Regulation of Immune and Nonimmune Mast Cell Activation by Phenols from Olive Oil

The purpose of this study is to establish if hydroxytyrosol and oleuropein, the most significant phenols found in olive oil and olives, can inhibit the activation of mast cells induced by immune and nonimmune pathways. Preincubation of purified peritoneal mast cells was carried out in the presence of hydroxytyrosol or oleuropein compounds and, prior to incubation, with concanavalin A, compound 48/80, or calcium ionophore A23187. Dose-response and time-dependence were studied. Comparative studies were performed using sodium cromoglycate, a well-known mast cell stabilizer. The supernatants and pellets were analyzed for β-hexosaminidase content via colorimetric reaction after incubation. The percentage of β-hexosaminidase obtained in each tube was measured and taken as a referent mast cell activation indicator. Other cell pellet samples were studied for cell viability, by means of the trypan blue exclusion method, or analyzed with light and electron microscopy. For the first time, biochemical and morphological results have shown that hydroxytyrosol and oleuropein inhibit degranulation of mast cells triggered by both immune and nonimmune causes. These findings suggest that olive phenols, specifically hydroxytyrosol and oleuropein, may be set the bases for developing practical tools not only to prevent and treat mast cell-mediated disorders but also to improve olive oil industrialization

In search of new therapeutic strategies in neuropathic pain : pharmacological regulation of mast cell activation induced by proinflammatory neuropeptides

Teniendo en cuenta que la identificación de nuevas moléculas para el tratamiento eficaz de enfermedades inflamatorias e inmunitarias es una de las principales necesidades médicas actuales y uno de los principales objetivos de la industria farmacéutica, el objetivo de nuestro trabajo es proporcionar nuevas estrategias terapéuticas y una comprensión más profunda del mecanismo de acción de los nuevos fármacos relacionados con el dolor neuropático. Nuestro equipo investigará si algunas lactonas naturales y sintéticas desarrolladas por nuestro laboratorio inhiben la activación de mastocitos peritoneales de rata inducida por neuropéptidos proinflamatorios. Se utilizarán técnicas bioquímicas, químicas, y de biología celular, como también una variedad de técnicas microscópicas. Se espera que los resultados generados contribuyan a diseñar nuevas estrategias terapéuticas para el dolor neuropático.Taking into account that the identification of novel molecules for effective treatment of inflammatory and immune diseases is one of the main present medical needs, and one of the major goals of the pharmaceutical industry, the aim of our work is intended to provide new therapeutic strategies and a deeper understanding of the mechanism of action of new drugs related to neuropathic pain. Our research team will investigate if some natural and synthetic lactones developed by our laboratory inhibit rat peritoneal mast cell activation induced by proinflammatory neuropeptides. Biochemical, chemical, cell biology, and a variety of microscopic techniques will be used. These studies may contribute to new therapeutic strategies for neuropathic pain

Effect of a cytoprotective dose of dehydroleucodine, xanthatin, and 3-benzyloxymethyl-5h-furan-2-one on gastric mucosal lesions induced by mast cell activation

The aim of this study was to determine whether the lactones dehydroleucodine, xanthatin and 3-benzyloxymethyl-5H-furan-2-one, would be effective in an animal model of gastric ulcer induced by mast cell activation. Rats were divided into ten groups. Treatments were repeated for four days. The degree of gastric erosion was assessed with a scoring system and histological preparations. Gastric mast cell morphology was analyzed by histological procedures. Serum serotonin levels were determined as markers of mast cell activation. Statistical analyses were done using ANOVA and Tukey–Kramer test. We demonstrated that the repeated administration of compound 48/80 results in extensive mucosal lesions in the gastric mucosa and that such lesions occurred in association with mast cell degranulation and a significant increase of serum serotonin. We showed that these lesions were prevented by dehydroleucodine, xanthatin, and 3-benzyloxymethyl-5H-furan-2-one and that this effect was similar to that obtained with sodium cromoglycate. In conclusion, the results of the present study indicate that the optimal gastric cytoprotective dose of dehydroleucodine, xanthatin, and 3-benzyloxymethyl-5H-furan-2-one is efficacious in an animal model of gastric ulcer induced by mast cell activation. Our findings suggest that these lactones could be valuable tools for designing novel therapeutic agents for digestive disorders associated with inappropriate mast cell activation.Fil: Vera, Mariano Ezequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Mariani, María Laura Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Aguilera, Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Penissi, Alicia Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Inflammatory response induced by Helicobacter pylori infection in lung

Helicobacter pylori is a microorganism that in the last years has been associated with extragastric disorders such as respiratory diseases, however, its impact on lung is partially understood. The aim of this work was to study infection impact of H. pylori on the inflammatory markers expression at the pulmonary level using an animal model. Infection was performed by BALB/c wild type (WT) mice orotracheal instillation with 20 μl of 1 × 108 H. pylori reference strain suspension once per day throughout 3 days. Inflammatory response was evaluated at 3, 7, 14, 21 and 30 days post infection. Lung was aseptically removed and pulmonary edema index values showed a significant change at 30 days of infection. Hematoxylin-Eosin (H-E) stain allowed to visualizing H. pylori presence in lung samples at 3 days of infection near the phagocytic cells or in the alveoli lumen. Bronchoalveolar lavage (BAL) was used for inflammatory response evaluation. Lactate dehydrogenase values showed a gradual increase in infected animals along infection time. Protein concentrations in mg/ml from BAL increased significantly at 7 days in infected animals. Macrophages viability obtained from BAL, decreased at the first moment of infection, maintaining constant values along contamination time. Results obtained demonstrate an inflammatory response in lung after orotracheal H. pylori infection and suggest that the pathogenic mechanism is strongly evidenced by tissue damage, endothelial dysfunction inflammatory mediators and markers expression at the pulmonary level.Fil: Arismendi Sosa, Andrea Celeste. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Salinas Ibáñez, A.G.. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Pérez Chaca, M.V.. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Penissi, Alicia Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Gómez, N.N.. Universidad Nacional de San Luis; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas - San Luis; ArgentinaFil: Vega, A.E.. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; Argentin

Determinación del potencial antibacteriano in vitro de compuestos antioxidantes naturales de la región de Cuyo, (resveratrol y hidroxitirosol) frente a yersinia enterocolítica y pseudotuberculosis

La yersiniosis es una enfermedad infecciosa entérica bacteriana aguda, producida por microorganismos del género Yersinia spp y que comprende a Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis. Las bacterias se transmiten por vía fecal-oral y se considera que la fuente de infección principal son los alimentos, en particular la carne y los productos cárnicos, la leche y los productos lácteos. También puede producirse infección por ingestión de agua contaminada, y se ha comprobado asimismo la transmisión directa entre personas y de animales a personas. Los compuestos fenólicos están presentes en todas las plantas en forma de metabolitos secundarios. Resveratrol (RV) e hidroxitirosol (HT) son dos ejemplos de compuestos antioxidantes provenientes de plantas de la región de Cuyo para los cuales se ha demostrado actividad antimicrobiana en infecciones con bacterias patógenas en seres humanos, en cepas aisladas clínicamente. Proponemos evaluar el efecto antibacteriano de ambos compuestos antioxidantes (RV e HT) en infecciones in vitro con Yersinia spp

Challenges and implications of morphological sciences in the construction of clinical reasoning and medical training

No existen dudas acerca de que la construcción de la profesión médica constituye un proceso complejo y en continua transformación. La medicina nace y se desarrolla a partir de las denominadas ciencias básicas, dentro de las cuales el estudio de la morfología ocupa un lugar preponderante. Así, según Hipócrates, el estudio de la estructura del cuerpo humano es el principio de la medicina? La observación es una competencia que todo médico debería adquirir y desarrollar. Gran parte de su trabajo consiste en observar y analizar. Mientras más agudo sea el proceso de observación y análisis, mayor será la perfección de su tarea profesional. Las ciencias morfo- lógicas son, precisamente, las responsables de inducir, potenciar y educar estas competencias en los estudiantes de medicina.Fil: Penissi, Alicia Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Integrated Teaching of Morphological Sciences in Medical Schools. Utopia or reallity?

La morfología humana está integrada por diversas disciplinas científicas que estudian la estructura del organismo humano en sus aspectos macroscópicos, microscópicos y del desarrollo. Estas ramas científicas representan la base sobre la que se construye el conocimiento médico y corresponden a la anatomía, histología y embriología, respectivamente. En este contexto, la histología ocupa un lugar estratégico dentro las ciencias morfológicas básicas, por cuanto se posiciona en una encrucijada entre la embriología y la anatomía, conecta por su base con la biología celular y molecular, se relaciona con las ciencias funcionales como la bioquímica, genética, fisiología e inmunología y sirve como referencia para la anatomía patológica. En consecuencia, la histología moderna se ha convertido en un centro de articulación e integración de la morfología con la función, tanto en estado de salud como en estado de enfermedad. Constituye, de esta manera, un eje cognitivo integrador de fundamental importancia en el proceso de formación de profesionales médicos.Fil: Penissi, Alicia Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Teaching and learning of medical histology: Presentiality or virtuality?

La Histología, también denominada Anatomía microscópica, constituye una disciplina fundamental para la formación médica. Esta rama de las Ciencias Morfológicas permite a los estudiantes conocer las estructuras microscópicas normales que conforman los tejidos y órganos del cuerpo humano. Sobre la base de la observación de tales estructuras es posible comprender su funcionamiento (binomio estructura-función), como también reconocer e interpretar las alteraciones funcionales que derivan de eventuales cambios estructurales.Fil: Penissi, Alicia Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Development and Validation of a Novel HPLC Method for the Analysis and Quantification of Dehydroleucodine in Plant Extracts

Background: Dehydroleucodine is a sesquiterpene lactone isolated from Artemisia douglasiana Besser. Distinctive biological and pharmacological activities have been shown extensively for this molecule. Only one analytical method has been described for the quantification of dehydroleucodine in biological experimental systems. However, this assay involves fluorescent detection that is normally not recommended for routine analysis. Objective: The goal of this study was to develop and validate a novel methodology for rapid detection and quantitation of dehydroleucodine by HPLC with UV detection. Method: The method involved the use of a C18 separation column, an acetonitrile/water (80:20, v/v) solution as a mobile phase in an isocratic mode at a flow rate of 1 ml/min, and UV detection at 254 nm. Results: In the selected experimental conditions, dehydroleucodine exhibited a well-defined chromatographic peak with a retention time of 3.51 min. The chromatographic signal shows a linear dependence with the dehydroleucodine concentration. Correlation coefficient: 0.99. LOD: 1.5 ng/mL. LOQ: 15 ng/mL. Conclusion: The current method is simpler, faster, and cheaper than the previously reported one, and besides it could be useful to quantify this lactone and related pharmacological compounds. Furthermore, quality control of medicinal extracts of plant origin could be analyzed, and the concentration of the active constituent could be certified by this method.Fil: Mariani, María Laura Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; ArgentinaFil: Penissi, Alicia Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentin

Seasonal variations of gonadotropins in the pars distalis male viscacha pituitary: Effect of chronic melatonin treatment

The gonadotropes, LH and FSH cells, were immunohistochemically identified in the pituitary pars distalis of the adult male viscacha (Lagostomus maximus maximus) using specific antibodies against hLHb and hFSHb with the streptavidin-biotin-peroxidase complex. The distribution, size and percentage immunopositive area of these cells were analyzed by image analysis in viscachas captured during the annual reproductive cycle and after the chronic administration of melatonin. The LHb and FSHb cells showed seasonal changes in the distribution, size and percentage immunopositive area. The LHb cells were found widely distributed throughout the pars distalis during the reproductive period, and they were found in the ventro-medial region in the pars distalis during the gonadal regression and gonadal recovery periods. The LHb cells reached the largest size and immunopositive area during the reproductive period and the smallest size and immunopositive area during the gonadal regression period. The FSHb cells were found in the ventromedial region during reproductive and gonadal regression periods. The FSHb cells were found widely distributed throughout the pars distalis during the gonadal recovery period when they showed the maximum percentage immunopositive area. A decrease in the size of LHb and FSHb cells was observed after the chronic administration of melatonin. Moreover, it produces a decrease in the immunopositive area occupied by the LHb cells but not in the immunopositive area occupied by the FSHb cells. Our results show great activity of LHb and FSHb cells in different moments of the annual reproductive cycle demonstrating that these cells do not secrete in parallel. Moreover, melatonin acts differentially on the activity of the gonadotrope cells.Fil: Filippa, Veronica Palmira. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis; Argentina. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Penissi, Alicia Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Mendoza. Instituto de Histologia y Embriologia de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Grupo Vinculado de Investigacion y Desarrollo Biotecnologico Aplicado Al Diagnostico Al Ihem | Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Medicas. Instituto de Histologia y Embriologia de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Grupo Vinculado de Investigacion y Desarrollo Biotecnologico Aplicado Al Diagnostico Al Ihem.; ArgentinaFil: Mohamed, Fabian Heber. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis; Argentina. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia; Argentin