Nitrate reductase activity in the diatom Biddulphia longicruris: characterization and daily oscillation

Nitrate reductase (NR) activity was studied in the marine diatom Biddulphia longicruris. During 24 hours of sampling, NR activity was found during day time and in the transition day-night. Nitrite anions, the product of nitrate reduction, was released by the cells at the times NR was active, and accumulated in the culture medium. Whenever the cultures of B. longicmris were submitted to nitrogen deprivation, NR activity could not be detected. In vitro determination of KM values for NR using nitrate or NADH were respectively 50//M and 80 /*M. Temperature and pH dependence of NR activity were also determined for this organism.A atividade de nitrato redutase (NR) foi estudada na diatomácea marinha Biddulphia longicruris. A NR é a enzima responsável pelo processo de assimilação de nitrato. O nitrato é reduzido no interior da célula a nitrito pela ação da NR. Esta enzima é normalmente oligomérica e utiliza o NADH como substrato doador de elétrons. Em alguns organismos também são encontradas NRs capazes de utilizarem o NADPH como doador eletrônico para a redução do nitrato a nitrito. Para a diatomácea B. longicmris foram apresentadas evidências de que a sua NR é específica para NADH e que a redução de nitrato em presença de NADPH não acontece. Determinações in vitro dos valores das constantes de Michaelis-Menten (KM) usando nitrato e NADH como substratos, são respectivamente 50µ e 80µM. A temperatura ótima de reação enzimática e a sua dependência ao pH também foram estudadas. Cultivos de B. longicmris foram acompanhados por períodos de 24 horas e foi mostrado que a atividade de NR é encontrada em maiores níveis durante os períodos de transição de luz/escuro. Os anions nitrito, produtos da redução de nitrato, são eliminados pelas células nos períodos de maior atividade de NR e se acumulam no meio de cultura. Células submetidas à ausência de nitrato apresentam uma repressão da expressão de NR, sendo ativadas quando pulsos de nitrato são fornecidos a estas culturas

The influence of osmotic shocks on the growth rate and chlorophyll-a content of planktonic algae species

Estudou-se o efeito de variações de salinidade sobre as respostas de crescimento e o conteúdo de clorofila-α de quatro espécies de algas planctónicas (Phaeodactylum tricornutum, Tetraselmis gracilis, Minutocellus polymorphus, Chaetoceros sp), usando a técnica de culturas estanques. P. tricornutum, apresentando altos valores de taxas máximas de crescimento (div d-1) em todo o gradiente de salinidade experimental, revelou uma alta capacidade de ajuste metabólico quando submetida a choques osmóticos. T. gracilis, M. polymorphus e Chaetoceros sp foram capazes de deslocar o ótimo de salinidade para a taxa máxima de crescimento, em função da salinidade de pré-cultivo. As quatro espécies estudadas mostraram oscilações da taxa específica de crescimento (div d-1) e do conteúdo de clorofila-α (pg cel-1), relacionadas aos ciclos de claro-escuro.The effect of salinity changes on the growth responses and chlorophyll-α content of four species of planktonic algae (Phaeodactylum tricornutum, Tetraselmisgracilis, Minutocelluspotymorphus, Chaetoceros sp) was evaluated using a batch culture technique. P. tricornutum, showing high values of maximum growth rate (div d-1) over the entire salinity range, revealed a great capability of metabolic adjustment when subjected to osmotic shocks. T. gracilis, M. polymorphus and Chaetoceros sp were able to displace the salinity optimum related to the maximum growth rate, depending on the preconditioning salinity. The four studied species showed oscillations of specific growth rate (div d-1) and chorophyll-α content (pg cell-1) related to light-dark cycles

Alguns aspectos metodológicos da medida da excreção de matéria orgânica pelo fitoplâncton por espectrometria de cintilação líquida

Some aspects of the procedures to measure dissolved organic matter (DOM) released by phytoplankton account for important sources of errors. These aspects include: cell damage upon filtration of samples, residual inorganic 14C in the filtrates, NaH14CO3 ampoule contaminations and the low radiation activity proper to the released samples. Some experiments on these procedural problems were carried out and their effects on the released DOM were evaluated. A procedure to use control samples to avoid errors in the technique of DOM analysis by the liquid cintillation counter is described. Experiments on the validity of stocking preserved filtrates of natural plankton populations and algal cultures were also carried out for long periods prior to the radioactivity measurements

Data on mortality from external causes and events of undetermined intent, Paraná State, Brazil, 1979 to 2005

This study analyzed the quality of data from the Mortality Information System (SIM) for deaths due to external causes in the State of Paraná, Brazil, 1979 to 2005, focusing on events of undetermined intent. Deaths were grouped in motor vehicle accidents, homicides, suicides, and events of undetermined intent, and proportional mortality and relative annual variation of rates over the three-year period were analyzed. Motor vehicle accidents (more than 30% of the total) were the most frequent causes of death throughout the period, and since 1997 homicides have become the second most frequent cause. Deaths due to events of undetermined intent caused by weapons (firearms or knives) decreased from 4.8% in 1981 to 0.3% in 2005. Mortality rates for events of undetermined intent (overall) decreased from 14.9 deaths per 100,000 inhabitants in 1979-81 to 2.0 in 2003-05. Annual percentage variation was -13.1% from 1980 to 1985, -6% from 1996 to 2000, and -11% from 2000 to 2004. The findings show the good quality of SIM data on external causes in the State of Paraná, allowing analyses with the potential to support programs to prevent injuries as well as health promotion measures.Foi analisada a qualidade do Sistema de Informações sobre Mortalidade (SIM) para óbitos por causas externas no Estado do Paraná, Brasil, entre 1979 e 2005, focalizando os eventos de intenção indeterminada. Os óbitos foram agrupados em acidentes de transporte, homicídios, suicídios, eventos de intenção indeterminada, e calculadas a mortalidade proporcional e a variação percentual anual dos coeficientes entre triênios. Os acidentes de transporte foram as causas mais freqüentes de óbito no período e, a partir de 1997, os homicídios passam à segunda posição. Os óbitos por eventos de intenção indeterminada por arma (de fogo ou branca) reduziram de 4,8% em 1981 para 0,3% em 2005. Os coeficientes dos eventos (todos) de intenção indeterminada passaram de 14,9 óbitos por 100 mil habitantes em 1979/1981 para 2,0 em 2003/2005. A variação percentual anual foi de -13,1% entre 1980 e 1985; -6% entre 1996 e 2000 e -11% entre 2000 e 2004. Os resultados evidenciam a boa qualidade do SIM sobre causas externas no Estado do Paraná, permitindo análises com potencial para subsidiar ações de prevenção e promoção da saúde.223228Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq

Long term changes in the culture medium composition and cellular biochemistry of Phacodactylum tricomutum (Bohlin), in batch cultures

P. tricornutum was grown in batch cultures under 21ºC temperature and continuous irradiance of 183 µE.m-2 . s-1, provided by fluorescent light tubes. Cultures growth were followed by cell countings, "in vivo" fluorescence and cellular protein, carbohydrate and chlorophyll-α content. The maximum value of protein/carbohydrate ratio was found at the exponential phase and the minimum value at the stationary phase. This ratio characterizes the physiological stage of the culture. Cell uptake rates for nitrate, ammonium and phosphate from the media were higher during the lag-phase. Nitrite excretion by the cells were detected following nitrate uptake

Evaluation of produced water toxicity from an oil maritime terminal through Skeletonema costatum toxicity tests

The liquid effluent from an oil maritime terminal, with produced water as the main component, had its toxicity evaluated through toxicity tests with the diatom Skeletonema costatum. Two previously treated effluent samples (effluents A and B), were provided by PETROBRAS for the experiments. Both samples presented high salinity (67 for effluent A and 62 for effluent B) and low pH values (6.2), whereas total sulphide, phenol and nutrient content, dissolved/dispersed petroleum hydrocarbon concentration, BOD and COD values were quite different from each other. During the toxicity experiment, three replicate flasks with samples for each treatment were exposed to a light radiation of 266µE m² S-1 and maintained under a 10 h/14 h lightldark cycle, at a temperature of 24 :t 2ºC. The EC50 values could not be accurately estimated for effluent A: 60 h and 132 h after starting the experiment they were below 3% and between 3-6% effluent concentration, respectively. Synergistic effects between effluent toxicity and salinity on the growth of S. costatum were detected. The effluent B showed higher toxicity: the EC5O values were 0.17% and 0.40% of effluent concentrations, after 48 h and 96 h, respectively. These results evidenced the deleterious effects of residual organic compounds contained in the aqueous effluents from the oil terminal under the present pretreatment on S. costatum. In the light of the present data, the direct disposal ofthese effluents into São Sebastião Channel waters might be very hazardous to its indigenous biota.A toxicidade do efluente líquido do "Dutos e Terminais Centro-Oeste São Paulo" (DTCS) terminal marítimo de petróleo da PETROBRAS, em São Sebastião (SP, Brasil), cujo principal componente é a água de produção, foi avaliada através de testes de toxicidade com a diatomácea Skeletonema costatum. Amostras de dois efluentes (A e B), previamente tratados pela PETROBRAS, foram utilizadas nos experimentos. As duas amostras apresentaram alta salinidade (A=67; B=62) e baixo valor de pH (6,2), enquanto que as suas concentrações de sulfetos, fenóis e hidrocarbonetos de petróleo dissolvidos/dispersos, bem como os seus valores de DBO e DQO, foram bastante distintos. Nos experimentos de toxicidade, os frascos experimentais, em triplicata, para cada tratamento foram expostos à radiação luminosa fluorescente de 266 µm² S-1 e mantidas em um ciclo luz/escuro de 10 h/14 h, a uma temperatura de 24 :t 2ºC. Os valores de CE50 não puderam ser determinados com precisão para o efluente A: após 60 h e 132 h do início dos experimentos esses valores estavam abaixo de 3% e entre 3-6% da concentração de efluente, respectivamente. Foi observado sinergismo entre a toxicidade e a salinidade do efluente sobre o crescimento de S. costatum. O efluente B apresentou uma toxicidade mais elevada: os valores de CEso foram 0,17% e 0,40% da concentração do efluente, após 48 h e 96 h, respectivamente. Estes resultados evidenciaram claramente os efeitos deletérios dos compostos orgânicos residuais contidos no efluente líquido do DTCS, sobre S. costatum. Pode-se concluir que a disposição do efluente nas águas do canal de São Sebastião poderá ser prejudicial à biota local

Salinity and temperature effects on the growth and chlorophyll-a content of some planktonic aigae

The effect of salinity (0-40 %o) and temperature (11-36ºC, at 5ºC intervals) variations on maximum growth rate (div d-1), maximum yield (logio cell number) and chlorophyll-&#945; content (pg cell-1) of four planktonic algae was examined under laboratory conditions. Phaeodactylum tricornutum grew over the entire range of experimental salinities, at 11-26 ºC. The highest maximum growth rates ( 1.6 div d-1) occurred between 9-30 %o and 16-26 ºC. Optimum salinity range for maximum yield (7.0) was found at 9-35 %c, under 16 ºC. Tetraselmis gracilis reproduced from 4 to 40 %o at 11-31 ºC, with the highest values of maximum growth rate ( 1.6 div d-1) and maximum yield (6.1) occurring at salinities between 14-40 %o at 11-21 ºC and 11-16 ºC, respectively. Minutocellus polymorphic and Chaetoceros sp grew between 9-40 %o and 11-31 ºC. Their highest maximum growth rates (2.1 and 2.6 div d-1, respectively) were found at 31ºC, between 20-35 %o and 20-40 %o, respectively. The highest maximum yields for AT. polymorphic (7.2) were recorded between 16-21 ºC at 20-40 %o and for Chaetoceros sp (6.8), between 25-40 %o at 16-31ºC. Chlorophyll-a content per cell was not conspicuously associated to temperature and salinity for the four species. At low salinity extremes, when cell division was inhibited, an increase in the amount of chlorophyll-a per cell was detected.Estudou-se o efeito de variações de salinidade (0-40 %o) e temperatura (11-36ºC, em intervalos de 5ºC) sobre a taxa máxima de crescimento (div d-1), o rendimento máximo (logio nº cel ml"¹) e o conteúdo de clorofíla-a (pg cel-1) de quatro espécies de algas planctónicas, sob condições de laboratório. Phaeodactylum tricornutum cresceu em toda a amplitude de salinidade experimental e entre 11-26ºC. As mais altas taxas de crescimento (1.6 div d-1) foram obtidas entre 9-30 %o e 16-26ºC. O ótimo de salinidade para o rendimento máximo (7.0) foi observado entre 9- 35%o, à 16ºC. Tetraselmis gracilis se reproduziu nas salinidades de 4 a 40 o e nas temperaturas de 11 a 31ºC, com os mais altos valores de taxas máximas de crescimento (1.6 div d-1) e rendimento máximo (6.1), ocorrendo entre 14-40 %o, nas temperaturas entre 11-21ºC e 11-16ºC, respectivamente. Minutocellus polymorphic e Chaetoceros sp cresceram entre 9-40 %o e 11-31 ºC. Os valores mais altos para as taxas máximas de crescimento (2.1 e 2.6 div d-1, respectivamente) foram obtidos à 31 ºC, entre 20-35 %o e 20-40%o, respectivamente. Os máximos rendimentos para M polymorphic (7.2) foram observados entre 16-21 ºC e 20-40%o< e para Chaetoceros sp (6.8), entre 25-40 %o e 16-31 ºC. Nas quatro espécies estudadas, o conteúdo de clorofíla-a por célula não se associou claramente às variações de temperatura e salinidade. Nos extremos baixos de salinidade, em que a divisão celular foi inibida, verificou-se um aumento da concentração celular de clorofila-a