Fatty Acid Profile and Antimicrobial Activity of Rubus ulmifolius Schott Extracts Against Cariogenic Bacterium Streptococcus mutans

Abstract: The wild edible species Rubus ulmifolius is normally known as a source of several functional- natural compounds used in the traditional diet in several parts of the world. At present, few data are available in the literature about the biological property of its leaves, normally rich in phenolic acids, fatty acids, and other organic compounds with potential antimicrobial activity. Following this hypothesis, we have investigated the antibacterial activity of different dried leaved extracts against the main cariogenic bacterium, Streptococcus mutans. Standard antimicrobial-antibiofilm methods (MIC, MBC, MBIC) were performed to evaluate each extract's antimicrobial profile. In addition, the fatty acids (FA) quali-quantitative profile of R. ulmifolius leave extracts was assessed by reversed-phase HPLC-DAD/ELSD analysis. The results showed that the behavior of this bacterium with different extracts was strictly related to extraction method type, even though it was not related to fatty acid amount and composition, in fact, all the extracts showed similar, qualitative FA patterns, characterized by a concentration in the range from (25 to 36) % of saturated compounds. The methanolic extract showed the better result as antibacterial MIC 6.25 %. These preliminary results encourage further studies for the use of R. ulmifolius in mouthwashes or toothpaste with great anticaries activity

Optimization of Innovative Three-Dimensionally-Structured Hybrid Vesicles to Improve the Cutaneous Delivery of Clotrimazole for the Treatment of Topical Candidiasis

New three-dimensionally-structured hybrid phospholipid vesicles, able to load clotrimazole in a high amount (10 mg/mL), were obtained for the first time in this work by significantly reducing the amount of water (≤10%), which was replaced with a mixture of glycerol and ethanol (≈90%). A pre-formulation study was carried out to evaluate the effect of both the composition of the hydrating medium and the concentration of the phospholipid on the physico-chemical properties of hybrid vesicles. Four different three-dimensionally-structured hybrid vesicles were selected as ideal systems for the topical application of clotrimazole. An extensive physico-chemical characterization performed using transmission electron microscopy (TEM), cryogenic transmission electron microscopy (cryo-TEM), 31P-NMR, and small-angle X-ray scattering (SAXS) displayed the formation of small, multi-, and unilamellar vesicles very close to each other, and was capable of forming a three-dimensional network, which stabilized the dispersion. Additionally, the dilution of the dispersion with water reduced the interactions between vesicles, leading to the formation of single unilamellar vesicles. The evaluation of the in vitro percutaneous delivery of clotrimazole showed an improved drug deposition in the skin strata provided by the three-dimensionally-structured vesicles with respect to the commercial cream (Canesten®) used as a reference. Hybrid vesicles were highly biocompatible and showed a significant antifungal activity in vitro, greater than the commercial cream Canesten®. The antimycotic efficacy of formulations was confirmed by the reduced proliferation of the yeast cells at the site of infection in vivo. In light of these results, clotrimazole-loaded, three-dimensionally-structured hybrid vesicles appear to be one of the most innovative and promising formulations for the treatment of candidiasis infections

Diagnosi di Laboratorio per Infezione nel Distretto Parodontale, dalla PCR al “Molecular Beacon Array”

I dati forniti dall’ Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS) riportano che a fronte del 30% della popolazione italiana che presenta salute parodontale, il restante 70 % è affetta da una forma di patologia che può essere lieve (80%) e grave (5-20%). Si tratta dunque di una patologia che ha un forte impatto sociale, e quindi una notevole incidenza nei costi della spesa sanitaria. Si impone pertanto un corretto approccio in termini di: prevenzione della diagnosi clinica e di laboratorio, delle strategie terapeutiche. L ‘eziologia della malattia parodontale e di tipo infettivo ma rispetto ad altre patologie causate da microorganismi la parodontite presenta notevoli peculiarità, peculiarità che vanno ricercate nelle caratteristiche dei patogeni parodontali, in particolare : (a) sono descritte almeno 300 specie differenti ( la maggior parte non ancora identificate), (b) La maggior parte sono anaerobi, (c) difficoltà nella coltura, (d) crescita molto lenta ( anche 2 settimane), (e) presentano un' organizzazione a ” biofim complesso”. Attualmente, un aiuto importante alla diagnostica di laboratorio in parodontologia, viene dalla biologia molecolare. Le tecniche più efficaci e moderne attualmente in uso sono la Polymerase Chain Reaction (PCR), e la sua versione quantitativa : la PCR real-Time. Queste metodiche hanno come principio lo specifico riconoscimento di una sequenza di DNA/RNA appartenente al microorganismo patogeno. I vantaggi principali vengono rilevati nella sensibilita’ ( un incremento di 10-100 volte) e nel tempo del risultato (1- 6 ore ). Nonostante questi vantaggi notevoli , i metodi citati possono presentare una bassa specificità , dovuta a sequenze di DNA molto simili appartenenti a specie microbiche affini. 2 Recentemente un ulteriore passo nella diagnostica microbiologica molecolare e’ stato raggiunto con i “Molecular Beacon”MB, (Tyagi et al., 1996). I MB, ,rappresentano sonde fluorescenti a DNA con struttura circolare (Fig.1). La sonda presenta una sequenza nucleotidica che si apre (ed emette fluorescenza),solo se trova una regione complementare perfettamente identica nel DNA bersaglio del patogeno parodontale, questo determina il massimo grado di specificità possibile nella diagnostica molecolare, di conseguenza vengono ridotti i possibili falsi positivi della PCR tradizionale. L’utilizzo dei MB in un pannello analitico contenente tutte le specie rappresentative della malattia parodontale “molecular beacon array”, dispone per il clinico elementi più oggettivi e, soprattutto scientificamente/tecnologicamente più significativi, su cui basare la diagnosi di infezione per malattia parodontale

MUCA MUTATIONS IN CLINICAL ISOLATES OF PSEUDOMONAS AERUGINOSA

INTRODUZIONE Il genere Pseudomonas aeruginosa rappresenta un’importante patogeno isolato nelle infezioni ospedaliere, è all’attenzione in campo sanitario per la sua multiresistenza ai farmaci antimicrobici, infatti è in grado di esprimere resistenza verso una lunga serie di antibiotici come amminoglicosidi, fluorochinoloni e cefalosporine. In campo umano questa specie è coinvolta in diverse malattie infettive a decorso cronico come la fibrosi cistica. Le resistenze agli antimicrobici in questo microorganismo sono dovute a diversi meccanismi genetici come mutazioni lungo il cromosoma batterico. Lo scopo del presente lavoro è stato quello di verificare, in isolati nosocomiali di P. aeruginosa, le mutazioni lungo il gene mucA, un fattore sigma responsabile nella produzione di alginato e correlato alle resistenze ai farmaci

LABORATORY DIAGNOSIS FOR WEST NILE VIRUS BY AN INTEGRATED PROCEDURE RT-PCR-CAPILLARY SEQUENCING

La malattia da virus del Nilo occidentale è provocata dal virus West Nile, (WNV), un virus appartenente aella famiglia dei Flaviviridae. Il virus è diffuso in Africa, Asia Occidentale, Europa, Australia, America. Il ciclo di trasmissione naturale del WNV coinvolge: zanzare del genere Culex spp. come serbatoio e vettore biologico, e uccelli come ospiti amplificatori. I sintomi più gravi si presentano in meno dell’1% dei soggetti infetti e riguarda diverse complicazioni neurologiche. La maggior parte delle encefaliti da WNV rimangono imprevedibili e difficili da controllare, questo è dovuto anche a diverse problematiche che si possono riscontrare nella diagnosi di laboratorio. In questo lavoro è stato valutato un sistema molecolare integrato Nested PCR real time -Sequenziamento capillare, per la ricerca di WNV-RN

Absence of epicardial coronary stenosis in patients with systemic sclerosis with severe impairment of coronary flow reserve

Systemic sclerosis (SSc) is known to be characterised by a diffuse microvascular pathological process leading to cutaneous and visceral changes and to related clinical manifestations. Both necropsy studies and in vivo investigations have shown that in a number of patients with SSc there is evidence of a coronary microvascular disease, while coronary artery disease does not exceed that seen in a control group. In particular, myocardial perfusion defects on thallium-201 scintigraphy usually occur in the absence of angiographic evidence of coronary stenosis. Recently, we used a new and non-invasive method of contrast enhanced, transthoracic, second harmonic echo Doppler in patients with SSc to evaluate the coronary flow reserve (CFR), a functional variable measuring the ability of the coronary microvasculature to adapt its lumen to a vasodilating stimulus

A rare case of abdominal lymphadenopathy and fever

INGLES

Early Prognostic Stratification of Clostridioides difficile Infection in the Emergency Department: The Role of Age and Comorbidities

Clostridioides difficile infection (CDI) represents a significant cause of morbidity and mortality, mainly in older and frail subjects. Early identification of outcome predictors, starting from emergency department (ED) admission, could help to improve their management. In a retrospective single-center study on patients accessing the ED for diarrhea and hospitalized with a diagnosis of CDI infection, the patients’ clinical history, presenting symptoms, vital signs, and laboratory exams at ED admission were recorded. Quick sequential organ failure assessments (qSOFA) were conducted and Charlson’s comorbidity indices (CCI) were calculated. The primary outcomes were represented by all-cause in-hospital death and the occurrence of major cumulative complications. Univariate and multivariate Cox regression analyses were performed to establish predictive risk factors for poor outcomes. Out of 450 patients, aged > 81 years, dyspnea at ED admission, creatinine > 2.5 mg/dL, white blood cell count > 13.31 × 109/L, and albumin < 30 µmol/L were independently associated with in-hospital death and major complications (except for low albumin). Both in-hospital death and major complications were not associated with multimorbidity. In patients with CDI, the risk of in-hospital death and major complications could be effectively predicted upon ED admission. Patients in their 8th decade have an increased risk independent of comorbidities

LABORATORY DIAGNOSIS OF LEISHMANIA INFANTUM INFECTION

INTRODUZIONE La leishmaniosi è una zoonosi parassitaria causata da protozoi flagellati del genere Leishmania. In Italia la sola specie presente è L. infantum appartenente al complex donovani, i cui ceppi viscerotropi sono responsabili della leishmaniosi viscerale umana e della leishmaniosi canina, mentre i ceppi dermotropi sono responsabili della leishmaniosi cutanea nell'uomo. Nel nostro paese i vettori accertati appartengono al genere Phlebotomus e il cane rappresenta l'unico serbatoio di rilevanza epidemiologica. Le forme flagellate del parassita si moltiplicano nell’intestino dell’insetto vettore e la femmina del flebotomo può inocularle nella sede intradermica dell’ospite durante il pasto di sangue. Nell’ uomo la sintomatologia e i segni clinici risultano multiformi e talvolta difficili da inquadrare, per cui la diagnosi di laboratorio tramite sistemi cito-istologici, sierologici o molecolari, può rappresentare un valido aiuto per il clinico. Lo scopo del lavoro è stato verificare un sistema molecolare per il rilevamento di L. infantum, basato sulla tecnologia della PCR real time