Carcinoma mucoepidermoide della base della lingua

Mucoepidermoid carcinoma (MEC) is the most common malignant, locally-invasive tumour of the salivary glands, and accounts for approximately 35% of all malignancies of the major and minor salivary gland. Minor salivary glands are scattered in different areas of the oral cavity such as palate, retromolar area, floor of the mouth, buccal mucosa, lips and tongue. MECs of tongue base are not common. We present a rare case of MEC localised at the tongue base in a 42-year-old Caucasian woman and discuss the histopathological types, management and review the literature. Adequate intra-oral excision was the treatment of choice in this case and in low-grade MEC. Prognosis of MEC is a function of the histological grade, adequacy of excision and clinical staging. © 2015, Pacini Editore s.r.l. All rights reserved

An ex vivo model contributing to the diagnosis and evaluation of new drugs in cystic fibrosis

La fibrosi cistica (FC) è una malattia autosomica recessiva causata da mutazioni nel gene CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator). Finora sono state descritte circa 2000 mutazioni, ma per la maggior parte di esse è difficile definirne leffetto senza complesse procedure in vitro. Abbiamo effettuato il campionamento (mediante brushing), la cultura e lanalisi di cellule epiteliali nasali umane (HNEC) utilizzando una serie di tecniche che possono aiutare a testare leffetto delle mutazioni CFTR. Abbiamo eseguito 50 brushing da pazienti FC e controlli, e in 45 casi si è ottenuta una coltura positiva. Utilizzando cellule in coltura: i) abbiamo dimostrato lespressione ampiamente eterogenea del CFTR nei pazienti e nei controlli; ii) abbiamo definito leffetto di splicing di una mutazione sul gene CFTR; iii) abbiamo valutato lattività di gating di CFTR in pazienti portatori di differenti mutazioni; iv) abbiamo dimostrato che il butirrato migliora in modo significativo lespressione di CFTR. I dati provenienti dal nostro studio sperimentale dimostrano che luso del modello ex-vivo di cellule epiteliali nasali è un importante e valido strumento di ricerca e di diagnosi nella studio della FC e può anche essere mirato alla sperimentazione ed alla verifica di nuovi farmaci. In definitiva, in base ai nostri dati è possibile esprimere le seguenti conclusioni: 1) il prelievo delle cellule epiteliali nasali mediante brushing è applicabile senza alcuna anestesia ed è ben tollerato da tutti i pazienti affetti da FC (bambini e adulti), è scarsamente invasivo e facilmente ripetibile, è anche in grado di ottenere una sufficiente quantità di HNECs rappresentative, ben conservate, idonee allo studio della funzionalità di CFTR; 2) la conservazione delle cellule prelevate è possibile fino a 48 ore prima che si provveda allallestimento della coltura e ciò permette di avviare studi multicentrici con prelievi in ogni sede e quindi di ottenere una ampia numerosità campionaria; 3) la coltura di cellule epiteliali nasali può essere considerata un modello adatto a studiare leffetto molecolare di nuove mutazioni del gene CFTR e/o mutazioni specifiche di pazienti carriers dal significato incerto; 4) il modello ex-vivo delle HNECs consente inoltre di valutare, prima dellimpiego nelluomo, leffetto di farmaci (potenziatori e/o correttori) sulle cellule di pazienti portatori di mutazioni specifiche di CFTR; tali farmaci possono modulare lespressione genica del canale CFTR aprendo così nuove frontiere terapeutiche e migliori prospettive di vita per pazienti affetti da una patologia cronica come la Fibrosi Cistica; 5) la metodologia da noi istituita risulta essere idonea alla misura quantitativa, mediante fluorescenza, dellattività di gating del canale CFTR presente nelle membrane delle cellule epiteliali nasali prelevate da pazienti portatori di differenti genotipi; in tal modo è possibile individuare: a) pazienti FC portatori di 2 mutazioni gravi con unattività < 10% (in rapporto ai controlli -100%), b) soggetti FC portatori contemporaneamente di una mutazione grave e di una lieve con unattività tra 10-30%, c) i cosiddetti portatori carriers- eterozigoti - con unattività tra 40-70%. In conclusione la possibilità di misurare lattività del canale CFTR in HNECs fornisce un importante contributo alla diagnosi di FC, mediante individuazione di un cut-off diagnostico, ed anche alla previsione della gravità fenotipica della malattia; quindi quanto rilevabile dalla misura del suddetto canale permette di prospettare per il futuro la possibilità di valutare meglio i pazienti per i quali il test del sudore ha dato risultati ambigui (borderline o negativi). La metodica da noi sperimentata consente anche di monitorare i pazienti durante il trattamento farmacologico, valutando in tal modo i reali effetti delle nuove terapie

Genotype-phenotype correlation and functional studies in patients with cystic fibrosis bearing CFTR complex alleles

Background The effect of complex alleles in cystic fibrosis (CF) is poorly defined for the lack of functional studies. Objectives To describe the genotype-phenotype correlation and the results of either in vitro and ex vivo studies performed on nasal epithelial cells (NEC) in a cohort of patients with CF carrying cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) complex alleles. Methods We studied 70 homozygous, compound heterozygous or heterozygous for CFTR mutations: p. [Arg74Trp;Val201Met;Asp1270Asn], n=8; p.[Ile148Thr; Ile1023_Val1024del], n=5; p.[Arg117Leu;Leu997Phe], n=6; c.[1210-34TG[12];1210-12T[5];2930C>T], n=3; p. [Arg74Trp;Asp1270Asn], n=4; p.Asp1270Asn, n=2; p. Ile148Thr, n=6; p.Leu997Phe, n=36. In 39 patients, we analysed the CFTR gating activity on NEC in comparison with patients with CF (n=8) and carriers (n=4). Finally, we analysed in vitro the p.[Arg74Trp;Val201Met;Asp1270Asn] complex allele. Results The p.[Ile148Thr;Ile1023_Val1024del] caused severe CF in five compound heterozygous with a class I-II mutation. Their CFTR activity on NEC was comparable with patients with two class I-II mutations (mean 7.3% vs 6.9%). The p.[Arg74Trp;Asp1270Asn] and the p. Asp1270Asn have scarce functional effects, while p. [Arg74Trp;Val201Met;Asp1270Asn] caused mild CF in four of five subjects carrying a class I-II mutation in trans, or CFTR-related disorders (CFTR-RD) in three having in trans a class IV-V mutation. The p.[Arg74Trp;Val201Met; Asp1270Asn] causes significantly (pT] and a class I-II mutation had mild CF or CFTR-RD (gating activity: 18.5-19.0%). Conclusions The effect of complex alleles partially depends on the mutation in trans. Although larger studies are necessary, the CFTR activity on NEC is a rapid contributory tool to classify patients with CFTR dysfunction

Clinical expression of cystic fibrosis in a large cohort of Italian siblings

Background: A clinical heterogeneity was reported in patients with Cystic Fibrosis (CF) with the same CFTR genotype and between siblings with CF. Methods: We investigated all clinical aspects in a cohort of 101 pairs of siblings with CF (including 6 triplets) followed since diagnosis. Results: Severe lung disease had a 22.2% concordance in sib-pairs, occurred early and the FEV1% at 12 years was predictive of the severity of lung disease in the adulthood. Similarly, CF liver disease occurred early (median: 15 years) and showed a concordance of 27.8% in sib-pairs suggesting a scarce contribution of genetic factors; in fact, only 2/15 patients with liver disease in discordant sib-pairs had a deficiency of alpha-1-antitrypsin (a known modifier gene of CF liver phenotype). CF related diabetes was found in 22 pairs (in 6 in both the siblings). It occurred later (median: 32.5 years) and is strongly associated with liver disease. Colonization by P. aeruginosa and nasal polyposis that required surgery had a concordance > 50% in sib-pairs and were poorly correlated to other clinical parameters. The pancreatic status was highly concordant in pairs of siblings (i.e., 95.1%) but a different pancreatic status was observed in patients with the same CFTR mutations. This suggests a close relationship of the pancreatic status with the "whole" CFTR genotype, including mutations in regulatory regions that may modulate the levels of CFTR expression. Finally, a severe course of CF was evident in a number of patients with pancreatic sufficiency. Conclusions: Physicians involved in care of patients with CF and in genetic counseling must be aware of the clinical heterogeneity of CF even in sib-pairs that, at the state of the art, is difficult to explain

Mucoepidermoid carcinoma of the base of tongue

Mucoepidermoid carcinoma (MEC) is the most common malignant, locally-invasive tumour of the salivary glands, and accounts for approximately 35% of all malignancies of the major and minor salivary gland. Minor salivary glands are scattered in different areas of the oral cavity such as palate, retromolar area, floor of the mouth, buccal mucosa, lips and tongue. MECs of tongue base are not common. We present a rare case of MEC localised at the tongue base in a 42-year-old Caucasian woman and discuss the histopathological types, management and review the literature. Adequate intra-oral excision was the treatment of choice in this case and in low-grade MEC. Prognosis of MEC is a function of the histological grade, adequacy of excision and clinical staging. © 2015, Pacini Editore s.r.l. All rights reserved