Study of Polycomb proteins Pcgf1 and Ezh2 implication in Zebrafish Danio rerio

Les complexes PRC1 et PRC2 contrôlent l’expression génique via l’organisation de la structure de la chromatine. Ce contrôle se fait par l’ajout de la marque H2AK119ub1 par le PRC1 et l’ajout de la marque H3K27me3 par le PRC2. Cette étude s’attache à étudier le rôle de la protéine Pcgf1 (membre du complexe PRC1) et de la protéine Ezh2 (membre du complexe PRC2) lors du développement du poisson-zèbre. Les gènes sont inactivés par TALEN. Le complexe PRC1 est formé par différentes protéines dont les Pcgf. Il existe de nombreux homologues Pcgf qui ont des fonctions distinctes. Cette étude s’intéresse au rôle de la protéine Pcgf1 lors du développement du poisson-zèbre. Les individus pcgf1-/- sont viables et fertiles. Cependant, leur développement précoce est retardé et les adultes montrent des signes de vieillissement accéléré. Ce mutant est le premier modèle de vertébré qui met en évidence le rôle de Pcgf1 dans la prolifération cellulaire lors du développement et son association au vieillissement. La protéine Ezh2 est impliquée dans le devenir cellulaire et la différenciation. Les embryons se développent normalement puis les larves meurent à 12 jours post-fécondation. De façon intéressante, les embryons de poisson-zèbre peuvent gastruler en l’absence d’Ezh2, contrairement au modèle murin. Les organes sont correctement mis en place à 5 jours post-fécondation. Les larves présentent un défaut de maintien de la paroi du bulbe intestinal. La protéine Ezh2 est importante pour le maintien du pancréas exocrine. L’absence d’Ezh2 cause une augmentation importante du nombre de cellules apoptotiques. Ezh2 est essentiel lors de la régénération de la nageoire caudale.PCR1 and PRC2 are complexes that control gene expression via chromatin structure reorganization. This expression regulation is maintained by adding epigentics marks H2AK119ub1 by the PRC1 and adding of H3K27me3 by the PRC2. The study devotes to study the role of the protein Pcgf1 (part of the PRC1 complex) and of the Ezh2 protein (part of the PRC2 complex) during the zebrafish development. The PRC1 complex is formed by different proteins including Pcgf proteins. There are several Pcgf homologs that have different functions. The study reveals that some Pcgf proteins have a different expression during caudal fin regeneration and development. We are interested in Pcgf1 protein during the zebrafish development. The pcgf1 gene was inactivated by using TALEN. The fish pcgf1-/- are viable and fertile. However, the early development is delayed and adults show signs of accelerated aging. This mutant is the first vertebrate model showing the role of Pcgf1 in cells proliferation during development and aging. Ezh2 protein is involved in cell-fate decisions and differenciation. Inactivation of ezh2 gene by TALEN reveals the essential role of Ezh2 during development. Indeed, at the beginning embryos develop normally then larvae die at 12 days post-fertilization. Interestingly, zebrafish embryo can gastrulate without Ezh2. This contradicts with observations in mouse model. The organs are properly formed at 5 days postfertilization. Larvae show defects in the intestinal bulb wall. Ezh2 is important for exocrine pancreas maintenance. The absence of Ezh2 causes an increase in apoptic cells. Ezh2 is essential during caudale fin regeneration

L’ingénierie des génomes par les TALEN

La modification précise des génomes est un des enjeux majeurs des biotechnologies et de la recherche biomédicale. La découverte des TALE (transcription activator-like effector) et le développement récent des TALEN (transcription activator-like effector nuclease) artificiels offrent la possibilité d’éditer les génomes de nombreux organismes modèles de manière rapide, spécifique et efficace. Les TALEN sont des ciseaux moléculaires qui permettent d’induire différentes modifications génétiques en un site choisi du génome, et il est probable qu’ils deviennent, au cours des prochaines années, un des outils incontournables de la génétique inverse appliquée à la médecine

Polarizing representations of immigrant communities in Belgian French-speaking online political discourse

In this study, we will present an analysis of how polarization, and more specifically polarizing representations of immigrant communities, are discursively constructed in the online discourse of Belgian French-speaking politicians. Our study is based on Facebook and Twitter messages from leading politicians from all major parties. They consist of two one-month samples, which were collected one month before and during the 2019 electoral campaign for the regional, national and European elections that took place on May 26th. We will show how a variety of linguistic devices, such as deixis and metaphors (Lakoff and Johnson 1980), contribute to creating an opposition between an in-group and an out-group and to presenting the out-group as a threat, thus producing polarizing representations of immigrant communities

La frontière entre opinion et discours de haine dans les tweets de personnalités politiques belges francophones

Nous présenterons une analyse de messages à la frontière entre opinion et discours de haine, basée sur un corpus de tweets de personnalités politiques belges francophones. Les tweets ont été collectés au cours de la campagne électorale de mai 2019 et durant les mois qui ont précédé cette campagne. Nous sélectionnons quatre personnalités importantes par parti. Nous montrerons que les messages du corpus analysé contiennent très peu de stratégies incitant ouvertement à la haine mais que certains messages se situent à la frontière entre opinion et discours de haine. Ceux-ci peuvent inclure des représentations polarisantes ou stéréotypées de certaines communautés, basées sur des critères liés à l’ethnicité, la religion ou l’orientation sexuelle. Nous analyserons les stratégies linguistiques utilisées pour construire ces représentations polarisantes, comme la déixis, la généralisation, le langage métaphorique, et la construction de l’agentivité et de l’intentionnalité. En outre, nous montrerons comment la combinaison de ces stratégies peut contribuer à la création d’un discours qui représente certaines communautés comme une menace. En dernier lieu, nous comparerons les résultats de cette analyse avec les productions des mêmes personnalités politiques sur Facebook

Pratiques de l’appropriation foncière en contexte musulman (Land appropriation practices in the Muslim context)

This article deals with the question of “property” and its transmission. Our approach distances itself from the right-wing culturalist perspectives often adopted in studies of the Muslim world to favour an ethnographical approach examining the ways in which land is acquired and transferred. We show how actors in Algeria and Sudan use local, national and even international laws to claim title to land, especially in cases of collective or public goods. Our focus then shifts to the land appropriation practices currently affecting agricultural and/or peri-urban areas and the conflicts they give rise to. After briefly presenting our “praxelogical” approach and recent work on property in both countries, we describe how protagonists’s strategies, different legal referents, and institutions involved in negotiations on land access and conflict resolution work towards a single goal (providing access to land)

Combining genotypic and phenotypic analyses on single mutant zebrafish larvae

Zebrafish is a powerful animal model used to study vertebrate embryogenesis, organ development and diseases (Gut et al., 2017) [1]. The usefulness of the model was established as a result of various large forward genetic screens identifying mutants in almost every organ or cell type (Driever et al., 1996; Haffter et al., 1996) [2,3]. More recently, the advent of genome editing methodologies, including TALENs (Sander et al., 2011) [4] and the CRISPR/Cas9 technology (Hwang et al., 2013) [5], led to an increase in the production of zebrafish mutants. A number of these mutations are homozygous lethal at the embryonic or larval stages preventing the generation of homozygous mutant zebrafish lines. Here, we present a method allowing both genotyping and phenotype analyses of mutant zebrafish larvae from heterozygous zebrafish incrosses. The procedure is based on the genotyping of the larval tail after transection, whereas phenotypic studies are performed on the anterior part of the zebrafish larvae. • The method includes (i) a protocol for genotyping, (ii) protocols for paraffin embedding and histological analyses, (iii) protocols for protein and histone extraction and characterization by Western blot, (iv) protocols for RNA extraction and characterization by RT-PCR, and (v) protocols to study caudal spinal cord regeneration. • The technique is optimized in order to be applied on single zebrafish embryos and larvae. Keywords: Zebrafish, Genotyping, Protein extraction, Histone extraction, RNA extraction, Histology, Spinal cord regeneratio

The Polycomb Group Protein Pcgf1 Is Dispensable in Zebrafish but Involved in Early Growth and Aging - Fig 2

<p><b>Expression of the Pcgf family member during caudal fin regeneration</b> (<b>A</b>) Schematic representation of the regenerating caudal fin structures. (<b>B</b>) <i>In situ</i> hybridization with <i>pcgf1</i>, <i>bmi1a</i>, <i>bmi1b</i>, <i>pcgf5a</i>, <i>pcgf5b</i> and <i>pcgf6</i> RNA anti-sense probes on sections of regenerating caudal fins from 6 month-old zebrafish at 4 days post-amputation (dpa). Dashed lines indicate the amputation plane.</p