Saliva as a noninvasive biological sample to compare bioavailability of phenytoin formulations by LC-MS/MS

The use of noninvasive biological samples such as saliva, it is of great interest for therapeutic drug monitoring (TDM), including the anticonvulsants Phenytoin (PHT). A simple analytical methodology by liquid chromatography-tandem mass spectrometry was developed and validated to carry out a relative comparative bioavailability (RBA) study of two PHT formulations in human plasma and saliva and the subsequent correlation between both matrixes. A single-dose, randomized-sequence, open-label, two-way crossover study, was conducted in 24 healthy Latin American male volunteers. The bioequivalence of 200 mg PHT tablet was evaluated using plasma and saliva to determine Cmax, Tmax, AUC0-t and AUC0-∞. Figures of merit of the proposed methodology were as follows: linear ranges of 40-5055 ng/mL and 5-1340 ng/mL for plasma and saliva, respectively, with a correlation coefficient of (r)>0.999. The LOD and LOQ were 15 ng/mL -40ng/mL for plasma and 1.5 ng/mL – 5.0 ng/mL for saliva. Accuracy, precision (as %CV) and recovery were accepted according the bioequivalence criteria. Stability showed %bias<15%. The PHT saliva/PHT plasma ratios for all parameters were: 5.4, 2.2, 1.4 for Cmax, and 1.7, 1.2, 1.1 for AUC. Plasma and saliva results were correlated (R=0.9889 and R=0.9947 for Reference and Test, respectively). Saliva not only is a suitable matrix for RBA studies and TDM, but also a more convenient tool since it provides analogous information with mayor analytical, ethical, and biosafety advantages. However, an additional pre-study of product dissolution in oral cavity is suggested before carrying out complete RBA studies for prompt-release drugsFil: Baldo, Matias Nicolas. Dominguez Lab; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Hunzicker, Gabriel Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Dominguez Lab; ArgentinaFil: Altamirano, Jorgelina Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Provincia de Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Universidad Nacional de Cuyo. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales; ArgentinaFil: Murguia, Marcelo Cesar. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Hein, Gustavo Juan. Dominguez Lab; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentin

Electrochemical microfluidic immunosensor based on TES-AuNPs@Fe3O4 and CMK-8 for IgG anti-Toxocara canis determination

We report a microfluidic immunosensor for the electrochemical determination of IgG antibodies anti-Toxocara canis (IgG anti-T. canis). In order to improve the selectivity and sensitivity of the sensor, core-shell gold-ferric oxide nanoparticles (AuNPs@Fe3O4), and ordered mesoporous carbon (CMK-8) in chitosan (CH) were used. IgG anti-T. canis antibodies detection was carried out using a non-competitive immunoassay, in which excretory secretory antigens from T. canis second-stage larvae (TES) were covalently immobilized on AuNPs@Fe3O4. CMK-8-CH and AuNPs@Fe3O4 were characterized by transmission electron microscopy, scanning electron microscopy, energy dispersive spectrometry, cyclic voltammetry, electrochemical impedance spectroscopy, and N2 adsorption-desorption isotherms. Antibodies present in serum samples immunologically reacted with TES, and then were quantified by using a second antibody labeled with horseradish peroxidase (HRP-anti-IgG). HRP catalyzes the reduction from H2O2 to H2O with the subsequent oxidation of catechol (H2Q) to p-benzoquinone (Q). The enzymatic product was detected electrochemically at _100 mV on a modified sputtered gold electrode. The detection limit was 0.10 ng mL−1, and the coefficients of intra- and inter-assay variation were less than 6%, with a total assay time of 20 min. As can be seen, the electrochemical immunosensor is a useful tool for in situ IgG antibodies anti-T. canis determination.Fil: Jofre, Claudio Francisco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Regiart, Daniel Matias Gaston. Universidade de Sao Paulo; Brasil. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Fernández Baldo, Martín Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Bertotti, Mauro. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Raba, Julio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Messina, Germán Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentin

Electrochemical nanostructured biosensors for determination of ultra-trace anabolic drugs in bovine samples

Los anabólicos son drogas capaces de incrementar la retención de nitrógeno aumentando la acumulación de proteínas en los animales, son utilizados en producción agropecuaria y entrañan un serio problema para la salud pública (FAO/OMS, Roma, 1975). Entre estos compuestos se encuentran los β-agonistas, los cuales empleados en dosis bajas presentan usos terapéuticos, mientras que utilizados en altas dosis muestran su función anabolizante, generan residuos cuya acumulación representa un peligro para los consumidores. Debido al reporte de serias intoxicaciones, fue prohibida su utilización como promotores del crecimiento. El análisis de dichos residuos en muestras de origen animal requiere elevada sensibilidad y selectividad. Las metodologías usadas para su determinación son la cromatografía líquida y gaseosa con detección por espectroscopia de masas y técnicas inmunológicas como ELISA y RIA. Alternativamente, y debido a que los β-agonistas y otros anabólicos como el zeranol contienen grupos electroactivos, la detección electroquímica representa una estrategia para ser considerada. Esta detección combinada con el uso de electrodos de láminas impresas ofrece ventajas como sencillez, versatilidad, bajo precio, mínimo volumen de muestra requerido y portatibilidad del sistema, lo que permite realizar ensayos in situ. La incorporación de nanomateriales (nanopartículas metálicas, nanotubos de carbono, etc.) en la superficie de dichos electrodos posibilita mejorar la sensibilidad en comparación con los métodos tradicionales. Dichos materiales se emplean en la construcción de sensores, pues ofrecen un aumento en el área superficial, conductividad y propiedades electrocatalíticas, así como también una excelente biocompatibilidad por lo que pueden utilizarse como soportes para la inmovilización de biomoléculas en reacciones inmunológicas y/o enzimáticas.Anabolic, drugs able to increase nitrogen retention by increasing the accumulation of proteins in animals have been used in livestock production and involve a serious problem for public health (FAO/OMS, Rome 1975). Within these compounds include β-agonists, which have therapeutic uses, but to express its anabolic function require high doses, which generate waste whose accumulation represents a danger for consumers. Since the report of serious food poisoning their use as growth promoter was banned. The analysis of such residues in animal samples should be performed with high sensitivity and selectivity. The most widely used methods are techniques of liquid chromatography and gas chromatography with mass spectroscopy detection, but can also be used immunological techniques such as ELISA and RIA. Alternatively, and because the β-agonists containing electroactive groups, electrochemical detection should be considered. This detection combined with the use of screen printed carbon electrodes provides many advantages such as simplicity, versatility, low price, minimum sample volume required and portability system, which allows “in situ’’ determinations. Another strategy to improve sensitivity over traditional methods is the incorporation of nanomaterials (metal nanoparticles, carbon nanotubes, etc.). These materials represent a tool for sensors construction because they provide an increased surface area, high conductivity, electrocatalytic properties, as well as an excellent biocompatibility; therefore can be used as supports for biomolecule immobilization on immunological and/or enzymatic reactions.Fil: Regiart, Daniel Matias Gaston. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Pereira, Sirley Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Messina, Germán Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Fernández Baldo, Martín Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Spotorno, Viviana G.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Recursos Naturales. Instituto de Recursos Biológicos; ArgentinaFil: Bertolino, Franco Adrián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Raba, Julio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; Argentin

Review of the Cambrian Pampean orogeny of Argentina; a displaced orogen formerly attached to the Saldania Belt of South Africa?

The Pampean orogeny of northern Argentina resulted from Early Cambrian oblique collision of the Paleoproterozoic-Mesoproterozoic MARA block, formerly attached to Laurentia, with the Gondwanan Kalahari and Rio de la Plata cratons. The orogen is partially preserved because it is bounded by the younger Córdoba Fault on the east and by the Los Túneles-Guacha Corral Ordovician shear zone on the west. In this review we correlate the Pampean Belt with the Saldania orogenic belt of South Africa and argue that both formed at an active continental margin fed with sediments coming mainly from the erosion of the Brasiliano–Pan-African and East African–Antarctica orogens between ca. 570 and 537 Ma (Puncoviscana Formation) and between 557 and 552 Ma (Malmesbury Group) respectively. Magmatic arcs (I-type and S-type granitoids) formed at the margin between ca. 552 and 530 Ma. Further right-lateral oblique collision of MARA between ca. 530 and 520 Ma produced a westward verging thickened belt. This involved an upper plate with high P/T metamorphism and a lower plate with high-grade intermediate to high P/T metamorphism probably resulting from crustal delamination or root foundering. The Neoproterozoic to Early Cambrian sedimentary cover of MARA that was part of the lower plate is only recognized in the high-grade domain along with a dismembered mafic–ultramafic ophiolite probably obducted in the early stages of collision. Uplift was fast in the upper plate and slower in the lower plate. Eventually the Saldania and Pampean belts detached from each other along the right-lateral Córdoba Fault, juxtaposing the Rio de la Plata craton against the internal high-grade zone of the Pampean belt

Bioequivalence study of Binap®, ibrutinib 140 mg capsules manufactured by Laboratorio Varifarma S.A., compared to the reference product Imbruvica®

El ibrutinib es un fármaco antineoplásico que se encuentra indicado principalmente en el tratamiento del linfoma de células del manto y leucemia linfocítica crónica. La acción terapéutica del ibrutinib es ejercida al reducir la actividad de la enzima tirosina quinasa de Bruton. En el presente estudio se reporta la bioequivalencia de Binap®, una nueva formulación de ibrutinib 140 mg, de Laboratorio Varifarma S.A., respecto del producto de referencia Imbruvica® 140 mg, de Janssen Cilag Farmacéutica S.A. La investigación consistió en un estudio abierto a dosis única de 140 mg de ibrutinib, en ayunas, en 36 voluntarios sanos masculinos. Se estableció un diseño cruzado, pareado, replicado, de dos secuencias y cuatro períodos (2 x 4) y con un período de lavado de 7 días entre cada período. El ibrutinib plasmático se determinó por medio de una metodología validada empleando cromatografía líquida de alta performance acoplado a un detector de espectrometría de masas de triple cuadrupolo en tándem (HPLC-MS/MS). Los resultados obtenidos indican que cuando se administra a sujetos sanos una dosis única de 140 mg, ambas formulaciones muestran en promedio perfiles farmacocinéticos prácticamente idénticos. Los parámetros farmacocinéticos evaluados fueron concentración máxima plasmática (Cmax), área bajo la curva farmacocinética a último tiempo de muestreo y extrapolada a infinito (ABC0-T y ABC0-∞), tiempo al cual se alcanza la concentración máxima plasmática (Tmax), tiempo medio de eliminación (T1/2) y constante de eliminación (Kel). El análisis estadístico de los datos para demostrar bioequivalencia se realizó sobre los parámetros farmacocinéticos Cmax, ABC0-T y ABC0-∞, conforme criterios de bioequivalencia nacionales e internacionales para un intervalo de confianza del 90% (IC90%). El análisis de varianza (ANOVA) con los datos logarítmicamente transformados arroja un coeficiente de variabilidad intra-sujeto (CVintra) similar tanto para Binap® como para Imbruvica®, del orden del 60% para Cmax y 46% para ABC0-T. Para el parámetro ABC0-T el punto medio estimado es 96,4 % (IC90% de 85,4 a 108,9 %), para ABC0-∞ el punto medio estimado es de 99,4 % (IC90% de 88,7 a 111,4 %), ambos dentro del rango de bioequivalencia de 80-125%, y para Cmax el punto medio estimado es de 85,1 % (IC90% de 72,2 a 100,2%), dentro del rango de bioequivalencia expandido de 69,8-143,2%, en función del CVintra obtenido (>50%). Los resultados de este estudio permiten concluir que Binap® (ibrutinib 140 mg) de Laboratorios Varifarma S.A. es bioequivalente a Imbruvica® 140 mg de Janssen Cilag S.A., por lo que ambos medicamentos pueden considerarse intercambiables en la práctica médica.Fil: Hunzicker, Gabriel Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Rodriguez Romero, María Pía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Baldo, Matias Nicolas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Acevedo, María Cecilia. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Lorenzon, Guillermina. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Fritz, María Carolina. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Mansilla, Carolina. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Vergara, Soledad. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Rosenbrock, Luisina. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Gossis, Silvina. Laboratorio Varifarma S.A; ArgentinaFil: Cembal, Sebastián. Laboratorio Varifarma S.A; ArgentinaFil: Dominguez, Mario C.. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; ArgentinaFil: Bertoncini, Carlos Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Empresa Dominzguezlab S.r.l.; Argentin

Pharmacokinetic and bioequivalence study of Tenofovir Disoproxil Fumarate under fasting conditions on Argentine healthy-volunteers. Optimization and validation of SPE-LC-MS/MS for determination of Emtricitabine, Lamivudine and Tenofovir in human plasma

A pharmacokinetic study based on single oral administration of Tenofovir disoproxil fumarate 300 mg (tablets) to Argentinean male volunteers under fasting conditions is presented. The obtained values for test and reference products were 238±62 and 261±73 ng mL-1 for Cmax; 1658±466 and 1801±529 ng mL-1 h for AUC0–48h; 1845±579 and 2015±639 ng mL-1 h for AUC0–∞, respectively. The 90% confidence intervals obtained by analysis of variance were 85.0-97.2% for ln-Cmax, 87.2-97.9% for ln-AUC0–48h and 85.5-98.1% for ln-AUC0–∞, which are within the acceptance range of 80-125%. Both products were bioequivalent in terms of rate and extent of drug absorption and therefore interchangeable. The analytical methodology was optimized and validated for determination of Emtricitabine (FTC), Lamivudine (3TC) and Tenofovir (TFV) in human plasma samples; which is the pharmaceutical combination most commonly used for treating HIV-infected patients. The analytical methodology was based on solid phase extraction (SPE) using Oasis® MCX mixed-mode cartridges coupled to Liquid Chromatography and electrospray tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS). The analytical methodology was validated according to the US Food and Drug Administration guidelines. Under optimized conditions, the analytical methodology lead to work within a clinical of 11-5434, 11-5452 and 13-397 ng mL-1 for FTC, 3TC and TFV, respectively; resulting wider than others previously reported. The intra and inter batch precision (%RSD) across three validation runs was less than 14%. The accuracy determined at four QC levels (LOQ, Low, Middle and High) was within 13%, in terms of percent relative error.Fil: Hunzicker, Gabriel Alejandro. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Hein, Gustavo Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Baldo, Matias Nicolas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Hernández, Silvia Raquel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Altamirano, Jorgelina Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Provincia de Mendoza. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales. Universidad Nacional de Cuyo. Instituto Argentino de Nivología, Glaciología y Ciencias Ambientales; Argentin

Ultra sensitive microfluidic immunosensor for determination of clenbuterol in bovine hair samples using electrodeposited gold nanoparticles and magnetic microparticles as bio-affinity platform

In this article, we report the first integrated microfluidic immunosensor coupled to a screen-printed carbon electrode (SPCE) applied to determination of clenbuterol (CLB) in bovine hair samples. CLB is a member of the β2-agonist drugs which is used in animal production and is banned in Argentine and the European Union. It represents a potential risk and has to be carefully monitored to avoid the illegal use of high amounts of this compound that could result in human food poisoning. In order to perform the CLB detection, the SPCE was modified by gold nanoparticles (AuNPs) electrodeposition. Quantitative determination of CLB was carried out using a competitive indirect immunoassay, method based on the use of anti-CLB antibodies immobilized on magnetic micro particles. The CLB present in bovine hair samples competes immunologically with alkaline phosphatase (AP) enzyme-labeled CLB conjugate for the anti-CLB specific antibodies. Later, p-aminophenyl phosphate was converted to p-aminophenol by AP, and the electroactive product was quantified on AuNPs/SPCE at +0.1 V. The limit of detection for electrochemical method was 0.008 ng mL−1 and the intra- and inter-assay coefficients of variation were below 6%. This being a veterinary control tool very useful for rapid, sensitive and selective detection of CLB in an “in vitro” technique.Fil: Regiart, Daniel Matias Gaston. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Fernández Baldo, Martín Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Spotorno, Viviana G.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Recursos Naturales. Instituto de Recursos Biológicos; ArgentinaFil: Bertolino, Franco Adrián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Raba, Julio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico San Luis. Instituto de Química de San Luis; Argentin

Nanostructured electrode using CMK-8/CuNPs platform for herbicide detection in environmental samples

A simple and sensitive nanostructured electrode was designed by electrodepositing copper nanoparticles (CuNPs) on a screen-printed carbon electrode (SPCE) modified with an ordered mesoporous carbon (CMK-8) in order to detect glyphosate (GLY) in river water samples. CMK-8 was immobilized onto an SPCE using chitosan polymer (CH) as a binder, followed by CuNPs electrodeposition. CuNPs/CMK-8-CH/SPCE was characterized by cyclic voltammetry, electrochemical impedance spectroscopy, transmission electron microscopy, scanning electron microscopy, energy dispersive spectrometry, and N2 adsorption–desorption isotherms. CMK-8 has a high specific surface area, large pore volume, uniform mesostructure, good conductivity, and excellent electrochemical activity. This mesoporous carbon material provides the sensitivity for the indirectly electrochemical determination of GLY by square wave voltammetry. The anodic currents increased proportionally to the concentrations of GLY due to a complexation process. The detection limit achieved by the designed electrochemical device was 0.09 ng mL−1 with a linear range from 0.3 ng mL−1 to 19.75 ng mL−1 with intra and inter-assay coefficients of variation below 5%. This electrochemical platform represents an attractive strategy for on-site GLY determination in environmental samples.Fil: Regiart, Daniel Matias Gaston. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Fernández Baldo, Martín Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Pamela Navarro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Pereira, Sirley Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Raba, Julio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Messina, Germán Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentin

Microfluidic fluorescence immunosensor using ZnONFs for invasive aspergillosis determination

Galactomannan (GM) is a polysaccharide cell-wall component released by Aspergillus species, used as a biological marker for invasive aspergillosis (IA) screening. A fluorescence microfluidic immunosensor for GM detection was developed by using ZnO nanoflowers (ZnONFs) synthesized by a wet chemical method and characterized by scanning electron microscopy and energy dispersive spectrometry. The ZnONFs were covalently linked to the microfluidic channel through a silanization process with 3-aminopropyl triethoxysilane and then used as a bioaffinity nanoplatform for the immobilization of monoclonal anti-GM antibodies, which react specifically with the GM present in human serum samples.Subsequently, the GM amount that reacted was quantified by an HRP-anti-GM antibody (type sandwich immunoassay), which in the presence of H2O2 catalyzes the oxidation of 10-acetyl-3,7-dihydroxyphenoxacine to a highly fluorescent resorufin, which was measured by a laser-induced fluorescence (LIF) detector (excitation at 561 nm and emission at 585 nm).The measured fluorescence is directly proportional to the concentration of GM present in the patient serum sample. The fluorescence method was compared with a previously published electrochemical method, and a commercial ELISA test, showing outstanding properties. This immunosensor can be applied to the IA early diagnosis since it offers several attractive advantages such as high selectivity and sensitivity.Fil: Piguillem Palacios, Sofía Viviana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Regiart, Daniel Matias Gaston. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Bertotti, Mauro. Universidade de Sao Paulo; BrasilFil: Raba, Julio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Messina, Germán Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; ArgentinaFil: Fernández Baldo, Martín Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto de Química de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Química de San Luis; Argentin