Efeito antineoplásico do fingolimode em culturas de linhagens celulares de meduloblastoma humano

Os tumores do sistema nervoso central estão associados a uma elevada taxa de morbidade e mortalidade, sendo que os meduloblastomas representam um grupo heterogêneo de tumores primários malignos, com características agressivas e tendência à formação de metástases. A terapia vigente para tratamento de meduloblastomas envolve, cirurgia, radioterapia e quimioterapia adjuvante. A terapêutica deste tumor é direcionada à minimização dos efeitos adversos a longo prazo, bem como uma maior efetividade dos fármacos antineoplásicos. Os inibidores da histona desacetilase (iHDAC) são agentes epigenéticos que exibem atividades antitumorais em modelos experimentais para estudo meduloblastoma. O fingolimode (FTY720), um agente imunossupressor, atualmente utilizado no tratamento da esclerose múltipla, também pode ter atividade antineoplásica e atuar como iHDAC. O objetivo de nosso trabalho foi analisar a ação antineoplásica do fingolimode em culturas de meduloblastoma humano (linhagens celulares D283 e DAOY), bem como sua ação epigenética. As células em estudo foram tratadas com diferentes concentrações de fingolimode (5, 7.5 ou 10 Μm). A viabilidade celular foi analisada por meio de contagem celular através de um hemocitômetro e a sobrevivência celular por análise de formação de colônias. Ação epigenética do fingolimod foi estudada mediante acetilação da histona H3 medida por método de ELISA. Assim, foi observado que o fingolimode nas concentrações de 7,5 ou 10 μM, foram capazes de induzir uma redução significativa na viabilidade celular em culturas de meduloblastomas de ambas linhagens celulares, sendo que resultados semelhantes foram observados para a inibição da sobrevivência celular. Em ambas as linhagens celulares, o fingolimode também levou a um aumento significativo nos níveis de acetilação de histonas H3. Nossos resultados fornecem evidências indicando que o fingolimode apresenta atividades antineoplásica por provável mecanismos epigenético.Central nervous system (CNS) tumors are associated with a high morbidity and mortality rate, and Medulloblastoma (MB) represents a heterogeneous group of malignant primary tumors, with aggressive characteristics and tendency to metastasis. Current therapy for treatment of medulloblastomas involves surgery, radiotherapy, and adjuvant chemotherapy. MB therapy has been directed to the minimization of long-term adverse effects, as well as to a greater effectiveness of new drugs directed to this extremely aggressive oncology pathology. Histone deacetylase inhibitors (HDACis) are epigenetic agents that exhibit antitumor activities in experimental medulloblastoma (MB). Fingolimod (FTY720), an immunosuppressive agent currently used in the treatment of multiple sclerosis, also has anticancer actions and can act as HDACi. Here we examine whether fingolimod can inhibit the viability and survival of human MB cells, and whether the effects are accompanied by increased histone acetylation. In these study, D283 and DAOY MB cells were treated with different doses of fingolimod and their cell viability was evaluated by counting cells in a hemocytometer and cell survival was analyzed by colony formation assay. Histone H3 acetylation was measured with an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Thus, fingolimod at a dose of 7.5 or 10 μM was able to induce a significant reduction in cell viability in D283 and DAOY cultures, and similar results were observed for inhibition of cell survival. In both cell lines, fingolimod also led to a significant increase in acetylated H 3 levels. These results provide early evidence indicating that fingolimod induces antitumor activities in MB through an epigenetic mechanism in an increase in histone H3 acetylation is observed

Estudo do comportamento nociceptivo, por meio dos reflexos de auto-limpeza e retirada da cauda, em modelo de ativação periférica e sistêmica de vias trigeminais

As regiões orofacial e craniana são densamente inervadas pelo nervo trigêmeo e suas ramificações. Condições patológicas, como cefaléias e dores orofaciais, têm sua fisiopatogenia relacionada ao funcionamento do sistema trigeminal. Existem poucos modelos experimentais de avaliação comportamental para estudo da nocicepção mediada pelo nervo trigêmeo. Essa dissertação teve por objetivo realizar estudos comportamentais sobre a modulação da nocicepção mediada por vias trigeminais, em modelo animal correlacionável com os quadros de dores orofaciais e cefálicas em seres humanos. Para tal, foi promovida a ativação do sistema trigeminovascular de modos periférico (dor orofacial induzida por formalina) e sistêmico (modelo neurovascular de ativação sistêmica por administração de nitroglicerina). Após essa ativação, avaliaram‐se comportamentos de auto‐limpeza, motricidade e orientação espacial, em campo aberto, e resposta reflexa a estímulo nociceptivo, por meio da medida de latência de retirada da cauda. Entre as respostas comportamentais avaliadas, o tempo despendido em reflexo de auto‐limpeza foi considerado o parâmetro representativo da resposta nociceptiva no modelo de dor orofacial induzida pela formalina. A administração de nitroglicerina, por si só, não foi capaz de promover alterações comportamentais sugestivas de atividade nociceptiva. A medida de latência de retirada da cauda não foi capaz de aferir alterações nociceptivas potencialmente desencadeadas pelos dois modelos empregados nessa Dissertação. Na associação desses dois modelos, observou‐se que a nitroglicerina foi capaz de promover redução do tempo gasto no reflexo de auto‐limpeza desencadeado pela formalina administrada por via subcutânea. É possível que a nitroglicerina participe modulando e/ou ativando os mecanismos envolvidos na nocicepção trigeminal, porém mais estudos necessitam ser realizados para delinear melhor sua ação nesse processo.The orofacial and cranium regions are densely innervated by the trigeminal nerve and their branches. Pathological states as headache and orofacial pain have their pathogenesis related to the trigeminal functions. There are few experimental models for behavioral evaluation of the nociception mediated by the trigeminal nerve. The present work aimed to study the behavioral parameters related to the modulation of trigeminal system, using an animal model capable of simulating orofacial and cephalic pain in human beings. Afterwards, it was performed the activation of trigeminovascular system using regional (through the orofacial formalin test) and/or systemic models (through intraperitoneal administration of nitroglycerine). In open field, it was evaluated grooming, crossing, and rearing behaviors. In tail-flick test, it was evaluated the nociceptive response to the noxious stimulus. In the present study, grooming was considered the representative behavior of the nociceptive response in the orofacial pain model (induced by formalin). Nitroglycerine was not capable to determine behavioral changes that suggest nociception reaction in the open field. The tail‐flick latency did not detect potential nociceptive effects occurred in the evaluated models. In the association of the two models of regional and systemic trigeminal activation, nitroglycerine reversed the increase of grooming induced by the subcutaneous administration of formalin. The result suggests that nitroglycerine could act modulating and/or activating mechanisms involved in the trigeminal nociception. However, more studies are needed

Estudo do comportamento nociceptivo, por meio dos reflexos de auto-limpeza e retirada da cauda, em modelo de ativação periférica e sistêmica de vias trigeminais

As regiões orofacial e craniana são densamente inervadas pelo nervo trigêmeo e suas ramificações. Condições patológicas, como cefaléias e dores orofaciais, têm sua fisiopatogenia relacionada ao funcionamento do sistema trigeminal. Existem poucos modelos experimentais de avaliação comportamental para estudo da nocicepção mediada pelo nervo trigêmeo. Essa dissertação teve por objetivo realizar estudos comportamentais sobre a modulação da nocicepção mediada por vias trigeminais, em modelo animal correlacionável com os quadros de dores orofaciais e cefálicas em seres humanos. Para tal, foi promovida a ativação do sistema trigeminovascular de modos periférico (dor orofacial induzida por formalina) e sistêmico (modelo neurovascular de ativação sistêmica por administração de nitroglicerina). Após essa ativação, avaliaram‐se comportamentos de auto‐limpeza, motricidade e orientação espacial, em campo aberto, e resposta reflexa a estímulo nociceptivo, por meio da medida de latência de retirada da cauda. Entre as respostas comportamentais avaliadas, o tempo despendido em reflexo de auto‐limpeza foi considerado o parâmetro representativo da resposta nociceptiva no modelo de dor orofacial induzida pela formalina. A administração de nitroglicerina, por si só, não foi capaz de promover alterações comportamentais sugestivas de atividade nociceptiva. A medida de latência de retirada da cauda não foi capaz de aferir alterações nociceptivas potencialmente desencadeadas pelos dois modelos empregados nessa Dissertação. Na associação desses dois modelos, observou‐se que a nitroglicerina foi capaz de promover redução do tempo gasto no reflexo de auto‐limpeza desencadeado pela formalina administrada por via subcutânea. É possível que a nitroglicerina participe modulando e/ou ativando os mecanismos envolvidos na nocicepção trigeminal, porém mais estudos necessitam ser realizados para delinear melhor sua ação nesse processo.The orofacial and cranium regions are densely innervated by the trigeminal nerve and their branches. Pathological states as headache and orofacial pain have their pathogenesis related to the trigeminal functions. There are few experimental models for behavioral evaluation of the nociception mediated by the trigeminal nerve. The present work aimed to study the behavioral parameters related to the modulation of trigeminal system, using an animal model capable of simulating orofacial and cephalic pain in human beings. Afterwards, it was performed the activation of trigeminovascular system using regional (through the orofacial formalin test) and/or systemic models (through intraperitoneal administration of nitroglycerine). In open field, it was evaluated grooming, crossing, and rearing behaviors. In tail-flick test, it was evaluated the nociceptive response to the noxious stimulus. In the present study, grooming was considered the representative behavior of the nociceptive response in the orofacial pain model (induced by formalin). Nitroglycerine was not capable to determine behavioral changes that suggest nociception reaction in the open field. The tail‐flick latency did not detect potential nociceptive effects occurred in the evaluated models. In the association of the two models of regional and systemic trigeminal activation, nitroglycerine reversed the increase of grooming induced by the subcutaneous administration of formalin. The result suggests that nitroglycerine could act modulating and/or activating mechanisms involved in the trigeminal nociception. However, more studies are needed

Cardiovascular disease risk in women with migraine

Background: Studies suggest a higher prevalence of unfavourable cardiovascular risk factors amongst migraineurs, but results have been conflicting. The aim of this study was to investigate traditional and newly recognized risk factors as well as other surrogate markers of cardiovascular risk in obese and normal weight women with migraine. Methods: Fifty-nine adult female probands participated in this case–control study. The sample was divided into normal weight and obese migraineurs and age- and body mass index-matched control groups. The following cardiovascular risk factors were analyzed: serum levels of lipids, fasting glucose, and insulin; insulin resistance; blood pressure; smoking (categorized as current, past or never); Framingham 10-year risk of general cardiovascular disease score; C-reactive protein; family history of cardiovascular disease; physical activity; sleep disturbances; depression; and bioelectrical impedance phase angle. The means of continuous variables were compared using Student’s t-test for independent samples or the Mann–Whitney U-test (for 2 groups) and ANOVA or the Kruskal-Wallis test (for 4 groups) depending on the distribution of data. Results: All migraineurs were sedentary irrespective of nutritional status. Migraineurs had higher depression scores and shorter sleep duration, and obese migraineurs, in particular, had worse sleep quality scores. Insulin resistance and insulinaemia were associated with obesity, and obese migraineurs had lower HDL-c than normal weight controls and migraineurs. Also, the Framingham risk score was higher in obese migraineurs. Conclusion: These findings suggest that female migraineurs experience marked inactivity, depression, and some sleep disturbance, that higher insulin resistance and insulinaemia are related to obesity, and that obesity and migraine probably exert overlapping effects on HDL-c levels and Framingham 10-year cardiovascular risk

Efeitos dos nucleotídios da guanina em convulsões induzidas por ácido quinolínico em camundongos

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Efeitos dos nucleotídios da guanina em convulsões induzidas por ácido quinolínico em camundongos

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GMP intraperitonial inibe convulsões induzidas por ácido quinolínico em camundongos

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