Expression of CPPED1 in human trophoblasts is associated with timing of term birth

Understanding of timing of human parturition is incomplete. Therefore, we carried out proteomic analyses of full-term placentas from uncomplicated pregnancies to identify protein signatures associated with the onset of spontaneous delivery. We found quantitative associations of 10 proteins with spontaneous term birth, evident either in the basal or in the chorionic plates or in both. Additional 18 proteins were associated according to the location within placenta indicating local variations in protein amounts. Calcineurin-like phosphoesterase domain-containing 1 (CPPED1), a phosphatase previously suggested dephosphorylating AKT1/PKB, was one of the identified proteins. qRT-PCR revealed the mRNA level of CPPED1 was higher in elective caesarean deliveries than in spontaneous births, while immunohistochemistry showed CPPED1 in cytotrophoblasts, syncytiotrophoblasts and extravillous trophoblasts. Noteworthy, phosphorylation status of AKT1 did not differ between placentas from elective caesarean and spontaneous deliveries. Additionally, analyses of samples from infants indicated that single-nucleotide polymorphisms rs11643593 and rs8048866 of CPPED1 were associated with duration of term pregnancy. Finally, post-transcriptional silencing of CPPED1 in cultured HTR8/SVneo cells by siRNAs affected gene expression in pathways associated with inflammation and blood vessel development. We postulate that functions regulated by CPPED1 in trophoblasts at choriodecidual interphase have a role in the induction of term labour, but it may be independent of AKT1

NHLRC2 variants identified in patients with fibrosis, neurodegeneration, and cerebral angiomatosis (FINCA) : characterisation of a novel cerebropulmonary disease

A novel multi-organ disease that is fatal in early childhood was identified in three patients from two non-consanguineous families. These children were born asymptomatic but at the age of 2 months they manifested progressive multi-organ symptoms resembling no previously known disease. The main clinical features included progressive cerebropulmonary symptoms, malabsorption, progressive growth failure, recurrent infections, chronic haemolytic anaemia and transient liver dysfunction. In the affected children, neuropathology revealed increased angiomatosis-like leptomeningeal, cortical and superficial white matter vascularisation and congestion, vacuolar degeneration and myelin loss in white matter, as well as neuronal degeneration. Interstitial fibrosis and previously undescribed granuloma-like lesions were observed in the lungs. Hepatomegaly, steatosis and collagen accumulation were detected in the liver. A whole-exome sequencing of the two unrelated families with the affected children revealed the transmission of two heterozygous variants in the NHL repeat-containing protein 2 (NHLRC2); an amino acid substitution p.Asp148Tyr and a frameshift 2-bp deletion p.Arg201GlyfsTer6. NHLRC2 is highly conserved and expressed in multiple organs and its function is unknown. It contains a thioredoxin-like domain; however, an insulin turbidity assay on human recombinant NHLRC2 showed no thioredoxin activity. In patient-derived fibroblasts, NHLRC2 levels were low, and only p.Asp148Tyr was expressed. Therefore, the allele with the frameshift deletion is likely non-functional. Development of the Nhlrc2 null mouse strain stalled before the morula stage. Morpholino knockdown of nhlrc2 in zebrafish embryos affected the integrity of cells in the midbrain region. This is the first description of a fatal, early-onset disease; we have named it FINCA disease based on the combination of pathological features that include fibrosis, neurodegeneration, and cerebral angiomatosis.Peer reviewe

COBAS C 311 analysaattorien verifiointi : Kol, Kol-HDL, Kol-LDL & Trigly -tutkimukset

Cobas c 311 on kliinisen kemian analysaattori, jonka valmistaja on Roche Diagnostics. Analysaattorin mittausperiaate lipiditutkimuksille on fotometrinen. Valmistaja on suorittanut menetelmän validoinnin, eli määrittänyt menetelmän ja laitteiston suorituskykyominaisuudet. Laboratorion on todennettava verifioinnilla, että nämä laitevalmistajan määrittämät suorituskykyominaisuudet toteutuvat ja analysaattorit ovat sopivat laboratorion käyttötarkoituksiin. Kolesteroli on tärkeä solukalvojen rakenneosa. Kolesterolipitoisuutta nostaa runsas eläinperäinen ravinto. HDL-kolesteroli koostuu apolipoproteiineista ja fosfolipideistä. Sitä sanotaan hyväksi kolesteroliksi, sillä se kuljettaa pahaa kolesterolia pois verisuonten seinämistä ja kudoksista. HDL-kolesterolin matala pitoisuus lisää riskiä sairastua verisuonisairauksiin. Matalaa pitoisuutta aiheuttaa vyötärölihavuus. LDL-kolesteroli koostuu suurimmaksi osaksi kolesteroliesteristä sekä apolipoproteiini B:stä. LDL-kolesteroli kuljettaa kolesterolia kudoksiin muuttamalla sen vesiliukoiseen muotoon. LDL-kolesterolipitoisuuden nousu aiheuttaa kolesterolin kertymistä verisuonten seinämiin. Triglyseridit ovat glyserolista ja rasvahapoista muodostuneita rasvoja, joita elimistön solut tarvitsevat energianlähteeksi. Triglyseridipitoisuuden nousu altistaa sydän- ja verisuonisairauksille. Tämän opinnäytetyön tarkoituksena oli suorittaa näiden tutkimusten verifiointi Cobas c311 analysaattoreille. Tavoitteena oli varmistaa, että analysaattorit tuottavat luotettavia ja laadukkaita tuloksia potilaille. Tehtävänä oli toistettavuuden testaaminen sarjojen sisäisesti sekä sarjojen välisesti ja potilasnäytevertailun toteuttaminen. Tulokset analysoitiin tilastollisin menetelmin ja niiden perusteella todettiin analysaattorien vastaavan menetelmälle määritettyjä suorituskykyominaisuuksia riittävän hyvin. Cobas c 311 -analysaattorien väliset korrelaatiot, ja korrelaatiot referenssilaitteeseen, olivat erinomaiset.The Cobas c 311 is a clinical chemistry analyser manufactured by Roche Diagnostics. The method used for lipid assays is photometric. The manufacturer has validated the analyser, which means that the analytical performance has been defined. All laboratories must prove that the analytical performance lives up to these qualities defined by the manufacturer and that the analyser is suitable for the aimed purpose. Cholesterol is an important structural component of cell membranes. The concentration of cholesterol is elevated by heavy consumption of animal products in one’s diet. HDL-cholesterol is composed of apolipoproteins and phospholipids. It’s called the good cholesterol due to its ability to remove harmful bad cholesterol from tissue and the surface of blood vessels. Low concentration increases the risk of cardiovascular disease. LDL-cholesterol transports cholesterol into tissue by making it soluble. High concentration of LDL leads to cholesterol build up on the surface of blood vessels. Triglycerides are fats composed of glycerol and fatty acids. It is an important source of energy for cells in the body. High concentration leads to an increased risk of cardiovascular disease. The purpose of this thesis was to perform the verification of the Cobas c 311 analysers. The aim was to ensure that the analytical performance is equivalent to that defined by the manufacturer and thus the results are reliable and of good quality. The task was to measure repeatability within-run, reproducibility between-run and to compare result levels between Cobas c 311 analysers and the reference analyser using patient samples. The results were analysed statistically and based on these results the analytical performance of the Cobas c 311 analysers was found equivalent to the defined qualities. All three analysers correlated well compared to each other and with the reference analyser

Surfactant proteins and cytokines in inflammation-induced preterm birth:experimental mouse model and study of human tissues

Abstract Prematurity is the main cause of morbidity and mortality in infants. In 25–40% of the cases preterm birth is associated with intrauterine inflammation. Surfactant proteins (SPs) A, C, and D have roles in innate immunity. In the female reproductive tract and in amniotic fluid (AF), these proteins may modulate the inflammatory responses leading to preterm birth. The aim of the present study was to establish a mouse model of lipopolysaccharide (LPS)-induced preterm birth of live-born pups and to study the activation of the innate immune system. By using mice overexpressing either rat SP-A (rSP-A) or rSP-D the roles of SP-A and SP-D in inflammatory responses were investigated. In addition, the expression of SP-C in gestational tissues was analyzed. The association of SP-C single nucleotide polymorphism (Thr138Asn) with spontaneous preterm birth and preterm premature rupture of membranes (PPROM) was investigated in a homogenous northern Finnish population of mothers and infants. Wild-type (WT) mice were injected with a single dose of intraperitoneal LPS at 16 or 17 days of gestation (term 19–20 days) leading to preterm delivery of live-born fetuses. After LPS, cytokine levels increased rapidly in maternal serum and in the uterus. This maternal inflammatory response was followed by the modest inflammatory activation in fetal and feto-maternal compartments. In fetal lung the expression of SP-A and SP-D was downregulated. The overexpression of SP-A or SP-D was evident in gestational tissues of rSP-A or rSP-D mice, respectively. In addition, excess of these proteins was detected in AF. Overexpression of either rSP-A or rSP-D modulated the LPS-induced inflammatory response related to preterm birth. Most notably, the expression of IL-4 and IL-10 in uteri and IL-10 in fetal membranes was lower in overexpressing animals. SP-C was detected in mouse and human placentas, fetal membranes, and in uteri of pregnant mice. The fetal SP-C polymorphism strongly associated with the duration of PPROM. The present study provides new information about the molecular events in inflammation induced preterm birth, particularly about the roles of cytokines and SPs in this process. Understanding of the mechanisms involved in preterm parturition may provide means for prevention and management of preterm births in the future.Tiivistelmä Ennenaikaisuus on suurin vastasyntyneiden terveyttä ja henkeä uhkaava vaara. Kohdunsisäiset tulehdusreaktiot ovat ennenaikaisten synnytysten yleisimpiä aiheuttajia. Surfaktanttiproteiinit (SP:t) A, C ja D osallistuvat synnynnäisen immuniteetin säätelyyn. Voidaan olettaa, että synnytyskanavassa ja lapsivedessä surfaktanttiproteiinit säätelevät ennenaikaiseen synnytykseen johtavia tulehdusreaktioita. Tutkimuksen tavoitteena oli luoda hiirimalli, jossa ennenaikainen synnytys saadaan aikaan lipopolysakkaridin (LPS:n) injektiolla vatsaonteloon. Hiirimallin avulla tutkittiin puolustusjärjestelmän aktivaatiota sekä äidin että sikiön kudoksissa. Rotan SP-A:ta (rSP-A:ta) tai rSP-D:tä yli-ilmentävien hiirten avulla selvitettiin, muuttavatko nämä proteiinit ennenaikaiseen syntymään johtavaa vastetta. Lisäksi määritettiin SP-C:n ilmentyminen hiiren ja ihmisen kohdussa, sikiökalvoilla ja istukassa. SP-C-geenin yhden emäksen polymorfian (Thr138Asn) liittymistä ennenaikaiseen synnytykseen tai sikiökalvojen puhkeamiseen tutkittiin homogeenisessä pohjoissuomalaisessa tutkimuspopulaatiossa. Villin tyypin hiirille raskauden 16. tai 17. päivänä annettu LPS-annos sai aikaan elävien poikasten ennenaikaisen syntymisen. Emon seerumissa havaittiin sytokiinipitoisuuksien nopea nousu LPS:n vaikutuksesta. Emon tulehdusvaste johti synnynnäisen immuniteetin aktivaatioon istukassa, sikiökalvoilla ja kohdussa, kun taas muutokset sikiön kudoksissa olivat pieniä. Sikiön keuhkoissa SP-A:n ja SP-D:n ilmentyminen väheni. SP-A:ta tai SP-D:tä yli-ilmentävillä hiirillä havaittiin lisääntynyt SP-A:n tai SP-D:n määrä kohdussa, sikiökalvoilla, istukassa ja lapsivedessä. SP-A:n tai SP-D:n yli-ilmentyminen muutti LPS:n aiheuttamaa tulehdusvastetta. Erityisesti IL-4:n ja IL-10:n ilmentyminen kohdussa ja IL-10:n ilmentyminen sikiökalvoilla vähenivät. SP-C:n ilmentyminen havaittiin hiiren ja ihmisen istukassa ja sikiökalvoilla sekä hiiren kohdussa raskauden aikana. Sikiön SP-C-geenin polymorfia liittyi sikiökalvojen ennenaikaisen puhkeamisen kestoon. Tutkimus antaa lisätietoa tulehduksen aiheuttaman ennenaikaisen synnytyksen mekanismista sekä sytokiinien ja SP-A:n SP-D:n osuudesta synnytystapahtumassa. Mekanismin ymmärtäminen on erittäin tärkeää, jotta ennenaikaiset synnytykset voitaisiin tulevaisuudessa ehkäistä tehokkaammin

Kongressien yhteiskuntavastuu Helsingissä

Opinnäytetyömme aiheena oli kongressien yhteiskuntavastuu Helsingissä. Opinnäytetyö toteutettiin selvityksenä Helsinki Marketingille/Helsinki Convention Bureaulle, joka toimi työn toimeksiantajana. Tavoitteena oli selvittää Helsingin kongressien yhteiskuntavastuuta verrattuna sen kilpailijoihin kansainvälisillä kongressimarkkinoilla. Selvityksen tekemiseen käytimme SWOT -analyysejä, joiden pohjalta teimme benchmarking -vertailua. Vertailun kohteeksi valitsimme Tukholman ja Kööpenhaminan, koska kyseiset pohjoismaiset kaupungit ovat Helsingin kanssa hyvin samankaltaisia, ja tästä syystä vertailu näiden kaupunkien välillä oli hyödyllistä. Työn alussa avaamme työn aihesiin liittyviä käsitteitä ja analysoimme Suomea kongressimaana sekä Helsinkiä kongressikaupunkina. Tämän jälkeen kerromme Finland Convention Bureausta ja heidän toiminnastaan. Seuraavaksi käsittelemme opinnäytetyömme teoriaa. Teorian ensimmäisenä ja isoimpana käsitteenä on yhteiskuntavastuu ja sen osa-alueet (taloudellinen, sosiaalinen ja ympäristöllinen vastuu). Tämän jälkeen heijastamme vastuullisuutta kongressimaailmaan, ja kerromme minkälainen kongressin tulisi olla, jotta se olisi vastuullinen. Seuraavana käsittelimme kongressien legacya, eli mitä kongressi jättää ja minkälaisia vaikutuksia kongressimatkailulla on isäntäkaupunkiin. Työmme tutkimusvaiheessa teimme selvitystä kolmen kongressikaupungin välillä. Vertailun kohteena olivat Helsinki, Tukholma sekä Kööpenhamina, joiden kilpailullisia yhtäläisyyksiä ja eroja listasimme SWOT -analyysiäkäyttäen. SWOT -analyysien kautta pysytimme seuraavaksi rakentamaan benchmarking -vertailu näiden maiden välillä. Benchamrking -vertailun avulla saimme konkreettista tietoa tarvittavia kehitysideoita varten. Selkeimmäksi kehittämisen kohteeksi Helsinginkongressimarkkinoilla näimme Suomen ja Helsingin imagon sekä brändin vahvistamisen, joka olisi hyvä yhdistää maamme ainutlaatuiseen ja puhtaaseen luontoon. Tällä tavalla pystyttäisiin erottumaan hyvin kilpailijoista, ja luomaan Helsingille vahvempaa, tunnetumpaa kuvaa maailmalla. Selvityksemme ansiosta saimme selville, että Suomella on vielä parannettavaa noustakseen suurimpien kansainvälisten kongressin isäntäkaupunkien joukkoon. Vaikka Helsinki vetääkin puoleensa paljon kongressivieraita, on se silti vielä jäljessä Tukholmaan ja Kööpenhaminaan verrattaessa. Helsingillä on kuitenkin kaikki resurssit nousta kongressimaiden kärkeen, jos se vaan osaa kehittää imagoaan ja brändiään ja näin tuoda Suomea tunnetummaksi kansainvälisillä kongressimarkkinoilla

Inflammatory biomarkers in very preterm infants during early intravenous paracetamol administration

Abstract Background: Paracetamol promotes early closure of patent ductus arteriosus (PDA), and it may affect inflammation after preterm birth. Objective: The aim of this study was to evaluate the association between paracetamol treatment and serum inflammatory biomarkers in very preterm infants with respiratory distress. Study design: The infants were randomly assigned to intravenous paracetamol or placebo during the first 4 days of life, and others received a lower dose of paracetamol unblinded. Serum samples were used for the analysis of 10 cytokines, C-reactive protein (CRP) and malondialdehyde (MDA). The impact of paracetamol on the biomarkers was evaluated, based on the levels during the early (<60 h) and the later (60–120 h) postnatal age. Results: Altogether, 296 serum samples from 31 paracetamol and 25 placebo group infants were analysed. Paracetamol had no effect on cytokine levels during the first 60 h when most induced PDA contractions took place. Later paracetamol treatment was associated with lower serum levels of several cytokines, including interleukin (IL-) 10, interferon gamma-induced protein (IP-) 10, and monocyte chemoattractant protein-1. CRP levels were lower in the paracetamol group during the early treatment. Amongst the infants who had severe morbidities, MDA was higher (p = .045), regardless of paracetamol treatment. Conclusion: No significant differences in the cytokine levels were evident between the treatment and placebo groups. However, during early treatment, CRP levels were lower in the paracetamol group. To clarify whether this was due to a decrease in cardiopulmonary distress, or a distinct anti-inflammatory effect, requires further studies