El extracto acuoso de Phyllanthus orbicularis K protege al ADN plasmídico del daño inducido por las radiaciones ultravioletas

AGRADECIMIENTOS Agradecemos a la Dr. Rosalina Berazain por la autenticación de las especies Phyllanthus orbicularis K colectadas.Objetivo: Evaluar el efecto protector del extracto acuoso de Phyllanthus orbicularis, K ante el daño inducido por las radiaciones UVB y UVC. Material y métodos: Se empleó el ensayo con ADN plasmídico (pBluescript SK II) libre de célula. Se evaluó la capacidad del extracto acuoso de P. orbicularis de inducir roturas de cadenas en el plásmido, a las concentraciones 0,0001-2,0 mg/ml. Se realizaron estudios de protección del extracto frente a las radiaciones UVB y UVC a las concentraciones de 0,1-2,0 mg/ml. Se cuantificó la transmitancia del extracto frente ambos tipos de radiaciones. Resultados: Ninguna de las concentraciones evaluadas resultó genotóxica en 30 min de exposición. Las concentraciones ≥ 1 mg/ml de P. orbicularis sí indujeron roturas de cadenas a tiempos mayores de evaluación. El extracto de P. orbicularis protegió al ADN frente a las radiaciones UVB y UVC a concentraciones ≥ 0,1 mg/ml y 0,5 mg/ml respectivamente. Conclusiones: En nuestras condiciones experimentales, el extracto acuoso de P.orbicularis protege al ADN frente al daño inducido por las radiaciones UV.Aim: The aim of this work was to evaluate the protective effect of aqueous extract of Phyllanthus orbicularis, K from the damage induced by UV radiation. Material and methods: The plasmid-based non cellular system was used. The extract capacity to induce DNA strand breaks was evaluated at 0.0001- 2.0 mg/ml concentrations. The protective effect of extract against UVB and UVC radiation was evaluated at 0.1- 2.0 mg/ml concentrations. The transmittance of extract was measured for both UV radiations. Results: The P. orbicularis aqueous extract was not genotoxic even after 30 min of exposure. Concentrations ≥ 1 mg/ml of extract induced strand breaks at major times of exposition. P.orbicularis extract protected DNA against UVB and UVC radiation at concentrations ≥ 0.1 mg/ml and 0.5 mg/ml respectively. Conclusions: In our experimental conditions, P.orbicularis aqueous extract protects DNA from damage induced by UV radiation.Este trabajo fue realizado por el proyecto de colaboración internacional CAPES (Brasil)- MES (Cuba).El financiamiento y soporte fue brindado por CAPES (São Paulo, Brazil), FAPESP (São Paulo, Brazil) y CNPq (Brasília, Brazil)

Evaluaciones toxicológicas de un extracto acuoso del alga marina Bryothamnion triquetrum (Gmelin) M.A.Howe en estudios in vitro y modelos animales

Objetivo: El objetivo de este trabajo fue evaluar la toxicidad de un extracto acuoso del alga marina Bryothamnion triquetrum. Métodos: El ensayo de Ames se desarrolló con las cepas de S. typhimurium TA 1535, TA 1537 y TA 1538 con y sin activación metabólica. El estudio de citotoxicidad se realizó con células intestinales Caco-2 durante 24 y 48 horas de exposición al extracto y la viabilidad fue evaluada con la técnica de yoduro de propidio. El Estudio de Toxicidad Aguda se realizó con ratones Balc/c machos por vía oral e intraperitoneal y el Ensayo de Toxicidad por Dosis Repetidas se desarrolló con ratas Wistar de ambos sexos, durante 3 meses por vía oral con dosis de 8 y 32 mg/kg. Resultados: En el estudio de citotoxicidad con células Caco-2 se obtuvieron CL50 de 9,3 y 4,5 mg/mL con exposiciones de 24 y 48 horas respectivamente. El ensayo de Ames evidencia que no es mutágeno directo ni promutágeno hasta 1000 μg. La DL50 del extracto por vía intraperitoneal fue de 1205 mg/kg y por vía oral no se observó mortalidad en dosis de 2000 mg/kg. En el estudio de Toxicidad por Dosis Repetidas no se observó toxicidad. Conclusiones: A partir de estos resultados se puede postular que el extracto acuoso del alga marina B. triquetrum es inocuo, consideración necesaria, entre otras, para su posible uso como nutracéutico y/o fitofármaco.Aim: The aim of this work was to evaluate the toxicity of an aqueous extract from seaweed Bryothamnion triquetrum. Materials and Methods: Ames assay was developed with S. typhimurium TA 1535, TA 1537 and TA 1538 with and without metabolic activation. Citotoxicity study was carried out with intestinal cells Caco-2 during 24 and 48 hours of exhibition to the extract and the viability was evaluated with the technique of Propidium iodide. Acute Toxicity was carried out with mice Balc/c males for via oral and intraperitoneal and the Toxicity for Repeated Dose was developed with rats Wistar of both sexes, during 3 months for via oral with dose of 8 and 32 mg/kg. Results: Results of Ames assays showed that this extract is not direct mutagen or promutagen in quantity until 1000 μg. The cytotoxic effect (LC50) of Caco-2 cells after 24 and 48 h of exposition were 9,3 and 4,5 mg/mL respectively. The LD50 of the extract, with intraperitoneal administration was 1205 mg/kg and by oral via not produce mortality in doses until 2000 mg/kg. At the doses of 8 and 32 mg/kg of extract, the repeated oral administration produced no toxic effects. Conclusions: In summary, this paper adds convincing evidences in support of innocuous of the aqueous extract of B.triquetrum. Altogether; these results represent another step towards the use of this natural product as phytotherapeutical agent.CNPq (Brasil), número de proyecto PV 400001/2009 8

Cymbopogon citratus aqueous extract protects plasmid DNA from UVC-induced damage

Esta investigación fue financiada por un proyecto de colaboración bilateral entre Brasil y Cuba, CAPES/MES.Objetivo: Evaluar el efecto protector del extracto acuoso de Cymbopogon citratus (DC) Stapf, ante el daño inducido por las radiaciones UVC. Material y Métodos: Para evaluar si el extracto acuoso de C. citratus era capaz de inducir roturas de cadenas en el ADN, moléculas de plásmido pBluescript SK II fueron tratadas con diferentes concentraciones del extracto (0,01 - 4,0 mg/mL), en los tiempos de exposición: 30, 60 y 90 min. El efecto fotoprotector fue evaluado aplicando el extracto vegetal antes, durante, y después de la irradiación del ADN plasmídico con 200 J/m2 de UVC. La actividad enzimática de T4 endonucleasa V fue empleada para detectar formación de CPDs. Las formas superenrollada y relajada de las moléculas de plásmido fueron separadas electroforéticamente en gel de agarosa. Adicionalmente, se midió la transmitancia del extracto acuoso a la DO de 254 nm. Resultados: Ninguna de las concentraciones evaluadas resultó genotóxica con 30 min de tratamiento. Las concentraciones ≥ 2 mg/mL indujeron roturas de cadenas a los 90 min de incubación. El extracto de C. citratus a concentraciones ≥ 0,5 mg/mL protegió al ADN frente a las radiaciones UVC. Conclusiones: En nuestras condiciones experimentales, el extracto acuoso de C. citratus protege al ADN frente a la genotoxicidad inducida por la luz UVC, previniendo la generación de CPDs, pero no es capaz de eliminarlas una vez formadas.Aim: to evaluate the photoprotective effect of aqueous extract of Cymbopogon citratus (DC) Stapf against UVC-induced damage to ADN. Material and methods: In the experimental procedure, samples of plasmid pBluescript SK II solutions were exposed to C. citratus aqueous extract in 0.01-4.0 mg/mL concentrations during 30, 60 and 90 min. In order to evaluate the photoprotective effect, the vegetal extract was applied before, during and after UVC radiation at 200 J/m2 doses. DNA repair enzymes T4 endonuclease V was employed in order to discriminate CPDs damage. Then, supercoiled and relaxed forms of DNA were separated after electrophoretic migration in agarose gels. Also aqueous extract transmittance was measure at 254 nm OD. Results: None of the concentrations tested were genotoxic in 30 min of exposition. Concentrations ≥ 2 mg/mL induced strand breaks at 90 min of incubation. The C. citratus extract at concentrations ≥ 0.5 mg/ mL protect DNA in front of UVC radiation. Conclusions: In our experimental conditions, C. citratus extract protects DNA from the genotoxicity induced by light UVC, preventing the CPDs generation, but is not able to eliminate DNA damage once formed.Este trabajo fue realizado por el proyecto de colaboración internacional CAPES (Brasil)- MES (Cuba). El financiamiento y soporte fue brindado por CAPES (São Paulo, Brazil)

Xanthium strumarium L. Extracts produce DNA damage mediated by cytotoxicity in in vitro assays but does not induce micronucleus in mice

Xanthium strumarium L. is a member of the Asteraceae commonly used in Cuba, mainly as diuretic. Some toxic properties of this plant have also been reported and, to date, very little is known about its genotoxic properties. The present work aims was to evaluate the potential cytotoxic and genotoxic risk of whole extract from Xanthium strumarium L. whole extract of aerial parts. No positive response was observed in a battery of four Salmonella typhimurium strains, when exposed to concentrations up to 5 mg/plate, with and without mammalian metabolic activation (liver microsomal S9 fraction from Wistar rats). In CHO cells, high concentrations (25–100 μg/mL) revealed significant reduction in cell viability. Results from sister chromatid exchanges, chromosome aberrations, and comet assay showed that X. strumarium extract is genotoxic at the highest concentration used, when clear cytotoxic effects were also observed. On the contrary, no increase in micronuclei frequency in bone marrow cells was observed when the extract was orally administered to mice (100, 500, and 2000 mg/Kg doses). The data presented here constitute the most complete study on the genotoxic potential of X. strumarium L. and show that the extract can induce in vitro DNA damage at cytotoxic concentrations