibition (IP) equal to 98%. Both strains were subjected to functional analysis via the addition of virus and extract at different time points in cell culture; the results showed that they were effective as posttreatments. Moreover, we performed MTT colorimetric assays to identify the CC50, IC50, and SI values of these strains, and strain CDPA27 was considered the most promising. In parallel, the isolates were identified as Streptomyces through 16S rRNA gene sequencing analysis. Specifically, CDPA27 was identified as S. chartreusis. The CDPA27 extract was fractionated on a C18-E SPE cartridge, and the fractions were reevaluated. A 100% methanol fraction was identified to contain the compound(s) responsible for antiviral activity, which had an SI of 262.41. GC-MS analysis showed that this activity was likely associated with the compound(s) that had a peak retention time of 5 min. Taken together, the results of the present study provide new information for antiviral research using natural sources, demonstrate the antiviral potential of Streptomyces chartreusis compounds isolated from termite mounds against BVDV, and lay the foundation for further studies on the treatment of HCV infection

Phytogenics additive for broiler experimentally inoculated with Salmonella enterica serovar Enteritidis

Submitted by Luanna Matias ([email protected]) on 2015-03-03T14:36:30Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Caroline de Souza Barnabé - 2012.pdf: 955092 bytes, checksum: 1c7e4c5347d5c7994c39252d1f1f2fef (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)Approved for entry into archive by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2015-03-04T12:04:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Caroline de Souza Barnabé - 2012.pdf: 955092 bytes, checksum: 1c7e4c5347d5c7994c39252d1f1f2fef (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)Made available in DSpace on 2015-03-04T12:04:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Caroline de Souza Barnabé - 2012.pdf: 955092 bytes, checksum: 1c7e4c5347d5c7994c39252d1f1f2fef (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2012-02-24In this study, 300 1 day-old male Cobb chicks were used to evaluate, with the objective of evaluating the effects of phytogenic additives on performance, gut integrity and immune system of broilers inoculated with Salmonella enterica serovar Enteritidis (SE). The birds were divided into five treatments with six repetitions each. Treatment (Ttm) 1 - group inoculated orally with 0.1 mL of sterile buffered saline 0.85% (placebo), Ttm 2 - phytogenic received additives in the feed at a dosage of 0.10 kg/ton feed of the initial age until 35 days (Contr. FA); Ttm 3 - group inoculated orally with 0.5 mL of buffered saline 0.85%, containing approximately 5.0X105 CFU/0.5mL Salmonella enterica serovars Enteritidis (Contr. positive SE); Ttm 4 - group inoculated orally with 0,5 mL of buffered saline 0.85%, containing approximately 5.0X105 CFU/0.5mL of SE and received as antimicrobial growth promoter (AGP) bacitracin methylene disalicylate at a dosage of 55 ppm in the feed until 35 days of age (SE + AGP); Ttm 5 - group inoculated orally with 0.5 mL of buffered saline 0.85%, containing approximately 5.0X105 CFU/0.5 mL SE received phytogenic additives in the feed at a dosage of 0.10 kg/ton of feed of 1 to 35 days old (SE + FA). Performance was evaluated and six birds for treatment were weighed, sacrificed and the pH of the gastrointestinal tract was measured. Fragments were collected duodenum and jejunum to histomorphometric analysis, morphometric lymphocyte count. There was significant difference in the period 1-35 of the experiment the average weight and weight gain of groups without microbial challenge, and feed conversion in the group feed with phytogenic. We observed greater higher villus height to 14 days in the duodenum and greater villus:crypt to the group that received phytogenic The pH was influenced by the AGP in the colon and caecum. There was no significant effect of treatment on biometry of organs and Salmonella groups. There was lymphoid depletion in spleen, bursa and caecal tonsils was variable, with a predominance of mild and moderate depletion. It is concluded that the additives phytogenic control the effects of SE in broilers as expressed in the performance, especially in the feed conversion, and histomorphometric of the intestine, although it has not prevented the migration of the SE for the lymphoid organs, as well as not stimulate the proliferation of lymphoid cells in broilers.No presente estudo, foram utilizados 300 pintos com um dia de idade, machos, linhagem Cobb, com o objetivo de avaliar os efeitos dos aditivos fitogênicos sobre desempenho, a integridade intestinal e o sistema imunológico de frangos de corte inoculados experimentalmente com Salmonella enterica sorovar Enteritidis (SE). As aves foram divididas em cinco tratamentos com seis repetições cada. Tratamento (Ttm) 1 - grupo inoculado por via oral, com 0,1 mL de solução salina tamponada e esterilizada a 0,85% (Placebo); Ttm 2 - recebeu os aditivos fitogênicos na ração na dosagem de 0,10 kg/ tonelada de ração da fase inicial aos 35 dias de idade (Contr. AF); Ttm 3 - grupo inoculado via oral, com 0,5 mL de solução salina tamponada a 0,85%, contendo aproximadamente 5,0 X 105 UFC/0,5 mL de Salmonella enterica sorovar Enteritidis (Contr. positivo SE); Ttm - 4 - grupo inoculado por via oral, com 0,5 mL de solução salina tamponada a 0,85%, contendo aproximadamente 5,0 X 105 UFC/0,5 mL de SE e que recebeu como antimicrobiano promotor de crescimento (APC) a bacitracina metil dissilicato na dosagem de 55 ppm na ração até os 35 dias de idade (SE + APC); Ttm 5 - grupo inoculado por via oral, com 0,5 mL de solução salina tamponada a 0,85%, contendo aproximadamente 5,0 X 105 UFC/0,5 mL de SE que recebeu os aditivos fitogênicos na ração na dosagem de 0,10 kg/ tonelada de ração do 1º aos 35 dias de idade (SE + AF). Foram realizadas análises de desempenho e seis aves por tratamento foram pesadas, sacrificadas e o pH do trato gastrintestinal foi aferido . Coletou-se fragmentos de duodeno e jejuno para análises histomorfométricas, morfometrias e contagem de linfócitos. Observou-se diferença significativa, durante o período de 1-35 final do experimento no peso médio e no ganho de peso dos grupos sem desafio microbiano, além de melhor conversão alimentar no grupo alimentado com aditivos fitogênicos. Observou-se maior altura dos vilos aos 14 dias no duodeno e maior relação vilo:cripta para o grupo que recebeu fitogênicos O pH foi influenciado pelo APC no cólon e ceco. Não houve efeito significativo dos tratamentos sobre a biometria dos órgãos e Salmonella nos grupos. Observou-se a depleção linfóide nos baços, bursas e tonsilas cecais foi variável, com predominância de depleção discreta e moderada. Conclui-se que os aditivos fitogênicos controlam os efeitos da SE em frangos de corte como expresso nos dados de desempenho, especialmente na conversão alimentar, e dados histomorfométricos do intestino, embora não tenha impedido a migração da SE para os órgãos linfóides, bem como não estimulam a proliferação de células linfóide nos frangos de corte

Experimental co-infection in SPF chickens with avian metapneumovirus and infectious bronchitis virus

Orientador: Clarice Weis ArnsTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: As infecções causadas por mais de um patógeno são comuns na avicultura, principalmente aquelas causadas por agentes respiratórios como metapneumovírus aviário (aMPV) e o vírus da bronquite infecciosa das galinhas (VBI). Este estudo teve como objetivo avaliar a patologia e a resposta imune de galinhas livre de patógenos específicos (SPF) coinfectadas com aMPV e VBI. Aos 28 dias de vida, 150 aves foram inoculadas e divididas em 4 grupos: controle negativo, inoculado com VBI, inoculado com aMPV e inoculado com VBI e aMPV. Ao longo do período experimental foram observados manifestações clínicas características das infecções pelos vírus inoculados. Aos três, sete, 14, 21, 28 e 35 dias pós infecção (dpi) as aves foram necropsiadas e foram coletados sangue para sorologia e citometria de fluxo, amostras de seio nasal, traqueia e pulmão para quantificação viral por PCR quantitativo em tempo real (qRT-PCR) e histopatologia e fragmentos de traqueia para avaliação de ciliostase. A coinfecção causada pelos dois vírus estudados provocou menos danos às aves em relação ao grupo infectado somente com o VBI como foi observado na citometria de fluxo, sorologia e qRT-PCR de seio nasal e traqueia. Nas aves inoculadas com VBI, tanto no grupo VBI quanto o aMPV+VBI, ocorreu diarreia comprovando com a detecção do vírus no suabe cloacal até 35 dpi. A avaliação da ciliostase traqueal não demonstrou grandes diferenças entre os grupos experimentais. O pulmão do grupo coinfectado apresentou maiores números de cópias virais e maiores lesões microscópicas em relação aos demais grupos, se diferindo dos demais órgãos analisados. Os resultados sugerem que a infecção simultânea por aMPV e VBI pode resultar em interferência viralAbstract: Infections caused by more than one pathogen are common in poultry industry, especially those caused by respiratory agents such as avian metapneumovirus (aMPV) and infectious bronchitis virus (IBV). This study aimed to evaluate a pathology and immune response of specific pathogen free (SPF) chickens coinfected with aMPV and IBV. At 28 days of life, 150 birds were inoculated and divided into 4 groups: negative control, inoculated with IBV, inoculated with aMPV and inoculated with IBV and aMPV. During the experimental period, characteristic clinical signs of infection with the inoculated virus were observed. At 3, 7, 14, 21, 28, and 35 days post inoculation (dpi) the birds were necropsied and blood was collected for serology and flow cytometry, samples of nasal sinus, trachea and lung were collected for viral quantification by real time quantitative PCR (qRT-PCR) and histopathology, and fragments of trachea for evaluation of ciliostasis. Coinfection caused by the two viruses studied caused less damage to birds than the IBV-infected group as observed in flow cytometry, serology and qRT-PCR of the nasal sinus and trachea. In birds inoculated with IBV, both IBV group and aMPV + IBV, there was diarrhea proving with the detection of the virus in the cloacal suabe up to 35 dpi. The evaluation of tracheal ciliostasis did not show large differences between the experimental groups. The lung of the coinfected group had higher numbers of viral copies and larger microscopic lesions in relation to the other groups, differing from the other organs analyzed. The results suggest that simultaneous infection by aMPV and IBV may result in viral interferenceDoutoradoMicrobiologiaDoutora em Genética e Biologia Molecular2013/23303-9FAPES

Fontes de infecção e perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos de Salmonella sp. isoladas no fluxo de produção de frangos de corte

Este trabalho foi desenvolvido com objetivo de pesquisar Salmonellaem amostras de fígado, coração, saco da gema e mecônio de pintos de corte de um dia; inglúvios e cecos obtidos em abatedouros e em suabes de arrasto; larvas ou adultos de Alphitobius diaperinus. Complementarmente, determinou-se o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos: amoxicilina (10 mcg), ampicilina (10 mcg), ciprofloxacina (5 mcg), enrofloxacina (5 mcg), florfenicol (30 mcg), neomicina (30 mcg), sulfonamida (300 mcg), tetraciclina (30 mcg) e trimetoprim-sulfametoxazol (25 mcg) dos serovares tipificados isolados. As amostras foram submetidas às análises microbiológicas pelos métodos bacteriológicos convencionais. Salmonellasp. foi isolada em 6,2% (4/64) do fígado, 4,7% (3/64) do coração, 3,1% (2/64) dos sacos da gema e 4,7% (3/64) do mecônio, num total de 4,7% (12/256) (pinto de um dia); em 10,2% (13/128) das amostras ambientais, sendo 9,4% (9/96) de suabes de arrasto 12,5%, (4/32) de larvas e adultos Alphitobius diaperinus e em 4,4% (28/640) das amostras em abatedouros, sendo 6,5% (21/320) dos inglúvios e 2,2% (7/320) dos conteúdos cecais de abatedouro. Salmonella enterica ser.Enteritidis foi identificada em suabes de arrasto e em amostras de Alphitobius diaperinus, enquanto Salmonella enterica ser.Typhimurium foi encontrada nos inglúvios e cecos. Salmonella enterica ser.Enteritidis apresentaram 75% (6/8) de resistência às sulfonamidas e Salmonella enterica ser.Typhimurium 100% (3/3). A amoxicilina foi outro antimicrobiano com elevada frequência de resistência. Adicionalmente, 20,7% (11/53) dos serovares apresentaram resistência simultânea a pelo menos dois princípios ativos. Conclui-se que Salmonellaencontra-se amplamente distribuída no fluxo de produção de frangos de corte, e a via vertical continua sendo uma fonte de introdução de Salmonellasp. à cadeia de produção; cama e insetos podem perpetuar e veicular Salmonellade interesse zoonótico no ambiente avícola; a existência de cepas resistentes aos antimicrobianos, bem como a resistência múltipla, constituem ameaça à saúde pública