Mise au point du dosage de 8 organophosphores en GC/MS (application à un cas d'intoxication volontaire au dichlorvos)

Nous avons mis au point et validé une technique de quantification simple, rapide et reproductible de 8 organophosphorés en GC/MS. Les échantillons sont traités par extraction liquide/liquide. Le rendement d'extraction des différentes molécules varie de 20 à 123%. Cette méthode présente une exactitude comprise entre 97 et 117,4%. Les coefficients de variation intra et inter journaliers sont inférieurs à 15%. Nous avons appliqué la technique décrite précédemment aux différents prélèvements ont nous disposions et provenant d'une personne décédée suite à une ingestion volontaire de dichlorvos. Des concentrations très importantes de DDVP dans le sang cardiaque (4,35æg/ml) t dans le cœur (1,4mg/ml) ont été observées. Les concentrations du sang périphérique et des trines sont de 1,3 æg/ml et celle du foie est indétectable. La quantité retrouvée dans le foie est le 140g. Nous rapportons le premier cas français d'intoxication et de distribution tissulaire de dichlorvos.A simple, rapid and reproductive method for the quantification of 8 OP pesticides in human biological matrice, using GC/MS is presented. The biological assay were extracted using a liquid/liquid extraction. Extraction recovery were in the ranges between 20 and 123%. The accuracy of the procedure were ranged from 97 and 117,4%. This method is found repeatable and yield good intra and inter precision (respectively .< 14,8% and < 15%) for all compounds. .. The different blood levels and tissues distribution of DDVP are determined in a case of fatal self poisoning using the method described above. High concentration .are found in cardiac blood and heart (respectively 4.35 æg/ml and 1.4 mg/ml). The concentration of DDVP in peripheric blood and urine are 1.3 æg/ml and the quantity of the liver is not detectable. The remaining DDVP amount in the stomach was calculated as 140 g. We have described the first case of lethal self poisoning and tissues distribution of DDVP in France.CHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocSudocFranceF

Glimepiride pharmacokinetics in overdose

International audienc

Extraction liquide-liquide : théorie, applications, difficultés

Les méthodes d’extraction liquide-liquide (ELL) permettent le transfert d’un soluté initialement contenu dans une phase liquide vers une autre phase liquide non miscible. Elles sont couramment employées en pharmacologie/toxicologie afin de purifier et concentrer les échantillons préalablement à une analyse par méthode chromatographique. Divers paramètres physico-chimiques régissent la réalisation d’une ELL, propres aux solvants employés et aux solutés à extraire. La connaissance de certaines propriétés du solvant telles sa miscibilité à l’eau, sa constante d’acidité, sa constante diélectrique, son moment dipolaire, sa densité, sa volatilité ainsi que sa toxicité permettront le choix de ce solvant seul ou en mélange pour l’extraction d’une substance donnée. De la même manière, la connaissance des propriétés du soluté telles sa structure, sa constante d’acidité, sa lipophilie, la nature et la complexité de la matrice dans laquelle il se trouve, permettront d’optimiser l’extraction, dont l’efficacité sera évaluée par le rendement d’extraction. L’influence de ces paramètres sera abordée dans cette revue, et les différents processus d’ELL (extraction simple, multiple, back-extraction, formation de paires d’ions) seront exposés simultanément avec leurs avantages et inconvénients respectifs. La maîtrise de toutes ces variables permettra à l’opérateur une optimisation des étapes d’ELL lors de la mise au point de méthodes d’analyse en pharmacologie/toxicologie

Évaluation du dépistage de quatre classes de stupéfiants et des benzodiazépines dans le sang total laqué par l'analyseur Evidence Investigator

Introduction : L'objectif de ce travail a été d'évaluer la détection semi-quantitative de 4 classes de stupéfiants (opiacés, cocaïne, cannabinoïdes et amphétamines) et des benzodiazépines dans du sang total laqué par l'analyseur Evidence Investigator$^{\text{\textregistered}}$. 128 échantillons contenant au moins une molécule de ces familles, dosée par une technique de chromatographie couplée à la spectrométrie de masse, ont été analysés. Résultats et discussion : La spécificité de cette méthode a été de 79,0 % pour les amphétamines, 98,1 % pour les cannabinoïdes, et 100 % pour les opiacés, la cocaïne, et les benzodiazépines. La sensibilité a été de 33,3 % pour les amphétamines, 78,4 % pour les benzodiazépines, 93,2 % pour les cannabinoïdes, 93,5 % pour les opiacés et 95,2 % pour la cocaïne. 3,9 % de faux négatifs ont été relevés toutes classes confondues, dus notamment à des analytes présents en faible concentration ou mal reconnus par les anticorps. Les 4,0 % de faux positifs ont été majoritairement observés durant la détection des amphétamines, probablement en raison de la présence d'amines biogènes, comme cela a déjà été rapporté dans la littérature. Une amélioration a pu être apportée à cette technique, en ajoutant un lavage supplémentaire pendant la préparation des échantillons (meilleure qualité de l'image obtenue après lecture par la caméra). Une optimisation des valeurs des seuils de positivité est envisageable pour réduire la proportion de faux négatifs durant la détection des benzodiazépines et des cannabinoïdes. Conclusion : Cette méthode d'immunoanalyse permet une détection satisfaisante des opiacés, de la cocaïne, des cannabinoïdes et des benzodiazépines, l'identification formelle et la quantification devant cependant être effectuées par des techniques de référence (spectrométrie de masse), notamment en médico-légal

Étude de la toxicocinétique de l'hexobarbital après intoxication aiguë polymédicamenteuse

Un homme de 33 ans, comateux, est admis aux urgences pour suspicion d'intoxication aigüe au diazépam et à l'hexobarbital, barbiturique d'action rapide et courte non commercialisé en thérapeutique en France. Le dosage de l'hexobarbital est développé par chromatographie gazeuse couplée à la spectrométrie de masse et validé sur 0,1 mL d'échantillon plasmatique après extraction liquide/liquide. Les concentrations plasmatiques d'hexobarbital et de diazépam retrouvées à l'admission sont respectivement de 15 900 ng/mL et 13 800 ng/mL, toutes deux situées dans les zones considérées comme toxiques. La toxicocinétique de l'hexobarbital a été étudiée sur une période totale de 175 h par analyse cinétique non-compartimentale. La demi-vie retrouvée est de 61,8 h, très supérieure aux demi-vies relevées dans la littérature (entre 3,2 h et 6,9 h). Les causes possibles de cette longue demi-vie observée sont discutées, notamment sur le plan métabolique et pharmacogénétique

Intoxication non létale par la Méthoxétamine : confirmation analytique à l’aide d’un système d’extraction en ligne Turboflow® couplé à de la LC/MS/MS

Objectif : Entièrement automatisable et couplé à la spectrométrie de masse, l’extraction en ligne est un outil alliant rapidité et sensibilité. Le but de cette étude a été de développer une méthode de dosage dans le plasma d’un analogue structural de la kétamine, la méthoxétamine (MXE), par LC/MS/MS précédée d’une extraction en ligne utilisant le système Turboflow®. Méthodes : 100 μL de plasma sont ajoutés au même volume d’une solution de travail de kétamine-d4 dans l’acétonitrile utilisé comme étalon interne (EI). Après centrifugation, 20 μL du surnageant sont injectés sur une colonne d’extraction C18 XL (50 × 0,5-mm). Les analytes retenus sont transférés de la colonne d’extraction vers une colonne analytique Hypersil GOLD (50 × 3-mm; diamètre des particules : 3 μm) puis élués grâce à un gradient de phase mobile tampon formiate/acétonitrile. La MXE et l’EI sont ionisés grâce à une source électrospray en mode positif. Les ions parents [M + H]+ sont m/z 248,1 pour la MXE et m/z 242,1 pour l’EI. L’ion fils le plus abondant après fragmentation est utilisé pour la quantification, soit m/z 203,1 pour la MXE et 224,1 pour l’EI. Résultats : La justesse est comprise entre 96,8 % et 108,8 % et les CV intra- et inter-jour  <8,8 % sur l’ensemble de la gamme de calibration de 2,0 ng/mL (LOQ) jusqu’à 1000,0 ng/mL. Aucun effet matrice n’a été observé. Conclusion : Le système Turboflow® couplé à la LC/MS/MS permet une quantification rapide de composés comme la MXE dans le plasma sans extraction préalable et sans effet matrice. Cette méthode a permis avec succès la confirmation analytique d’une intoxication aiguë à la MXE, montrant chez le patient une concentration plasmatique de 136,0 ng/mL

Correlation between Saliva Levels and Serum Levels of Free Uremic Toxins in Healthy Volunteers

International audienceThe objective of the present study was to investigate the putative correlation between the saliva concentration and free serum concentration for 10 uremic toxins (UTs; eight protein-bound solutes: 3-carboxy-4-methyl-5-propyl-2-furanpropanoic acid (CMPF), hippuric acid (HA), indole-3-acetic acid (3-IAA), indoxyl sulfate (I3S), kynurenic acid (KA), kynurenine (KYN), p-cresyl glucuronide (pCG), and p-cresyl sulfate (pCS); two free, water-soluble, low-molecular weight solutes: phenylacetylglutamine (PAGN) and trimethylamine N-oxide (TMAO); and three precursors: tyrosine (Tyr), phenylalanine, and tryptophan). Saliva samples and blood samples were collected simultaneously from 18 healthy volunteers. After the addition of internal standards, 50 µL of saliva or serum were precipitated with methanol. UTs and precursors were quantified using a validated LC-MS/MS method. The saliva–serum correlation was statistically significant (according to Spearman’s coefficient) for six UTs (TMAO, HA, I3S, pCS, 3-IAA, and CMPF). Tyr presented a weak saliva-serum correlation (p = 0.08), whereas the other two precursors did not show a saliva–serum correlation. For three UTs (KYN, KA and pCG), we were unable to test the correlation since the saliva or serum levels were too low in many of the volunteers. The present study is the first to report on the saliva concentrations of TMAO, KYN, HA, PAGN, pCG, and 3-IAA