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    Multiplex Real-Time PCR Assay Using TaqMan Probes for the Identification of Trypanosoma cruzi DTUs in Biological and Clinical Samples

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    Background: Trypanosoma cruzi has been classified into six Discrete Typing Units (DTUs), designated as TcI–TcVI. In order to effectively use this standardized nomenclature, a reproducible genotyping strategy is imperative. Several typing schemes have been developed with variable levels of complexity, selectivity and analytical sensitivity. Most of them can be only applied to cultured stocks. In this context, we aimed to develop a multiplex Real-Time PCR method to identify the six T. cruzi DTUs using TaqMan probes (MTq-PCR).Methods/Principal Findings: The MTq-PCR has been evaluated in 39 cultured stocks and 307 biological samples from vectors, reservoirs and patients from different geographical regions and transmission cycles in comparison with a multi-locus conventional PCR algorithm. The MTq-PCR was inclusive for laboratory stocks and natural isolates and sensitive for direct typing of different biological samples from vectors, reservoirs and patients with acute, congenital infection or Chagas reactivation. The first round SL-IR MTq-PCR detected 1 fg DNA/reaction tube of TcI, TcII and TcIII and 1 pg DNA/reaction tube of TcIV, TcV and TcVI reference strains. The MTq-PCR was able to characterize DTUs in 83% of triatomine and 96% of reservoir samples that had been typed by conventional PCR methods. Regarding clinical samples, 100% of those derived from acute infected patients, 62.5% from congenitally infected children and 50% from patients with clinical reactivation could be genotyped. Sensitivity for direct typing of blood samples from chronic Chagas disease patients (32.8% from asymptomatic and 22.2% from symptomatic patients) and mixed infections was lower than that of the conventional PCR algorithm.Conclusions/Significance: Typing is resolved after a single or a second round of Real-Time PCR, depending on the DTU. This format reduces carryover contamination and is amenable to quantification, automation and kit production.This work received financial support from the Ministry of Science and Technology of Argentina [PICT 2011-0207 to AGS] and the National Scientific and Technical Research Council in Argentina (CONICET) [PIP 112 2011-010-0974 to AGS]. Work related to evaluation of biological samples was partially sponsored by the Pan-American Health Organization (PAHO) [Small Grants Program PAHO-TDR]; the Drugs and Neglected Diseases Initiative (DNDi, Geneva, Switzerland), Wellcome Trust (London, United Kingdom), SANOFI-AVENTIS (Buenos Aires, Argentina) and the National Council for Science and Technology in Mexico (CONACYT) [FONSEC 161405 to JMR]

    Annexe 1. Complexes agro-industriels

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    International audienc

    Annexe 1. Complexes agro-industriels

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    Les processus de développement que connaissent le continent africain et le Cameroun en particulier se sont traduits par l’implantation, dans diverses régions écologiques, de plusieurs complexes agro-industriels tels ceux de la Société pour l’expansion et la modernisation de la riziculture de Yagoua (Semry), de la Mission d’étude et d’aménagement de la vallée supérieure de la Bénoué (MEAVSDB) dans le Nord-Cameroun, de la Société sucrière du Cameroun (Sosucam) ou de la Cameroon Sugar Company (C..

    Parle-t-on d'automédication lors des consultations de médecine générale ? (enquête par observation directe auprès de 126 médecins de Loire-Atlantique et Vendée en 2012)

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    Introduction : L'automédication semble actuellement en progression. Les médecins sont demeurés longtemps réticents à cette pratique d'auto-soin. Nous avons souhaité étudier la communication sur l'automédication lors des consultations de médecine générale dans les départements de Loire-Atlantique et de Vendée. Cette enquête introduit un ensemble de recherches multidisciplinaires visant à dresser un état des lieux des pratiques d'auto-soin. Méthodes : Une enquête par observation directe a été réalisée par 51 internes de médecine générale de l'université de Nantes chez 126 maîtres de stage universitaires en mai-juin 2012. Durant la phase d'observation, les internes devaient recueillir dans une grille de 18 items des éléments caractérisant la rencontre de soin observée. Résultats : L'analyse a porté sur 1597 rencontres de soins (59,1% de patients féminins) au cours desquelles 42,2% des patients ont mentionné spontanément avoir eu recours à l'automédication avant de consulter. Cette mention de l'automédication était plus souvent le fait des femmes (OR = 1,35 [1,09-1,67]). Dans 49,5% des consultations, les médecins ont cherché à explorer l'automédication de leurs patients. Ce chiffre s'est élevé à 57,9% lorsque les patients en avaient parlé auparavant. 49,9% des médecins en ont tenu compte au moment de la prescription en diminuant la prescription d'examens complémentaires (OR=0,61 [0,40-0,93]) et les recours aux spécialistes (OR=0,55 [0,33-0,91]). Conclusion : L'automédication ne semble pas être un sujet tabou entre patients et médecins mais son évocation en consultation devrait être généralisée afin d'ancrer la décision de soins dans une démarche centrée sur le patient et fondée sur les preuves.NANTES-BU Médecine pharmacie (441092101) / SudocSudocFranceF
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