Considerações sobre intoxicação crônica por cobre em ovinos

O cobre é um microelemento essencial para os mamíferos, porém, quando ingerido em grande quantidade, pode levar os animais a intoxicarem-se. Existe diferente susceptibilidade à intoxicação por cobre entre as espécies domésticas, e até mesmo entre raças dentro da própria espécie. Os ovinos são os mais propensos a desenvolverem a enfermidade, especialmente a de evolução crônica, o que causa grandes perdas econômicas. A maioria dos ovinos acometidos é proveniente de manejo intensivo, os quais recebem dietas ricas em concentrados energéticos, e a ocorrência mais comum se dá quando estes animais ingerem misturas minerais destinadas a bovinos. Entre os sinais clínicos destacam-se a icterícia e a hemoglobinúria. O diagnóstico é realizado por meio do histórico, exame clínico, alterações macro e microscópicas, além da determinação dos níveis cúpricos no fígado e/ou rins. A terapia pode ser eficiente se for instituída precocemente após o início da hemoglobinúria, sendo utilizado o tetratiomolibdato de amônio. O controle em rebanhos ovinos deve ser feito com rígidas medidas dietéticas, evitando-se oferecer rações concentradas em concomitância com sais minerais que contenham altos teores de cobre. Nas situações em que a dieta contenha elevados níveis de cobre, recomenda-se a adição de molibdênio à mesma

Evaluación reproductiva de la hembra canina en el momento del servicio: consideraciones para la práctica clínica

El reconocimiento apropiado de los distintos estadios del ciclo estral se constituye en la base conceptual para la aplicación de diversas herramientas diagnósticas de utilidad para el seguimiento reproductivo de la hembra canina. Diversos métodos de aproximación diagnóstica en el momento de ovulación son empleados con fines clínicos: identificación de cambios anatómicos en órganos reproductivos, realización de citologías vaginales seriadas, estudio microscópico del frotis salival o medición seriada de los niveles séricos de progesterona,entre otros. El presente artículo describe los principios fundamentales del seguimiento reproductivo en el momento del servicio, así como la descripción de las principales patologías que afectan a este sistema en la hembra canina. Se concluye que la identificación de los cambios comportamentales, anatómicos, hormonales y celulares observables a lo largo del ciclo estral son métodos fácilmente aplicables por el clínico en ejercicio, y, en conjunto, se constituyen en una excelente herramienta de práctica clínica en pequeñas especies animalespara el seguimiento reproductivo de la perra

Study “in vitro” of apoptosis induced in lymphocytes of mice (BALB/c) immunizated with synthetic peptide SBm7462

Linfócitos T SBm7462-reativos provenientes de camundongos BALB/c de 12 semanas de idade, que receberam por via subcutânea, duas imunizações alternadas a cada 21 dias, com peptídeo sintético SBm7462, foram avaliados quanto ao desenvolvimento da morte celular induzida por ativação (AICD) após apresentação e reconhecimento do peptídeo. Para isto foram realizadas culturas de linfócitos do baço, coletados 9 e 15 dias após a primeira e segunda imunização, e re-estimulados com o peptídeo na presença de quatro drogas diferentes: cicloheximida, benzamida ribósido, ciclosporina A e mitramicina. A identificação de células apoptóticas se realizou através do método de coloração com laranja de acridina e o método imunihistoquímico de TUNEL. A natureza específica dos linfócitos T foi confirmada pela contagem após re-estimulação “in vitro” com o peptídeo sintético, a cada 48 horas durante dez dias de cultura. Diferenças foram observadas ao se comparar os valores de viabilidade obtidos pelo método de exclusão do corante azul de tripan com aqueles que foram constatados com os métodos de detecção da fragmentação do DNA, técnica de TUNEL e laranja de acridina. Embora a técnica de TUNEL seja um método imunohistoquímico, se deve considerar que a sua especificidade é maior quando ainda não ocorreu a completa degradação do DNA. Resultados vencontrados demonstraram que os linfócitos T SBm7462-reativos utilizados expressam constitutivamente a maquinaria necessária para indução de apoptose após ativação com o peptídeo sintético. Todos os achados sugerem que o processo de síntese de novo de proteínas não está envolvido na apoptose após sinalização do TCR, e que a apoptose foi mediada por uma via independente da calcineurina.Lymphocytes T SBm7462-specific coming of mice BALB/c of 12 weeks of age, that received subcutaneously, two alternate immunizations every 21 days, with synthetic peptide SBm7462, were assessed with relationship to the development of the cellular death induced by activation (AICD) after presentation and recognition of the peptide. For this, cultures of lymphocytes of the spleen were accomplished, and lymphocytes were collected 9 and 15 days after the first and second immunization, and re stimulated with the peptide in the presence of four different drugs: cycloheximide, benzamide riboside, cyclosporin A and mithramycin. The identification apoptotic cells was conducted by staining with acridina orange and labeling by TUNEL staining. The specific nature of the lymphocytes T was confirmed by the cell counting every 48 hours for ten days of culture after re-stimulation " in vitro " with the synthetic peptide. Differences were observed when comparing the viability values obtained by the trypan blue exclusion assay, in the treatments with the four compared drugs, with those that were verified with the methods of detection of the fragmentation of DNA, TUNEL staining and Acridine Orange. Although the TUNEL staining is a immunochemistry technique, it should consider that your specificity is larger when it didn't still happen the complete degradation of DNA. Results found showed that the lymphocytes T SBm7462-specific express constitutely the xvinecessary machinery for apoptosis induction after activation with the synthetic peptide. All the discoveries suggest that the de novo protein synthesis is not involved in the apoptosis after signaling of TCR, and that the apoptosis was mediated by an independent via of the calcineurina.Projeto de Apoio ao Desenvolvimento de Tecnologia Agropecuária para o Brasi

Apoptose na infecção experimental com Ehrlichia canis em cães domésticos

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-12T06:44:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_irma_final_corregida_para_imprimir.pdf: 5392421 bytes, checksum: e5151d6e85d7097f143638e85e08b16f (MD5) Previous issue date: 7A Erliquiose monocítica canina é uma zoonose causada pelaEhrlichia canis, bactéria Gram negativa de distribuição mundial. Alguns cães com erliquiose se tornam portadoresassintomáticos enquanto outros desenvolvem uma doençaaguda com morte rápida. A apoptose pode ser importante naeliminação de patógenos intracelulares, podendo, nas infecções porEhrlichiasp. eAnaplasmasp., ocorrer modulação daapoptose celular para prolongar a sobrevivência desses organismos, permitindo sua proliferação e disseminação, atuando como um cavalo de Tróia inibindo a resposta imune. Neste contexto, a apoptose pode contribuir indistintamente para a progressão ou regressão das lesões. Para avaliação do papel da apoptose na erliquiose monocítica canina, sete cães foram distribuídos em dois grupos. No Grupoinoculado, realizou-se a infecção por via intravenosa comsangue infectado com E. Canis (isolado Jaboticabal), sendorealizada a inoculação com PBS estéril nos animaispertencentes ao Grupo Controle. Semanalmente e até 35 diaspós-inoculação, amostras de sangue foram coletadas esubmetidas a n-PCR e reação de Imunofluorescência (RIFI) para confirmação da infecção. No 36° dia pós-inoculação, os animais foram eutanasiados, sendo amostras de baço, linfonodo, rim e fígado coletadas e processadas para as técnicas de TUNEL e imunohistoquímica (Bcl-2, Bax) e amostras dos mesmos, medula óssea e coração para expressão gênica de moléculas apoptóticas (Bax, Bcl-2, Caspase3, Caspase8 e Caspase 9) por RT-PCR. Verificou-se pelan-PCR que os animais inoculados se tornaram positivos paraE.canisa partir da segunda semana pós inoculação. Pela RIFI, verificou-seanimais com sorologia positiva a partir da terceira semanapós-inoculação. No grupo controle, todos os testes realizadosforam negativos para E. canis. Ambas as moléculas pro e antiapoptóticas avaliadas neste estudo mostraram mais alta expressão de genes em tecidos dos animais do grupo inoculado que nos animais do grupo controle. Apesar da reação de TUNELmostrar maior ocorrência de apoptose no Grupo Inoculado,sendo o baço e os linfonodos os órgãos que apresentarammaior marcação, os resultados da imunohistoquímica para Bcl-2 e Bax indicaram que a via intrínseca de apoptose não é tão importante nos órgãos analisados.Em conclusão nós encontramos que na fase aguda da doença experimental a Ehrlichiacanis modulaa apoptose por diferentes vias em tecidos distintos e que a apoptose tem um papel na progressão da doença.The Canine MonocyticEhrlichiosis is a zoonotic disease caused by Ehrlichiacanis, a Gram negative bacteria, with a worldwide distribution. Some dogs with ehrlichiosis become asymptomaticcarriers while others develop an acute disease with rapid death. Apoptosis can be important in the elimination of intracellular pathogens in infections caused by Ehrlichia sp. and Anaplasma sp. occur modulation of apoptosis to prolong the survival of these organisms allowing their proliferation and spread, acting as a Trojan horse by inhibition the immune response. In this context apoptosis may contribute to the progression or regression of the lesions. To evaluate the role of apoptosis in Canine MonocyticEhrlichiosis, seven mongrel dogs, clinically healthy and free of ticks, aged among six and eight months, were randomly assigned into two groups: GI, Inoculated - with four dogs and GII, Control -with three dogs. Each dog was inoculated intravenously with 3 ml of either infected blood (strain Jaboticabal) in GI or sterile PBS in GII. Weekly and 35 days post-inoculation, blood samples were collected and subjected to nested reaction chain polymerase (nPCR) and immunofluorescence assay (IFA) for confirmation of infection. On day 36 post-inoculation, animals were euthanized and samples of spleen, lymph node, kidney and liver were collected and processed for TUNEL and immunohistochemical techniques (Bcl-2, Bax). Another set of the same samples, with bone marrow and heart were processed for gene expression of apoptotic molecules (Bax, Bcl-2, caspase-3, caspase 8 and caspase 9) by RTPCR. As verified by nPCR inoculated animals became positive for E. canis from the second week after inoculation. IFAT showed seropositive animals from the third week after inoculation. In the control group, all tests were negative for E. canis. Both pro and anti-apoptotic molecules showed higher expression of genes in tissues of inoculated animals than in the control group. TUNEL assay showed increased incidence of apoptosis in the group inoculated, with more intense labeling in spleen and lymph nodes, however the results of the immunohistochemistry for Bcl-2 and Bax indicated that the intrinsic pathway of apoptosis was not important. In conclusion we found that in the acute phase of the experimental disease,Ehrlichiacanis modulates apoptosis in different ways in different tissues and that apoptosis plays a role in disease progression

Apoptose na infecção experimental de cães domésticos com Ehrlichia canis

A Erliquiose canina é uma zoonose causada pela Ehrlichia canis, bactéria Gram negativa de distribuição mundial. Alguns cães com erliquiose se tornam portadores assintomáticos enquanto outros desenvolvem uma doença aguda com morte rápida. A apoptose pode ser importante na eliminação de patógenos intracelulares, podendo, nas infecções por Ehrlichia sp. e Anaplasma sp., ocorrer modulação da apoptose celular para prolongar a sobrevivência desses organismos. Para avaliação do papel da apoptose na erliquiose canina, sete cães foram distribuídos em dois grupos. No Grupo inoculado, realizou-se a infecção por via intravenosa com sangue infectado com E. canis (isolado Jaboticabal), sendo realizada a inoculação com PBS estéril nos animais pertencentes ao Grupo Controle. Semanalmente e até 35 dias pós-inoculação, amostras de sangue foram coletadas e submetidas a n-PCR e reação de imunofluorescência (RIFI) para confirmação da infecção. No 36° dia pós-inoculação, os animais foram eutanasiados, sendo as amostras de baço, linfonodo, rim e fígado coletadas e processadas para as técnicas de TUNEL e imunohistoquímica (Bcl-2, Bax). Verificou-se pela n-PCR que os animais inoculados se tornaram positivos para E. canis a partir da segunda semana. Pela RIFI, verificou-se animais com sorologia positiva a partir da terceira semana pós-inoculação. No grupo controle, todos os testes realizados foram negativos para E. canis. Apesar da reação de TUNEL mostrar maior incidência de apoptose no Grupo Inoculado, sendo o baço e os linfonodos os órgãos que apresentaram maior marcação, os resultados da imunohistoquímica para Bcl-2 e Bax indicam que a via intrínseca de apoptose não é importante nos órgãos analisados.Some dogs infected with Ehrlichia canis become asymptomatic while others develop an acute illness followed by quick death. Apoptosis may be an important mechanism for elimination of intracellular pathogens. Also, Ehrlichia sp. and Anaplasma sp. can modulate apoptosis to extend their survival. To evaluate the role of apoptosis in canine ehrlichiosis, 7 dogs were assigned into 2 groups, one with 4 animals inoculated intravenously with blood infected with Ehrlichia canis (Jaboticabal isolate) and a control with 3 dogs, inoculated with sterile PBS. Blood samples were collected weekly and 35 days post-inoculation to confirm the infection by nPCR and immunofluorescence. Thirty-six days after inoculation the animals were euthanized and samples from spleen, lymph nodes, kidney and liver were collected to carry out the TUNEL technique and immunohistochemistry (Bcl-2, Bax). Inoculated animals became positive for E. canis by nPCR already in the second week and by immunofluorescence in the third week after inoculation. The control group showed negative for E. canis in all tests. The TUNEL reaction showed a higher incidence of apoptosis in the inoculated group, with stronger labeling in the spleen and lymph nodes. The results of immunohistochemistry for Bcl-2 and Bax suggest that the intrinsic pathway of apoptosis is not important in the analyzed organs.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES

Expressions of matrix metalloproteinases-1 and -9 and opioid growth factor in rabbit cornea after lamellar keratectomy and treatment with 1% nalbuphine

ABSTRACT Purposes: To evaluate the effects of nalbuphine 1% on the expression of metalloproteinase 1 (MMP-1), metalloproteinase 9 (MMP-9), and opioid growth factor (OGF) in rabbit corneas after lamellar keratectomy. Methods: The rabbits were assigned to two groups: group nalbuphine (GN, n=30), which received 30 &#181;L of nalbuphine 1% in 4 daily applications at regular intervals until corneal epithelialization, and group control (GC, n=30), which received physiological saline solution under the same conditions adopted in GN. The corneas were collected for immunohistochemistry on days 1, 3, 5, 7, and 9 after lamellar keratectomy, and the expressions of MMP-1, MMP-9, and OGF were analyzed. Results: The expressions of MMP-1 and MMP-9 increased until day 5 of the evaluation, with no differences observed between GN and GC (p>0.05). On days 7 and 9, significant reductions were observed in the expression of MMP-1 (p<0.01), with no differences observed between GN and GC (p>0.05). The expression of OGF was constant in all periods (p>0.05), restricted to the corneal epithelium, and there was no difference between the groups (p>0.05). Conclusions: The study results showed that nalbuphine 1% did not alter the expression patterns of MMP-1, MMP-9, and OGF in rabbit corneas after lamellar keratectomy