Estabelecimento e desenvolvimento in vitro de Eugenia involucrata DC.: influência do tipo de explante e do meio nutritivo

http://dx.doi.org/10.5902/198050985092Eugenia involucrata DC. (Myrtaceae) is a forest species native to several Brazilian states which has several features of interest in the sectors of forestry, horticulture, environment and medicine. Considered the difficulty of propagation by seeds that are recalcitrant and lose viability rapidly after harvest, this study evaluated the influence of the use of apical and nodal segments cultured on different nutrient media on the in vitro establishment and development of this species. Apical and nodal segments collected from three year old plants kept in the greenhouse were inoculated in the nutrient media MS, ½ MS and WPM. At first, 1 µM of NAA and 5 µM of TDZ were added to the culture media, after the explants were transferred to flasks containing the respective fresh nutrient media in absence of growth regulators, but with addition of 1 g L-1 activated charcoal, and cultured for 30 additional days. The ½ MS is most suitable for the in vitro establishment and development of apical segments while media ½ MS and WPM are appropriate for nodal segments. The ½ MS enabled the best results of rooting in explants, together with the WPM, however, the first is more appropriate because it is more economical and more practical. The in vitro establishment and rooting is made possible by the use of apical and nodal segments of E. involucrata DC. The use of nodal segments is more promising for in vitro culture of E. than the use of apical segments.http://dx.doi.org/10.5902/198050985092Apresentando diversas características de interesse nos setores da silvicultura, fruticultura, meio ambiente e medicinal, Eugenia involucrata DC. (Myrtaceae) é uma espécie florestal nativa de vários Estados brasileiros. Considerada a dificuldade da propagação por sementes, que são recalcitrantes, perdendo rapidamente sua viabilidade após a colheita, este trabalho objetivou avaliar a influência do uso de segmentos apicais e nodais cultivados em diferentes meios nutritivos no estabelecimento e no desenvolvimento in vitro desta espécie. Segmentos apicais e nodais coletados em plantas de três anos de idade, mantidas em casa de vegetação, foram inoculados nos meios nutritivos MS, ½ MS e WPM. Em um primeiro momento, adicionaram-se aos meios de cultura 1 μM de ANA e 5 μM de TDZ e, após, os explantes foram transferidos para frascos contendo os respectivos meios nutritivos frescos, na ausência de reguladores de crescimento, mas com o acréscimo de 1 g L-1 de carvão ativado, sendo cultivados por 30 dias adicionais. Os meios ½ MS e WPM são adequados para o estabelecimento e o desenvolvimento in vitro a partir do cultivo de segmentos nodais, enquanto que, com segmentos apicais, é apropriado o meio ½ MS. O meio ½ MS possibilitou os melhores índices de enraizamento nos explantes, juntamente com o meio WPM. O estabelecimento e o enraizamento in vitro foram promovidos pelo cultivo de segmentos apicais e nodais de Eugenia involucrata DC. Os meios nutritivos ½ MS e WPM são apropriados para o cultivo in vitro de segmentos nodais de E. involucrata, recomendando-se o meio ½ MS pela economia e praticidade. Para segmentos apicais, o uso do meio de cultura ½ MS é mais adequado que o dos meios MS e WPM

IN VITRO ESTABLISHMENT AND DEVELOPMENT OF Eugenia involucrata DC.: INFLUENCE OF EXPLANT SOURCE AND NUTRITIONAL MEDIUM

Apresentando diversas caracter\uedsticas de interesse nos setores da silvicultura, fruticultura, meio ambiente e medicinal, Eugenia involucrata DC. (Myrtaceae) \ue9 uma esp\ue9cie florestal nativa de v\ue1rios Estados brasileiros. Considerada a dificuldade da propaga\ue7\ue3o por sementes, que s\ue3o recalcitrantes, perdendo rapidamente sua viabilidade ap\uf3s a colheita, este trabalho objetivou avaliar a influ\ueancia do uso de segmentos apicais e nodais cultivados em diferentes meios nutritivos no estabelecimento e no desenvolvimento in vitro desta esp\ue9cie. Segmentos apicais e nodais coletados em plantas de tr\ueas anos de idade, mantidas em casa de vegeta\ue7\ue3o, foram inoculados nos meios nutritivos MS, \ubd MS e WPM. Em um primeiro momento, adicionaram-se aos meios de cultura 1 \u3bcM de ANA e 5 \u3bcM de TDZ e, ap\uf3s, os explantes foram transferidos para frascos contendo os respectivos meios nutritivos frescos, na aus\ueancia de reguladores de crescimento, mas com o acr\ue9scimo de 1 g L-1 de carv\ue3o ativado, sendo cultivados por 30 dias adicionais. Os meios \ubd MS e WPM s\ue3o adequados para o estabelecimento e o desenvolvimento in vitro a partir do cultivo de segmentos nodais, enquanto que, com segmentos apicais, \ue9 apropriado o meio \ubd MS. O meio \ubd MS possibilitou os melhores \uedndices de enraizamento nos explantes, juntamente com o meio WPM. O estabelecimento e o enraizamento in vitro foram promovidos pelo cultivo de segmentos apicais e nodais de Eugenia involucrata DC. Os meios nutritivos \ubd MS e WPM s\ue3o apropriados para o cultivo in vitro de segmentos nodais de E. involucrata, recomendando-se o meio \ubd MS pela economia e praticidade. Para segmentos apicais, o uso do meio de cultura \ubd MS \ue9 mais adequado que o dos meios MS e WPM.Eugenia involucrata DC. (Myrtaceae) is a native forest species to several Brazilian states which has several features of interest in the sectors of forestry, fruit faming, environment and medicine. Considering the difficulty of propagation by seeds, which are recalcitrant and lose viability rapidly after harvest, this study evaluated the influence of the use of apical and nodal segments cultured in different nutrient media on the in vitro establishment and development of this species. Apical and nodal segments collected from three- year- old plants kept in the greenhouse were inoculated in the nutrient media MS, \ubd MS and WPM. First, 1 \u3bcM of NAA and 5 \u3bcM of TDZ were added to the culture media. After that, the explants were transferred to flasks containing the respective fresh nutrient media in absence of growth regulators, but with addition of 1 g L-1 activated charcoal, and then cultured for 30 additional days. Medium \ubd MS is most suitable for the in vitro establishment and development of apical segments while media \ubd MS and WPM are appropriate for nodal segments. Medium \ubd MS enabled the best results of rooting in explants, along with WPM; the in vitro establishment and rooting were made possible by the use of apical and nodal segments of E. involucrata DC. Nutritional media \ubd MS and WPM are most suitable for in vitro culture of nodal segments of Eugenia involucrata DC; however, medium \ubd MS is recommended due to economical and practical features. For apical segments of this species, the use of culture medium \ubd MS is more appropriate than media MS and WPM

Estabelecimento e multiplicação in vitro de Luehea divaricata Mart. & Zucc.

Luehea divaricata Mart. et  Zucc. (acoita-cavalo) of the Malvaceae family, is a forest-tree species that has suffered great anthropic disturbance during the last decades. This fact has contributed to the reduction of natural populations and, consequently, of its genetic variability. This justifies studies related to the propagation of the species. As a means of vegetative propagation, micropropagation is an alternative for the regeneration of plants with difficult natural regeneration and a strategy for species conservation. The objectives of this study were to determine the most efficient type of explant and growth medium for in vitro establishment and verify the influence of different concentrations of BAP cytokinin in the multiplication of nodal segments of Luehea divaricata. The seeds used were collected and stored by the Fundação Estadual de Pesquisa Agropecuária – FEPAGRO/Florestas (Agriculture and Cattle Research State Foundation – FEPAGRO/Forests), in Santa Maria, RS, Brazil, and the seedlings obtained in vitro were used as sources of the explants. In the selection of the explants and growth medium, the tips of stems and nodal segments grown in the MS and WMP nutritive media were tested. Different concentrations of BAP (0, 5, 10 and 15 mg L-1) were evaluated in the in vitro multiplication of the species. In the in vitro establishment of Luehea divaricata, both tips of stems and nodal segments can be used and also both growth media. To maximize the growth of the species, the WPM growth medium should be used due to its reduced cost. In the in vitro multiplication of the species, cytokinin BAP should not be added because, besides reducing the costs in the in vitro cultivation of Luehea divaricata, the best response for the majority of the characteristics evaluated was observed in the absence of this regulator,.O açoita-cavalo, Luehea divaricata Mart. & Zucc., pertencente à família Malvaceae, é uma espécie florestal que sofreu grande ação antrópica nas últimas décadas. Esse fato contribuiu muito para a redução das populações naturais e, consequentemente, de sua variabilidade genética, o que justifica a realização de estudos relacionados à propagação da espécie. Como forma de propagação vegetativa, a micropropagação torna-se uma opção para a regeneração de plantas que apresentam dificuldade de reprodução natural, além de ser uma estratégia para a conservação das espécies. O trabalho teve como objetivos determinar o tipo de explante e o meio de cultivo mais eficientes para o estabelecimento in vitro, além de verificar a influência de diferentes concentrações da citocinina BAP na multiplicação de segmentos nodais de açoita-cavalo. As sementes utilizadas foram coletadas e armazenadas pela Fundação Estadual de Pesquisa Agropecuária – FEPAGRO-Florestas em Santa Maria, RS e as plântulas obtidas in vitro foram utilizadas como fonte de explantes. Na seleção de explantes e meio de cultivo, foram testados segmentos apicais caulinares e segmentos nodais cultivados nos meios nutritivos MS e WPM. Diferentes concentrações de BAP (0, 5, 10 e 15 mg L-1) foram avaliadas na multiplicação in vitro de açoita-cavalo. No estabelecimento in vitro de açoita-cavalo podem-se empregar tanto segmentos apicais caulinares como segmentos nodais e ambos os meios de cultivo. Visando a maximizar o cultivo de açoita-cavalo, deve-se utilizar o meio de cultivo WPM, pelo custo reduzido. Na multiplicação in vitro de açoita-cavalo não deve ser adicionada a citocinina BAP, pois na ausência desse regulador se observa melhor resposta dos explantes para a maioria das características avaliadas, além de reduzir os custos no cultivo in vitro da espécie

Melhoramento florestal: ênfase na aplicação da biotecnologia Forestry improvement: emphasis on biotechnology application

As espécies florestais possuem grande importância econômica, pois oferecem diversos produtos fundamentais para a sociedade. Técnicas de melhoramento podem aumentar a produtividade das florestas plantadas, oferecer características desejadas à indústria e reduzir impactos ambientais. No entanto, a baixa variabilidade existente em espécies florestais de crescimento rápido, o longo período para os ciclos reprodutivos e as dificuldades encontradas para a realização de cruzamentos controlados podem inviabilizar tais procedimentos. O objetivo deste trabalho foi realizar uma revisão sobre a contribuição do Melhoramento Genético em espécies perenes, relatando técnicas convencionais e dando especial ênfase à biotecnologia. A cultura de tecidos, a utilização de marcadores moleculares e a transformação genética oferecem soluções únicas para o melhoramento florestal. As principais características que vêm sendo melhoradas estão ligadas à produção de biomassa, alteração na composição de lignina, resistência a pragas, tolerância a herbicidas, macho-esterilidade e fitorremediação. Contribuições significativas para a indústria e o ambiente têm sido alcançadas por meio dessas técnicas.<br>Forest species have great economic importance due to the wide range of important products offered to society. Techniques improvement can increase the productivity of planted forests, providing the desired characteristics to industry, as well as, reducing environmental impacts. However, the low variability existing in fast-growing species, the long reproductive cycles period and the difficulties encountered when conducting controlled crossings may prevent such procedures. The aim of this research was to carry out a review on the contribution of genetic improvement in perennial species. Conventional techniques with special emphasis on biotechnology were reported. The tissue culture, the use of molecular markers and genetic transformation offer unique solutions to forestry improvement. The major features that have been improved are linked to production of biomass, changes in the composition of lignin, resistance to pests, tolerance to herbicides, male-sterility and phytoremediation. Significant contributions to industry and environment have been achieved through these techniques

In vitro elongation of minicutings of Eucalyptus dunnii Maiden genotypes

Shoots that have short lengths may present low percentage of survival if they are directly grown on rooting media, or give rise to low quality seedlings for the acclimatization phase. The objective of this study was to evaluate the in vitro elongation of Eucalyptus dunnii minicuttings under different concentrations of giberellic acid. Minicuttings were prepared and inoculated under aseptic conditions on MS nutritive medium with half of the salt concentration (1/2 MS). We used fixed concentrations of NAA (0.5 mg L-1) and BAP (0.1 mg L-1) varying GA3 according to the treatment. The experiment was conducted in a randomized design, using a 6 x 4 factorial scheme, where the levels of factor "A" refer to different genotypes and the levels of factor B, the concentrations of GA3 (0.0; 0.2; 0.4, and 0.8 mg L-1), each replicate was composed of a flask containing three explants. Thirty days after in vitro culture, evaluations were performed. For most genotypes, the absence of GA3 produced the highest number of elongated shoots for explant and a longer length of elongated shoots. In general, genotypes with the highest number of shoots also had larger shoots. The non-addition of GA3 to the nutritive medium did not promote calli formation, reaching over 50% in the use of higher concentration of GA3 tested (0.80 mg L-1). The calli formation was different in different genotypes. Gibberellic acid (GA3) has no effect on in vitro elongation of Eucalyptus dunnii. In the presence of GA3 genotypes reduce the number of elongated shoots and shoot length, increasing the formation of calli. The genotypes of Eucalyptus dunnii evaluated present differently in relation to in vitro elongation, which is able to be selected

Substratos alternativos e tratamentos pré-germinativos na germinação in vitro de sementes de Pinus taeda L.

Os objetivos deste trabalho foram desenvolver protocolos para a obtenção de plântulas in vitro de P. taeda, avaliar o uso de substratos alternativos e analisar o efeito de tratamentos pré-germinativos na otimização da germinação. Foram testados tratamentos de desinfestação à base de etanol e hipoclorito de sódio (NaOCl), a influência do fotoperíodo, de tratamentos pré-germinativos e a possibilidade de uso de substratos alternativos (amido de milho, papel-filtro, algodão hidrófilo, vermicultita, ágar-água e adição de carvão ativado ao meio nutritivo) na germinação. Foram avaliadas a germinação in vitro e a contaminação fúngica e bacteriana. O melhor tratamento para a desinfestação das sementes foi etanol 70% por 30 s, seguido de imersão em hipoclorito de sódio a 3% por 5 min, no entanto apresentou efeito tóxico. Os substratos alternativos conferem condições físicas adequadas à cultura de tecidos, mas não favorecem a germinação. Contudo, o uso de algodão hidrófilo associado à embebição das sementes por 72 h, na ausência de desinfestação, otimiza a germinação e possibilita a obtenção de plântulas in vitro com baixa contaminação