Estudos sôbre a possível ação mutagênica de antibióticos em bactérias

Four antibiotics have been tested (penicillin, streptomycin, chloranphenicol and aureomycin), with relation to induction of mutations in a strain of S. typhimurium triptophanelles and in a strain of X. campestris also deficient for tryptophan. No mutagenic action was detected in any case analysed.Foram estudados 4 antibióticos (penicilina, estreptomicina, cloranfenicol e aureomicina) com relação a indução de mutações em uma linguagem de S. tuphimurium deficiente para triptofano e uma linhagem de X. campestris deficiente para o mesmo amino-ácido. Não foi verificada atividade mutagênica em nenhum dos antibióticos, em relação aos dois fatores estudados

Secreção de enzimas mediada pelo pH do ambiente em isolados patogênicos e endofíticos do fungo Colletotrichum

Em fungos, um sistema de regulação gênica garante que enzimas sejam secretadas predominantemente em valores de pH do ambiente próximos aos pH ótimos de atividade correspondentes. Embora muita informação tenha sido acumulada sobre essa resposta adaptativa, não existem estudos envolvendo fungos fitopatogênicos, endofíticos e entomopatogênicos, bem como sobre outros aspectos relacionados às interações fungo-hospedeiro. No presente trabalho foi comparado, em meio sólido, o efeito do pH do ambiente na secreção das enzimas amilase, celulase, lipase, pectinase e protease por isolados endofíticos, fitopatogênico e entomopatogênicos pertencentes a diferentes espécies de Colletotrichum. Para todas as enzimas e em todos os isolados, observou-se um padrão de secreção dependente dos valores do pH do ambiente. Isolados endofíticos e patogênicos apresentaram padrões distintos de secreção de protease, com ótimos em pH de crescimento alcalino e ácido, respectivamente. Em meio líquido, uma fosfatase ácida Pi-repressível, secretada por um isolado endofítico, respondeu ao pH do ambiente, apresentando um aumento de 14 vezes na sua atividade específica durante o crescimento do fungo em meio ácido, quando comparado a meio alcalino. Além disso, foi clonada parte do gene pacC de Colletotrichum, o qual codifica um fator de transcrição responsável pela regulação dependente do pH do ambiente. É plausível a hipótese de que o pH ambiente é um fator de amplo espectro controlando a secreção enzimática durante as interações fungo-hospedeiro por meio de um circuito genético conservado.In fungi a genetic system ensures that enzymes are secreted mainly at ambient pH values corresponding to their optima of activity. Although a great deal of information has been obtained concerning this environmental response, there is a lack of studies involving phytopathogenic, endophytic and entomopathogenic fungi as well as different aspects of fungus-host interactions. This study compares in a plate-clearing assays, the effect of ambient pH in the secretion of amylase, cellulase, lipase, pectinase and protease by endophytic, phytopathogenic, and entomopathogenic isolates belonging to several species of Colletotrichum. All enzymes were secreted in a pH-dependent manner by all isolates. Endophytes and pathogens showed distinct patterns of protease secretion, with optima at alkaline and acid growth conditions, respectively. In liquid medium, a Pi-repressible acid phosphatase of an endophytic isolate responded to ambient pH, having a 14-fold increase in secreted specific activity at acid pH, as compared to alkaline pH. Furthermore, part of a Colletotrichum pacC homologue gene, coding for a transcriptional factor responsible for pH-regulated gene expression, was cloned. Ambient pH seems to be a general factor controlling enzyme secretion in fungus-host interactions through a conserved genetic circuit

Meios de cultura e produção de conídios em Metarhizium Anisopliae(Metsch) Sorokin

It was determined the production of Metarhizium anisopliae conidiain Petri dishes containing both complete medium and media with differents rice concentrations, The more productive isolates were M, P and E9 and it was noted that in rice medium high conidia production where obtained with 60 g of rice per liter.Foi estudada a produção de conídios em meio completo e em meio contendo diferentes concentrações de farinha de arroz, no fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae. As linhagens mais produtivas em meio completo foram M, E6, A4 e E9; em meio de arroz, verificou-se que maior produção ocorria quando o arroz era adicionado na concentração de 60 g/l

Crescimento e esporulação de Metarhizium flavoviride var. Flavoviride em meios de cultura e regimes de luz

Entomopathogenic fungi from the genus Metarhizium are largely used for the biological control of agricultural pests by conidia spreading on the field. Although conidia production is well studied in M. anisopliae, only few research studies were done in M. flavoviride. The present work was carried out alming to evaluate the Mycelial growth and sporulation of the entomopathogenic fungus Metarhizium flavoviride var. flavoviride growing at 27 ± 2°C on Potato-dextrose-agar (PDA), Czapek-agar (CZP) and a complete agar medium (CM) under three lighting regimes, (continuous illumination, light/dark cycle and an black light/dark cycle) were investigated. A completely randomized 3 × 3 (culture media × lighting regime) factorial design with four replicates was used. The best mycelial growth and sporulation occurred on the PDA and CM media under continuous illumination (PFungos entomopatogênicos do genêro Metarhizium são empregados no controle biológico de pragas agrícolas por meio da dispersão de seus conídios no campo. Embora a produção de conídios em M. anisopliae esteja bem estudada, poucas pesquisas a respeito existem na espécie M. flavoviride. O presente trabalho foi realizado para avaliar o efeito de três meios de cultura, batata-dextrose-ágar (BDA), Czapek-ágar (CZP) e meio completo (MC), e três regimes de luminosidade, claro contínuo, alternância com luz do dia/escuro e luz negra/escuro, sobre o crescimento miceliano e esporulação do fungo entomopatogênico Metarhizium flavoviride var. flavoviride. O experimento foi realizado em câmara de incubação à temperatura de 27 ± 2°C. Empregou-se um delineamento experimental inteiramente casualizado, em arranjo fatorial 3°C 3 (meios de cultura e regime de luminosidade) com quatro repetições. As melhores condições para o crescimento miceliano e esporulação foram conseguidas tanto no meio de cultura BDA como no MC quando combinados com o regime claro contínuo (

The Diversity of Endophytic Methylotrophic Bacteria in an Oil-Contaminated and an Oil-Free Mangrove Ecosystem and Their Tolerance to Heavy Metals

Methylobacterium strains were isolated from mangrove samples collected in Bertioga, SP, Brazil, from locations either contaminated or uncontaminated by oil spills. The tolerances of the strains to different heavy metals were assessed by exposing them to different concentrations of cadmium, lead, and arsenic (0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, 2 mM, 4 mM, and 8 mM). Additionally, the genetic diversity of Methylobacterium spp. was determined by sequence analysis of the 16S rRNA genes. The isolates from the contaminated locations were grouped, suggesting that oil can select for microorganisms that tolerate oil components and can change the methylotrophic bacterial community. Cadmium is the most toxic heavy metal assessed in this work, followed by arsenic and lead, and two isolates of Methylobacterium were found to be tolerant to all three metals. These isolates have the potential to bioremediate mangrove environments contaminated by oil spills by immobilizing the heavy metals present in the oil

Comportamento ''in vitro" de uma bactéria fitopatogênica frente a diversos antibióticos

The present paper deals with study of the resistance against five antibiotics in a phytopathogenic bacterium Xanthomonas campestris (Pammel) Dowson. When the antibiotics were added to the solid medium in which the bacteria were grown, the colonies resistant to the streptomycin and erythromycin appeared even in the highest concentration used; as to the penicillin, aureomycin and cloranfenicol when in concentrations higher than 200 mcg/ml, 0,3 mcg/ml and 128 mcg/ml respectively, resistant colonies did not appear. So, the results show that the penicillin was the least efficient antibiotic and aureomycin the most effetive to Xanthomonas campestris.Foi estudada a resistência da bactéria fitopatogênica Xanthomonas campestris com relação a cinco antibióticos. Quando os antibióticos foram adicionados ao meio sólido no qual a bactéria iria se desenvolver, colônias resistentes à estreptomicina e éritromicina, apareceram até nas mais altas concentrações usadas. No caso da penicilina, aureomicina e cloranfenicol, em concentrações superiores a 200 mcg/ml, 0,3 mcg/ml e 128 mcg/ml respectivamente, não apareceram colônias resistentes. Os resultados mostraram que a penicilina foi o antibiótico menos efetivo e a aureomicina a mais efetiva em inibir o crescimento de X. campestris. Os resultados sugerem também que o modêlo de resistência à estreptomicina e éritromicina é o de um só passo enquanto que o modêlo de resistência aos três outros antibióticos ensaiados, é o de múltiplos passos

ENZYME-PRODUCING FUNGI ASSOCIATED TO AQUATIC MACROPHYTES OF THE NEGRO RIVER, MANAUS

O ambiente amazônico se destaca por exuberante biodiversidade, principalmente, em relação aos micro-organismos como fungos e bactérias associados a diferentes espécies de plantas; nesse ambiente, a procura por enzimas produzidas por esses micro-organismos é de extrema importância, pois abre caminho para conhecer essa biodiversidade e transformá-la em potencial enzimático com várias finalidades. Fungos isolados de macrófitas aquáticas, encontradas no rio Negro, Manaus-AM foram selecionados por meio de diferentes testes enzimáticos. Nesta avaliação utilizaram-se diferentes protocolos para amilase, celulase, proteases, pectinase e lacase. A seleção dos isolados foi avaliada por meio de um índice enzimático representado por um halo ao redor das colônias, sendo considerado como parâmetro para todas as análises. Os métodos estatísticos multivariados aplicados foram: Análise de Componentes Principais (PCA) e Análise de Agupamento (AA). A identificação molecular das cepas foi realizada com o kit comercial Plant/Fungy DNA isolation (NorgenBiotekCorp), sendo identificados os seguintes fungos: Fusarium fugikuri, F. oxysporum (dois isolados), F. proliferatum, Phoma sp (dois isolados) Rhizopus orysae (dois isolados). Dentre os 8 isolados avaliados, todos produziram amilase (0,7 a 4,4 cm) e protease (1,9 a 4,4 cm), cinco produziram pectinase (1,8 a 2,9 cm) três produziram celulase (0,1 a 1,7 cm) e somente um isolado produziu lacase (1,04 cm). Por meio da análise multivariada foi possível verificar que os Fusarium spp. apresentaram maior similaridade quanto aos índices registrados. Esses resultados evidenciam o potencial desses micro-organismos em relação à produção de enzimas pelos fungos associados à macrófitas aquáticas encontradas no rio Negro em Manaus.Palavras-chaves: Fungos, enzimas, plantas aquáticas.The Amazonian environment stands out due to its exuberant biodiversity, speciously when it comes to microorganisms such as, fungi and bacteria associated to different plant species. In such an environment, the search for these microorganisms-producers of enzymes is of utter importance since it opens the way to learn more about this biodiversity so as to turn its enzymatic potential into various purposes. Fungi isolated from aquatic macrophytes found on the Negro river, were selected through enzymatic assays. The present assessment has utilized the protocols for amylase, cellulase, proteases, pectinase and laccase. The selection was evaluated by means of an enzymatic index, which represented a halo around the colony and was considered a parameter for all the analyses. The multivariate statistical methods applied were: Principle Component Analysis (PCA) and Cluster Analysis (AA). The molecular identification of the strains was performed with the commercial Plant / Fungi DNA isolation kit (Norgen Biotek Corp), and the following fungi were identified: Fusarium fugikuri, F. oxysporum, F. proliferatum, Phoma sp and Rhizopus orysae. Amongst the eight isolates assessed, every one produced amylase (0.7-4.4 cm) and protease (1.9-4.4 cm), however, five of them produced pectinase (1.8-2.9 cm), three cellulase (0.1-1.7 cm) and just one laccase (1.04 cm), as well. Through the multivariate analysis it was possible to verify that Fusarium spp., presented greater similarity to the recorded indexes. These results demonstrated the potential of these micro-organisms when it came to the production of enzymes by fungi associated to the aquatic macrophytes found on the Negro river in Manaus.Keywords: Fungy; enzymes; aquatic plants