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Rapid and Green Analytical Method for the Determination of Quinoline Alkaloids from Cinchona succirubra Based on Microwave-Integrated Extraction and Leaching (MIEL) Prior to High Performance Liquid Chromatography
Quinas contains several compounds, such as quinoline alkaloids, principally quinine, quinidine, cinchonine and cichonidine. Identified from barks of Cinchona, quinine is still commonly used to treat human malaria. Microwave-Integrated Extraction and Leaching (MIEL) is proposed for the extraction of quinoline alkaloids from bark of Cinchona succirubra. The process is performed in four steps, which ensures complete, rapid and accurate extraction of the samples. Optimal conditions for extraction were obtained using a response surface methodology reached from a central composite design. The MIEL extraction has been compared with a conventional technique soxhlet extraction. The extracts of quinoline alkaloids from C. succirubra obtained by these two different methods were compared by HPLC. The extracts obtained by MIEL in 32 min were quantitatively (yield) and qualitatively (quinine, quinidine, cinchonine, cinchonidine) similar to those obtained by conventional Soxhlet extraction in 3 hours. MIEL is a green technology that serves as a good alternative for the extraction of Cinchona alkaloids
Molécules lipidiques et embryogenèse somatique chez le Cichorium hybride 474 (implication des protéines de transfert de lipide et influence du miconazole)
Le cichorium hybride 474 constitue un modele d'etude interessant pour la caracterisation biochimique des stades precoces de l'embryogenese somatique. La presence de glycerol dans le milieu d'induction des fragments foliaires permet la synchronisation des premieres divisions embryogenes. Apres 5 jours, le transfert des explants sur milieu d'expression depourvu de glycerol conduit au developpement des embryons somatiques. L'etude du metabolisme lipidique a revele une augmentation de la teneur en acide linolenique, dans les explants foliaires, au cours du processus embryogene. L'analyse de la composition en acides gras d'un genotype de chicoree non-embryogene indique que ces variations ne sont pas uniquement le fait des conditions de culture mais sont a relier avec l'embryogenese somatique. L'utilisation de glycerol marque a indique une neosynthese de phospholipides au cours de la phase d'induction alors que la phase d'expression se caracterise par une accumulation de triglycerides. Une analyse par electrophorese des proteines extracellulaires suivie d'une immunodetection a revele la presence de proteines de transfert de lipides (ltps) chez la chicoree 474.Ces proteines de 9 kda sont secretees par les racines et les feuilles de cet hybride mais ne sont jamais detectees chez le genotype non-embryogene. Cet extrait proteique est constitue de ltps basiques secretees uniquement au cours de la phase d'expression mais egalement de ltps acides presentes des la phase d'induction, l'identite de ces proteines ayant ete confirmee par microsequencage. Enfin, les tissus foliaires induits a l'embryogenese sont caracterises par une elevation du rapport stigmasterol/sitosterol. Les effets du miconazole, inhibiteur de la c-14 demethylase, enzyme impliquee dans la biosynthese des sterols, ont ete observes au cours de la culture des fragments foliaires. Ce fongicide induit un blocage des divisions embryogenes et de la formation des embryons et provoque des modifications du profil proteique tissulaire. Ces differents elements constitueraient donc de bons candidats au titre de marqueurs de l'embryogenese somatique, nous permettant de progresser dans la comprehension de ce phenomene.LILLE1-BU (590092102) / SudocSudocFranceF