Avaliação de nematoides entomopatogênicos em condições de laboratório e casa-de-vegetação visando ao controle de Spodoptera frugiperda

The increased corn planting grown in the late season crop and the use of a notillage planting system benefits the development of Spodoptera frugiperda, the main pest of corn crop. Thus, this study aimed to select entomopathogenic nematodes based on the mortality of S. frugiperda, and to adjust the nematode concentrations in the laboratory and evaluate the action of these organisms in greenhouse conditions. Seventeen nematode populations were tested at concentrations of 100, 250, and 500 infective juveniles (IJ)/larvae. The obtained data were submitted to the polynomial regression test. In the greenhouse, corn sowing was performed in plastic buckets with soil, corn straw, and water. After 7 days, Steinernema arenarium or Heterorhabditis sp. RSC02, and the larvae were added (40 larvae, one larvae/repetition). The data were submitted to the variance analysis and the Scott-Knott test (P<0.05). In the laboratory, tests with S. arenarium and Heterorhabditis sp. RSC02 caused mortality of 85 and 90%, respectively, being selected for the concentrations test. Concentrations of 150, 200, 250, 300, and 350IJ larvae-1 were tested. At a concentration of 200IJ larvae-1, S. arenarium and Heterorhabditis sp. RSC02 caused 100 and 97.6% mortality in laboratory, respectively, and in the greenhouse caused 77.5 and 87.5% mortality, respectively, when compared to the control (7.5%).O aumento no plantio do milho "safrinha" e o uso do sistema de plantio direto favorecem o desenvolvimento de Spodoptera frugiperda, principal praga da cultura. Dessa forma, os objetivos deste trabalho foram selecionar nematoides entomopatogênicos, de acordo com a mortalidade causada sobre S. frugiperda, adequar as concentrações em laboratório e avaliar a ação desses organismos em condições de casa-de-vegetação. Foram testadas 17 populações de nematoides nas concentrações de 100, 250 e 500 juvenis infectantes (JI) lagarta-1. Os dados obtidos foram submetidos ao teste de regressão polinomial. Em casa-de-vegetação, a semeadura do milho foi realizada em vasos de plástico contendo solo, palhada de milho e água. Após sete dias, foram adicionados Steinernema arenarium ou Heterorhabditis sp. RSC02 e as lagartas (40 lagartas, uma lagarta/repetição). Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e ao teste de médias Scott-Knott (P<0,05). Nos testes de laboratório, S. arenarium e Heterorhabditis sp. RSC02 causaram mortalidade de 85 e 90%, respectivamente, sendo selecionados para o teste de concentrações. Foram testadas as concentrações de 150, 200, 250, 300 e 350JI lagarta-1. Na concentração de 200JI lagarta-1, S. arenarium e Heterorhabditis sp. RSC02 causaram 100 e 97,6% de mortalidade, respectivamente, e em casa-de-vegetação causaram 77,5 e 87,5%, respectivamente, diferindo da testemunha (7,5%)

Efecto de Heterorhabditis sp. y Steinernema carpocapsae aplicados en diferentes períodos de infestación del suelo con larvas de Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae)

The Mediterranean Fruit Fly, (Ceratitis capitata) (Wiedemann) is considered one of the main pests of fruit culture around the world, causing significant losses in this sector.  This insect stays in the soil during a phase of life, where it becomes a target for entomopathogenic nematodes. Therefore, this work aimed to evaluate the effect of  Heterorhabditis sp. RSC01 and Steinernema carpocapsae All, applied alone or combined, and in different periods of soil infestation with larvae of C. capitata. For the first bioassay the treatments were: S. carpocapsae; Heterorhabditis sp.; S. carpocapsae + Heterorhabditis sp. (both applied immediately after the transfer of larvae); S. carpocapsae (applied immediately after the transfer of larvae) + Heterorhabditis sp. (applied 12 hours after the transfer of larvae); and S. carpocapsae (applied 12 hours after the transfer of larvae) + Heterorhabditis sp. (applied immediately after the transfer of larvae). For the second bioassay the treatments were: application of the nematodes, and then the soil infested with larvae; application of the nematode and after 24 hours soil infested with the larvae; soil infested with the larvae and then 24 hours after, application of the nematode. Ten C. capitata larvae were transferred to plastic jars (12 cm × 6 cm) containing 100 g soil, followed by the application of 3 mL of an aqueous suspension containing 125 JI cm-2. In control treatment was applied 3 mL of distilled water. The mortality’s evaluation was performed after five days later and was confirmed by symptom observations and corpse dissections. It was observed that Heterorhabditis sp. and S. carpocapsae were effective in controlling larvae of C. capitata when applied on the soil surface, alone or combined, with mortality rates ranging in 26 and 74%. For the range of application, S. carpocapsae was more efficient when applied immediately after the transfer of larvae to the soil, and 24 hours before to infestation (80 and 90% mortality, respectively). However, Heterorhabditis sp. was more efficient only when applied 24 hours before to infestation of the soil (90% mortality). La mosca del Mediterráneo (Ceratitis capitata) (Wiedemann) es considerada una de las principales plagas de la fruticultura mundial, causando pérdidas significativas en este sector. Este insecto tiene una fase de su vida en el suelo, siendo un blanco  potencial para los nematodos entomopatógenos. Así, los objetivos de este trabajo fueran evaluar la eficiencia de Heterorhabditis sp. RSC01 y Steinernema carpocapsae All, aplicados aislados o combinados, y en diferentes períodos de infestación del suelo con larvas de C. capitata. Para el primero bioensayo los tratamientos fueran: S. carpocapsae; Heterorhabditis sp.; S. carpocapsae + Heterorhabditis sp. (ambos aplicados inmediatamente después de la transferencia de las larvas); S. carpocapsae (aplicado logo después de la transferencia de las larvas) + Heterorhabditis sp. (aplicado 12 horas después de la transferencia de las larvas) y S. carpocapsae (aplicado 12 horas después de la transferencia de las larvas) + Heterorhabditis sp. (aplicado logo después de la transferencia de las larvas). Para el segundo bioensayo los ratamientos fueran: aplicación de nematodos y luego infestación del  suelo con larvas; aplicación de los nematodos, y después de 24 horas, infestación del suelo con larvas; la infestación del suelo con larvas, y 24 horas después aplicación de los nematodos. Se transfirieron Diez larvas de C. capitata a macetas de plástico con 100 g de suelo y se aplicó 3 ml de suspensión con 125 JI cm-2. En el tratamiento control se aplicó 3 ml de agua. La evaluación de la mortalidad se realizó cinco días después y la confirmación se realizó mediante la observación de los síntomas característicos del ataque de nematodos y disección de los cadáveres. Se encontró que Heterorhabditis sp. y S. carpocapsae fueron eficaces en el control de larvas de C. capitata cuando aportados en la superficie del suelo, ya sea aislado o combinado con tasas de mortalidad que oscilaran entre 26 y 74%. Para el intervalo de aplicación, S. carpocapsae fue más eficaz cuando aplicado en el momento de la infestación del suelo y 24 horas antes de la infestación (80 y 90% de mortalidad, respectivamente). Además, Heterorhabditis sp. Presentó más alta eficiencia sólo cuando se aplicó 24 horas antes de la infestación del suelo (90% de mortalidad).A mosca-do-Mediterrâneo (Ceratitis capitata) (Wiedemann) é considerada uma das principais pragas da fruticultura mundial  acarretando perdas significativas nesse setor. Esse inseto passa uma fase de sua vida no solo, sendo um alvo em potencial para nematóides entomopatogênicos. Assim, os objetivos deste trabalho foram avaliar a eficiência de Heterorhabditis sp. RSC01 e Steinernema carpocapsae All, aplicados de forma isolada ou combinada, e em diferentes períodos de infestação do solo com larvas de C. capitata. Para o primeiro bioensaio os tratamentos foram: S. carpocapsae; Heterorhabditis sp.; S. carpocapsae + Heterorhabditis sp. (ambos aplicados logo após a transferência das larvas); S. carpocapsae (aplicado logo após a transferência das larvas) + Heterorhabditis sp. (aplicado 12 horas após a transferência das larvas) e S. carpocapsae (aplicado 12 horas após a transferência  das larvas) + Heterorhabditis sp. (aplicado logo após a transferência das larvas). Para o segundo bioensaio os tratamentos foram: aplicação do nematóide e, em seguida, infestação do solo com as larvas; aplicação do nematóide e, após 24 horas, infestação do solo com as larvas; infestação do solo com as larvas e, 24 horas após, aplicação do nematóide. Foram transferidas dez larvas de C. capitata para potes plásticos contendo 100 g de solo e aplicados 3 mL de suspensão com 125 JI cm-2. No tratamento controle foram aplicados 3 mL de água. A avaliação da mortalidade foi realizada após cinco dias e a confirmação foi feita através da observação dos sintomas característicos do ataque de nematóides e da dissecação dos cadáveres. Verificou-se que Heterorhabditis sp. e S. carpocapsae foram eficientes no controle de larvas de C. capitata quando aplicados na superfície do solo, de forma isolada ou combinada, com mortalidade variando entre 26 e 74%. Em relação ao intervalo de aplicação, S. carpocapsae foi mais eficiente quando aplicado no momento da infestação do solo e 24 horas antes da infestação (80 e 90% de mortalidade, respectivamente). Por outro lado, Heterorhabditis sp. apresentou maior eficiência somente quando aplicado 24 horas antes da infestação do solo  (90% de mortalidade)

Patogenicidade de fungos entomopatogênicos a três espécies de ácaros em cafeeiro

Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) and Oligonychus ilicis (McGregor, 1917) (Acari: Tenuipalpidae, Tetranychidae) are considered the main pest mites of coffee plants (Coffea spp.), causing damages such as leaf fall and reduction of the photosynthetic foliar area. Among their main natural enemies, the entomopathogenic fungi and predatory mites have great potential for biological control. However, the entomopathogenic fungi can, occasionally, also infect the predatory mites. The objective of this work was to evaluate the pathogenicity of entomopathogenic fungi to the pest mites B. phoenicis and O. ilicis and to the predatory mite Iphiseiodes zuluagai Denmark & Muma, 1972 (Acari: Phytoseiidae). The experiments were carried out in a laboratory, using four strains of the entomopathogenic fungi Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. and one of the Lecanicillium sp. The mites were exposed to the fungi by spraying the pathogen in a Potter tower. For the B. phoenicis mite, the Lecanicillium sp. UFLA 70 strain caused 100% mortality in three days of exposure. For the O. ilicis species, the most effective treatments were UFLA 13 (B. bassiana) and UFLA 70 (Lecanicillium sp.) strains, which caused 70% of mortality. Most of the tested fungi strains were not pathogenic to the predator I. zuluagai, causing low mortality. Of all the fungi tested in this experiment, the most effective for B. phoenicis and O. ilicis was UFLA 70 of Lecanicillium sp., which caused high mortality of these pests, but did not cause a high mortality rate of the predatory mite I. zuluagai.Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) e Oligonychus ilicis (McGregor, 1917) (Acari: Tenuipalpidae, Tetranychidae) são considerados os principais ácaros-pragas do cafeeiro (Coffea spp.), pois causam danos, como a desfolha e a redução de área foliar de fotossíntese. Dentre os inimigos naturais associados, os fungos entomopatogênicos e os ácaros predadores têm grande potencial para serem utilizados no controle biológico de ácaros-praga; entretanto, os fungos podem ocasionalmente também infectar ácaros predadores. Objetivou-se com este trabalho avaliar a patogenicidade de fungos entomopatogênicos aos ácaros-praga B. phoenicis e O. ilicis e sobre o ácaro-predador Iphiseiodes zuluagai Denmark &amp; Muma, 1972 (Acari: Phytoseiidae). Os bioensaios foram realizados em laboratório, utilizando-se quatro isolados do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. e um de Lecanicillium sp., expondo os ácaros aos fungos mediante sua pulverização em torre de Potter. Para o ácaro B. phoenicis, o isolado UFLA 70 de Lecanicillium sp. promoveu 100% de mortalidade em três dias de exposição. Para a espécie O. ilicis, os tratamentos mais efetivos foram os isolados UFLA 13 (B. bassiana) e UFLA 70 (Lecanicillium sp.), os quais promoveram uma mortalidade de 70%. A maioria dos isolados não foi patogênica ao ácaro predador I. zuluagai, considerando que causou baixa mortalidade a ele. Dos fungos testados neste experimento, o isolado mais efetivo para B. phoenicis e O. ilicis foi UFLA 70 de Lecanicillium sp., que promoveu alta mortalidade dessas pragas, além de não causar elevada mortalidade ao caro predador I. zuluagai

Utilization of Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. and Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. for the control of stored grain pests

Determinou-se a patogenicidade de isolados dos fungos Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. e Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. sobre Sitophilus oryzae (L.1763). S. zeamais Mots., 1855 (Coleoptera, Curculionidae) e Rhyzopertha dominica (Fabr., 1792) (Coleoptera, Bostrichidae). Foi realizado um screening com 72 isolados das duas espécies de fungos que permitiu a seleção de dois isolados de B. bassiana mais virulentos às pragas estudadas. Foram determinadas, em seguida, as dosagens necessárias para aplicação do patógeno nos grãos, bem como estudos de aplicação dos conídios formulados com diferentes inertes. Existe uma grande variabilidade na patogenicidade dos isolados testados. As três pragas são suscetíveis a Bassiana e M. anisopliae, sendo os isolados da primeira espécie de fungo mais eficazes que os da segunda. A espécie R. dominica é a mais suscetível aos patógenos testados. A adição de diferentes inertes aos conídios de B. bassiana não favorece a eficácia do patógeno para o controle de S. oryzae quando comparados com o fungo puro.The pathogenicity of isolates of the fungi Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. and Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. on Sitophilus oryzae (L., 1763), S. zeamais Mots., 1855 (Coleoptera, Curculionidae) and Rhyzopertha dominica (Fabr. 1792) (Coleoptera, Bostrichidae) was evaluated. Further studies were carried out to determine the appropriate dosages for pathogen application on the grains and to evaluate the efficacy of conidia formulated with different inerts. There is a high variability among the isolates tested. The fungus B. bassiana is more efficient than M. anisopliae, R. dominica is the most susceptible species to the fungi tested. The addition of different inerts to B. bassiana conidia did not increase the efficacy of the pathogen on the control of S. oryzae when compared to the pure fungus (conidia)

Deslocamento vertical de nematóides entomopatogênicos (Rhabditida: Heterorhabditidae) na busca por Dysmicoccus texensis (Tinsley) (Hemiptera: Pseudococcidae) em laboratório e casa-de-vegetação Vertical displacement of entomopathogenic nematodes (Rhabditida: Heterorhabditidae) in search of Dysmicoccus texensis (Tinsley) (Hemiptera: Pseudococcidae) under laboratory and greenhouse conditions

Vários fatores devem ser considerados na avaliação da eficiência de um entomopatógeno no controle de um inseto-praga. Com relação aos nematóides entomopatogênicos, além da patogenicidade e virulência, é importante conhecer a capacidade de busca, pois quanto maior sua eficiência, maior a chance de encontro com o hospedeiro. Assim, neste trabalho, objetivou-se avaliar o deslocamento vertical de nematóides entomopatogênicos (Heterorhabditis), visando ao controle da cochonilha-da-raiz-do-cafeeiro Dysmicoccus texensis (Tinsley). Para avaliação em laboratório, foi feito teste em coluna de areia de 5 cm (em delineamento inteiramente casualizado) onde os isolados CCA e JPM3 foram aplicados em suspensão aquosa no topo da coluna em três concentrações (50, 100 e 500 JIs/inseto), com avaliação da mortalidade após 5 dias. No experimento de coluna de solo, foi usada uma coluna de 25 cm, composta por cinco extratos de 5 cm. Foram utilizados dois isolados (CCA e JPM3) e dois métodos de aplicação: cadáver infectado e suspensão aquosa, ambos avaliados nas diferentes profundidades. O experimento foi conduzido num delineamento fatorial 3x2x5, em condições de casa-de-vegetação. No experimento de coluna de areia, não houve diferença entre os isolados avaliados e ambos alcançaram valor de 92% de mortalidade. No experimento de deslocamento em coluna de solo, observou-se que JPM3 foi mais eficiente que CCA, nos dois métodos de aplicação avaliados. Quanto aos métodos de aplicação, o de suspensão aquosa apresentou melhores resultados para os dois isolados, e JPM3 aplicado em suspensão aquosa, foi o melhor tratamento em quase todas as profundidades avaliadas.Many factors must be considered in evaluating the efficiency of an entomopathogen in the control of an insect pest. With regards to entomopathogenic nematodes, in addition to their pathogenicity and virulence, it is important to know the ability to search the host, which is directly linked with its efficiency. The objective of this study was to evaluate the vertical displacement of entomopathogenic nematodes (Heterorhabditis) to control the coffee root scale Dysmicoccus texensis (Tinsley). A test was conducted in a sand column of 5 cm depth under laboratory conditions, using a randomized design, with the strains CCA and JPM3 being applied in aqueous suspension at the top of the column in three concentrations (50, 100 and 500 IJs/insect), with evaluation of mortality after 5 days. It was also conducted an experiment in a 2x2x6 factorial design, at greenhouse conditions with a soil column of 30 cm depth, composed of six extracts of 5 cm. Two nematode strains (CCA and JPM3) and two methods of application (infected cadaver and aqueous suspension) were evaluated at different depths. There was no difference between the strains evaluated in the laboratory experiment, and both reached values of 92% mortality. In the experiment conducted at the greenhouse, it was observed that JPM3 was more efficient than CCA, at the two methods of application assessed. Regarding With application methods, aqueous suspension showed better results for both strains and JPM3 was the best treatment in almost all depths evaluated

Heterorhabditis amazonensis RSC5 (Rhabditida: Heterorhabditidae) movement and host recognition

Response of Heterorhabditis amazonensis RSC5 to compounds released by different host insects and its virulence level to several insect hosts like Galleria mellonella, Mycotretus apicalis and Tenebrio molitor were evaluated in this study, and compared with other entomopathogenic nematode species like Steinernema carpocapsae All and Steinernema riobrave 355. Tests were performed in Petri dishes with agar-water 2% to determine nematode movement toward the insect with and without opportunity of choosing different insect hosts. Evaluations were made quantifying the proximity of infective juveniles (IJs) to the insect as a source of allurement. In order to determine the displacement of IJs in a closed soil condition, a test was carried out in an arena with sand. The nematode was virulent to the target insects. When nematode and insect were released on agar-water, IJs moved toward the stimulus, with H. amazonensis showing preference for certain insects. In the arena with sand S. carpocapsae caused lower insect mortality (70% +/- 8.9 for G. mellonella) than H. amazonensis and S. riobrave (80% +/- 6.5 and 99% +/- 0.0). Heterorhabditis amazonensis was able to find and choose its hosts (G. mellonella and T. molitor), similarly to S. riobrave behavior, and located them more effectively than S. carpocapsae. The virulence of H. amazonensis was thus similar to S. riobrave, and this characteristic could be promising to introduce this native species in integrated pest management programs.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq

Host-seeking behavior of the Heterorhabditis amazonensis nematode in response to stimulant sources1

<div><p>ABSTRACT Several species of entomopathogenic nematodes have different host-seeking methods, and could be considered as "ambusher" or "cruiser". These differences may depend on how the nematodes detect the volatile signals used as cues for foraging. This study aimed to evaluate the locomotor response of Heterorhabditis amazonensis RSC5 to the compounds from root exudates of different plants, as well as to stimulants produced by the presence of insects or to the feeding activity of insects on plants. Arenas with agar-water substrates, containing root exudates from corn, bean, soybean, cucumber, garlic and tomato seedlings, were assembled to determine the substrates possibly preferred by H. amazonensis.Arenas with sand were also constructed to include, besides the seedling root exudates, treatments containing Spodoptera frugiperda, garlic seedlings and S. frugiperda feeding on garlic seedlings. The H. amazonensis species was attracted to the volatile chemicals emitted by all the root exudates tested, especially the exudate from garlic seedlings. However, it showed the greatest attraction to the combination of garlic seedlings and S. frugiperda, indicating that the search of H. amazonensis for its host is enhanced by the association between the insect and the volatile chemical compounds produced by plants, when attacked by insects.</p></div