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    근접 표면 원격 센싱 시스템들을 이용한 지속적 식물 계절 및 태양 유도 엽록소 형광물질 관측

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    학위논문(박사) -- 서울대학교대학원 : 환경대학원 협동과정 조경학, 2022.2. 류영렬.Monitoring phenology, physiological and structural changes in vegetation is essential to understand feedbacks of vegetation between terrestrial ecosystems and the atmosphere by influencing the albedo, carbon flux, water flux and energy. To this end, normalized difference vegetation index (NDVI) and solar-induced chlorophyll fluorescence (SIF) from satellite remote sensing have been widely used. However, there are still limitations in satellite remote sensing as 1) satellite imagery could not capture fine-scale spatial resolution of SIF signals, 2) satellite products are strongly influenced by condition of the atmosphere (e.g. clouds), thus it is challenging to know physiological and structural changes in vegetation on cloudy days and 3) satellite imagery captured a mixed signal from over- and understory, thus it is difficult to study the difference between overstory and understory phenology separately. Therefore, in order to more accurately understand the signals observed from the satellite, further studies using near-surface remote sensing system to collect ground-based observed data are needed. The main purpose of this dissertation is continuous observation of vegetation phenology and SIF using near-surface remote sensing system. To achieve the main goal, I set three chapters as 1) developing low-cost filter-based near-surface remote sensing system to monitor SIF continuously, 2) monitoring SIF in a temperate evergreen needleleaf forest continuously, and 3) understanding the relationships between phenology from in-situ multi-layer canopies and satellite products. In Chapter 2, I developed the filter-based smart surface sensing system (4S-SIF) to overcome the technical challenges of monitoring SIF in the field as well as to decrease sensor cost for more comprehensive spatial sampling. I verified the satisfactory spectral performance of the bandpass filters and confirmed that digital numbers (DN) from 4S-SIF exhibited linear relationships with the DN from the hyperspectral spectroradiometer in each band (R2 > 0.99). In addition, we confirmed that 4S-SIF shows relatively low variation of dark current value at various temperatures. Furthermore, the SIF signal from 4S-SIF represents a strong linear relationship with QEpro-SIF either changing the physiological mechanisms of the plant using DCMU (3-(3, 4-dichlorophenyl)-1, 1-dimethyurea) treatment. I believe that 4S-SIF will be a useful tool for collecting in-situ data across multiple spatial and temporal scales. Satellite-based SIF provides us with new opportunities to understand the physiological and structural dynamics of vegetation from canopy to global scales. However, the relationships between SIF and gross primary productivity (GPP) are not fully understood, which is mainly due to the challenges of decoupling structural and physiological factors that control the relationships. In Chapter 3, I reported the results of continuous observations of canopy-level SIF, GPP, absorbed photosynthetically active radiation (APAR), and chlorophyll: carotenoid index (CCI) in a temperate evergreen needleleaf forest. To understand the mechanisms underlying the relationship between GPP and SIF, I investigated the relationships of light use efficiency (LUE_p), chlorophyll fluorescence yield (Φ_F), and the fraction of emitted SIF photons escaping from the canopy (f_esc) separately. I found a strongly non-linear relationship between GPP and SIF at diurnal and seasonal time scales (R2 = 0.91 with a hyperbolic regression function, daily). GPP saturated with APAR, while SIF did not. In addition, there were differential responses of LUE_p and Φ_F to air temperature. While LUE_p reached saturation at high air temperatures, Φ_F did not saturate. I also found that the canopy-level chlorophyll: carotenoid index was strongly correlated to canopy-level Φ_F (R2 = 0.84) implying that Φ_F could be more closely related to pigment pool changes rather than LUE_p. In addition, I found that the f_esc contributed to a stronger SIF-GPP relationship by partially capturing the response of LUE_p to diffuse light. These findings can help refine physiological and structural links between canopy-level SIF and GPP in evergreen needleleaf forests. We do not fully understand what satellite NDVI derived leaf-out and full leaf dates actually observe because deciduous broadleaf forest consists of multi-layer canopies typically and mixed-signal from multi-layer canopies could affect satellite observation. Ultimately, we have the following question: What phenology do we actually see from space compared to ground observations on multi-layer canopy phenology? In Chapter 4, I reported the results of 8 years of continuous observations of multi-layer phenology and climate variables in a deciduous broadleaf forest, South Korea. Multi-channel spectrometers installed above and below overstory canopy allowed us to monitor over- and understory canopy phenology separately, continuously. I evaluated the widely used phenology detection methods, curvature change rate and threshold with NDVI observed above top of the canopy and compared leaf-out and full leaf dates from both methods to in-situ observed multi-layer phenology. First, I found that NDVI from the above canopy had a strong linear relationship with satellites NDVI (R2=0.95 for MODIS products and R2= 0.85 for Landsat8). Second, leaf-out dates extracted by the curvature change rate method and 10% threshold were well matched with understory leaf-out dates. Third, the full-leaf dates extracted by the curvature change rate method and 90% threshold were similar to overstory full-leaf dates. Furthermore, I found that overstory leaf-out dates were closely correlated to accumulated growing degree days (AGDD) while understory leaf-out dates were related to AGDD and also sensitive to the number of chill days (NCD). These results suggest that satellite-based leaf-out and full leaf dates represent understory and overstory signals in the deciduous forest site, which requires caution when using satellite-based phenology data into future prediction as overstory and understory canopy show different sensitivities to AGDD and NCD.식물 계절 및 식생의 생리학적, 구조적인 변화를 지속적으로 모니터링 하는 것은 육상생태계와 대기권 사이의 에너지, 탄소 순환 등의 피드백을 이해하는데 필수적이다. 이를 관측하기 위하여 위성에서 관측된 정규화 식생 지수 (NDVI) 태양 유도 엽록소 형광물질 (SIF)는 대중적으로 사용되고 있다. 그러나, 우주 위성 기반의 자료는 다음과 같은 한계점들이 존재한다. 1) 아직까지 고해상도의 위성 기반 SIF 자료는 없고, 2) 위성 자료들은 대기의 질 (예, 구름)에 영향을 받아, 흐린 날의 식생의 생리학적, 구조적 변화를 탐지하기 힘들다. 또한, 3) 위성 이미지는 상부 식생과 하부 식생이 혼합되어 섞인 신호를 탐지하기 때문에, 각 층의 식물 계절을 각각 연구하기에 어려움이 있다. 그러므로, 위성에서 탐지한 신호를 평가하고, 식생의 생리학적, 구조적 변화를 보다 정확히 이해하기 위해서는 근접 표면 원격 센싱 시스템을 이용한 실측 자료 기반의 연구들이 요구된다. 본 학위논문의 주 목적은 근접 표면 원격 센싱 시스템을 이용하여 식물 계절 및 SIF를 현장에서 지속적으로 실측하고, 위성 영상 기반의 연구가 갖고 있는 한계점 및 궁금증들을 해결 및 보완하는 것이다. 이 목적을 달성하기 위하여, 아래와 같은 세가지 Chapter: 1) SIF를 관측하기 위한 필터 기반의 저렴한 근접 표면 센싱 시스템 개발, 2)온대 침엽수림에서의 연속적인 SIF 관측, 3)위성 기반의 식물 계절과 실측한 다층 식생의 식물 계절 비교로 구성하고, 이를 진행하였다. SIF는 식생의 구조적, 생리학적 변화를 이해하고, 추정하는 인자로 사용될 수 있어, SIF를 현장에서 관측하기 위한 다양한 근접 표면 원격 센싱 시스템들이 최근 제시되어 오고 있다. 그러나, 아직까지 SIF를 관측하기 위한 상업적으로 유통되는 관측 시스템은 현저히 부족하며, 분광계의 구조적 특성상 현장에서 관측 시스템을 보정 및 관리하기가 어려워 높은 질의 SIF를 취득하는 것은 매우 도전 적인 분야이다. 본 학위 논문의 Chapter 2에서는 SIF를 현장에서 보다 손쉽게 관측하기 위한 필터 기반의 근접 표면 센싱 시스템(Smart Surface Sensing System, 4S-SIF)을 개발하였다. 센서는 대역 필터들과 포토다이오드가 결합되어 있으며, 서보 모터를 사용하여 대역 필터 및 관측 방향을 자동적으로 변경함으로써, 한 개의 포토다이오드가 3개의 파장 범위(757, 760, 770 nm)의 빛 및 태양으로부터 입사되는 광량과 식생으로 반사/방출된 광량을 관측할 수 있도록 고안되었다. 포토다이오드로부터 인식된 디지털 수치 값은 상업적으로 판매되는 초고해상도 분광계(QE Pro, Ocean Insight)와 뚜렷한 선형 관계를 보이는 것을 확인하였다 (R2 > 0.99). 추가적으로, 4S-SIF에서 관측된 SIF와 초고해상도 분광계를 이용하여 추출한 SIF가 선형적인 관계를 이루는 것을 확인하였다. 식생의 생리학적 변화를 일으키는 화학 물질인 DCMU(3-(3, 4-dichlorophenyl)-1, 1-dimethyurea)을 처리했음에도 불구하고, 산출된 SIF들은 선형 관계를 보였다. 본 센서는 기존 시스템들에 비해 사용하기 쉽고 간단하며, 저렴하기 때문에 다양한 시공간적 스케일의 SIF를 관측할 수 있다는 장점이 있다. 위성 기반의 SIF를 이용하여 총일차생산성(gross primary productivity, GPP)을 추정하는 연구는 최근 탄소 순환 연구 분야에서 각광받고 있는 연구 주제이다. 그러나, SIF와 GPP의 관계는 여전히 많은 불확실성을 지니고 있는데, 이는 SIF-GPP 관계를 조절하는 식생의 구조적 및 생리학적 요인을 따로 분리하여 고찰한 연구들이 부족하기 때문이다. 본 학위 논문의 Chapter 3에서는 지속적으로 SIF, GPP, 흡수된 광합성유효복사량 (absorbed photosynthetically active radiation, APAR), 그리고 클로로필과 카로티노이드의 비율 인자 (chlorophyll: carotenoid index, CCI)를 온대침엽수림에서 연속적으로 관측하였다. SIF-GPP 관계의 구체적인 메커니즘 관계를 밝히기 위하여, 광 이용효율 (light use efficiency, LUE_p), 엽록소 형광 수득률 (chlorophyll fluorescence yield, Φ_F) 그리고 SIF 광자가 군락으로부터 방출되는 비율 (escape fraction, f_esc)을 각각 도출하고 탐구하였다. SIF와 GPP의 관계는 뚜렷한 비 선형적인 관계를 보이는 것을 확인했으며(R2 = 0.91 with a hyperbolic regression function, daily), 일주기 단위에서 SIF는 APAR에 대해 선형적이었지만 GPP는 APAR에 대해 뚜렷한 포화 관계를 보이는 것을 확인하였다. 추가적으로 LUE_p 와 Φ_F 가 대기 온도에 따라 반응하는 정도가 다른 것을 확인하였다. LUE_p는 높은 온도에서 포화 되었지만, Φ_F는 포화 패턴을 확인할 수 없었다. 또한, 군락 수준에서의 CCI와 Φ_F가 뚜렷한 상관 관계를 보였다(R2 = 0.84). 이는 Φ_F가 엽록소 색소에 영향을 LUE_p에 비해 더 강한 관계가 있을 수 있음을 시사한다. 마지막으로, f_esc가 태양광의 산란된 정도에 따라 반응을 하여, Φ_F와 LUE_p의 강한 상관 관계를 형성하는데 기여하는 것을 확인하였다. 이러한 발견은 온대 침엽수림에서 군락 수준의 SIF-GPP관계를 생리학적 및 구조적 측면에서 이해하고 규명하는데 큰 도움이 될 것이다. 식물 계절은 식생이 철을 따라 주기적으로 나타내는 변화를 관측하는 반응이다. 식물 계절은 육상생태계와 대기권 사이의 물질 순환을 이해하는데 매우 중요하다. 위성 기반의 NDVI는 식물 계절을 탐지하고 연구하는데 가장 대중적으로 사용된다. 그러나, 활엽수림에서의 위성 NDVI 기반의 개엽 시기 및 성숙 시기가 실제 어느 시점을 탐지하는지는 불분명하다. 실제 활엽수림은 다층 식생 구조의 삼차원으로 이루어져 있는 반면, 위성 영상은 다층 식생의 신호가 섞여 있는 이차원의 결과물이기 때문이다. 따라서, 위성 NDVI 기반의 식물 계절이 다층 식생 구조를 이루고 있는 활엽수림에서 실제 현장 관측과 비교하였을 때 어느 시점을 탐지하는지에 대한 궁금증이 남는다. 본 학위 논문의 Chapter 4에서는 지속적으로 8년 동안 활엽수림내의 다층 식생의 식물 계절을 근접 표면 원격 센싱 시스템을 이용하여 관측하고, 위성 NDVI 기반의 식물 계절과 비교하였다. 다채널 분광계를 상부 식생의 위와 아래에 설치함으로써, 상부 식생과 하부 식생의 식물 계절을 각각 연속적으로 관측하였다. 식물 계절을 탐지하기 위하여 가장 많이 사용되는 방법인 1) 역치를 이용하는 방법과 2) 이계도함수를 이용하는 방법을 사용하여 개엽 시기 및 성숙 시기를 계산하고 이를 다층 식생의 식물 계절과 비교하였다. 본 연구 결과, 첫번째로, 군락의 상층부에서 실측한 NDVI와 위성 기반의 NDVI가 강한 선형 관계를 보이는 것을 확인했다 (R2=0.95 는 MODIS 영상들 및 R2= 0.85 는 Landsat8). 두번째로, 이계도함수 방법과 10%의 역치 값을 이용한 방법이 비슷한 개엽 시기를 추정하는 것을 확인하였으며, 하부 식생의 개엽 시기와 비슷한 시기임을 확인하였다. 세번째로, 이계도함수 방법과 90%의 역치 값을 이용한 방법이 비슷한 성숙 시기를 산출하였으며, 이는 상부 식생의 성숙 시기와 비슷하였다. 추가적으로 상부 식생의 개엽 시기와 하부 식생의 개엽 시기가 온도와 반응하는 정도가 뚜렷하게 차이가 나는 것을 확인할 수 있었다. 상부 식생의 개엽 시기는 적산 생장 온도 일수 (AGDD)와 강한 상관성을 보였고, 하부 식생의 개엽 시기는 AGDD와 연관성을 갖고 있을 뿐만 아니라 추위 일수(NCD)에도 민감하게 반응하는 것을 확인하였다. 이러한 결과는 위성 NDVI 기반의 개엽 시기는 하부 식생의 개엽 시기와 연관성이 높고, 성숙 시기는 상부 식생의 성숙 시기와 비슷하다는 것을 의미한다. 또한, 상부 식생과 하부 식생이 온도에 다른 민감성을 갖고 있어, 위성에서 산출된 식물 계절을 이용하여 기후변화를 이해하고자 할 때, 어떤 층의 식생이 위성 영상에 주된 영향을 미치는지 고려해야 한다는 것을 시사한다. 위성은 넓은 지역의 변화를 손쉽게 모니터링할 수 있어 많은 가능성을 갖고 있는 도구이지만, 보다 정확한 위성 관측 값을 이해하기 위해서는 현장에서 관측된 자료를 기반으로 한 검증이 요구된다. 본 학위 논문에서는 1) 근접 표면 센싱 시스템을 개발, 2) 근접 표면 센싱 시스템을 활용한 식생의 생리학적 구조적 변화의 지속적인 관측, 3) 다층 식생 구조에서 관측되는 식물 계절 및 위성에서 추정된 식물 계절의 연관성 평가를 수행하였다. 개발한 근접 표면 센서는 상업 센서들과 비교했을 때, 가격적으로 저렴하고 손 쉽게 사용할 수 있었으며, 성능적으로도 부족함이 없었다. 근접 표면 센싱 시스템을 이용하여 SIF를 온대 침엽수림에서 지속적으로 관측한 결과, 총일차생산성과 SIF는 비선형 관계를 갖는 것을 확인하였다. 이는 많은 선행 연구들에서 발표한 위성 기반의 SIF와 GPP가 선형적인 관계를 보인다는 것과는 다소 상반된 결과이다. 다측 식생의 봄철 식물 계절을 연속적으로 관측하고, 위성 기반의 식물 계절과 비교평가한 연구에서는 위성 기반의 개엽 시기는 하부 식생에 영향을 주로 받고, 성숙 시기는 상부 식생의 시기와 비슷한 것을 확인하였다. 즉, 근접 표면 센싱 시스템을 이용하여 현장에서 실측한 결과는 위성 영상을 활용한 연구들과는 다른 결과를 보일 수도 있으며, 위성 영상을 평가 및 이해하는데 사용될 수 있다. 따라서, 보다 정확한 식생의 구조적, 생리학적 메커니즘을 이해하기 위해서는 근접 표면 센싱을 활용한 현장에서 구축한 자료 기반의 더 많은 연구들이 필요하다는 것을 시사한다.Abstract i Chapter 1. Introduction 2 1. Background 2 2. Purpose 5 Chapter 2. Monitoring SIF using a filter-based near surface remote sensing system 9 1. Introduction 9 2. Instrument desing and technical spefications of the filter-based smart surface sensing system (4S-SIF) 12 2.1. Ultra-narrow band pass filter 14 2.2. Calibration of 4S-SIF 15 2.3. Temperature and humidity response 16 2.4. Evaluate SIF quality from 4S-SIF in the field 17 3. Results 20 4. Discussion 23 Chapter 3. SIF is non-linearly related to canopy photosynthesis in a temperate evergreen needleleaf forest during fall transition 27 1. Introduction 27 2. Methods and Materials 31 2.1. Study site 31 2.2. Leaf-level fluorescence measurement 32 2.3. Canopy-level SIF and spectral reflectance measurement 34 2.4. SIF retrieval 37 2.5. Canopy-level photosynthesis estimates 38 2.6. Meteorological variables and APAR 39 2.7. Statistical analysis 40 3. Results 41 4. Discussion 48 4.1. Non-linear relationships between SIF and GPP 49 4.2. Role of f_esc in SIF-GPP relationship 53 4.3. Implications of non-linear SIF-GPP relationship in temperate ENF 54 5. Conclusion 57 6. Appendix 59 Chapter 4. Monitoring spring phenology of multi-layer canopy in a deciduous broadleaf forest: What signal do satellites actually see in space 65 1. Introduction 65 2. Materials and Methods 69 2.1. Study site 69 2.2. Multi-layer spectral reflectance and transmittance measurement 70 2.3. Phenometrics detection 72 2.4. In-situ multi-layer phenology 74 2.5. Satellite remote sensing data 75 2.6. Meteorological variables 75 3. Results 76 3.1. Seasonal to interannual variations of NDVI, 1-transmittance, and air temperature 76 3.2. Inter-annual variation of leaf-out and full-leaf dates 78 3.3. The relationships between dates calculated according tothreshold and in-situ multi-layer phenology 80 3.4. The relationship between multi-layer phenology, AGDD and NCD 81 4. Discussion 82 4.1. How do satellite-based leaf-out and full-leaf dates differ from in-situ multi-layer phenology 83 4.2. Are the 10 % and 90 % thresholds from satellite-basedNDVI always well matched with the leaf-out and full-leaf dates calculated by the curvature change rate 86 4.3. What are the implications of the difference between satellite-based and multi-layer phenology 87 4.4. Limitations and implications for future studies 89 5. Conclusion 91 6. Appendix 92 Chapter 5. Conclusion 114 Abstract in Korean 115박

    저렴한 근접 표면 센서를 이용한 식생지수, 엽면적 지수, 광합성유효복사량의 흡수률 관찰

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    학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 농업생명과학대학 생태조경·지역시스템공학부, 2017. 8. 류영렬.Monitoring vegetation indices, fraction of absorbed photosynthetically active radiation (fPAR) and leaf area index (LAI) has advanced our understanding of biosphere-atmosphere interactions. Although there are continuous observations for each variable, monitoring vegetation indices, fPAR and LAI simultaneously is still lacking. Recent advances of technology provide unprecedented opportunities to integrate various low-cost sensors as an intelligent near surface observation system for monitoring ecosystem structure and functions. In this study, we developed a Smart Surface Sensing System (4S), which can automatically collect, transfer, process and analyze data, and then publish time series results on public-available website. The system is composed of micro-computers, micro-controllers, multi-spectral spectrometers made from Light Emitting Diode (LED), micro cameras, and Internet module. We did intensive tests and calibrations in the lab. Then, we conducted in-situ observations of normalized difference vegetation index (NDVI), enhanced vegetation index (EVI), fraction of absorbed photosynthetically active radiation (fPAR), and leaf area index (LAI) continuously at a rice paddy field during the growing season. NDVI and EVI obtained by 4S showed linear relationships with those from a reference hyperspectrometer (R2 = 0.98NDVI, R2 = 0.96EVI). 4S derived fPAR and LAI were comparable to LAI-2200 and destructive measurements in both magnitude and seasonal trajectory. We retrieved vegetation indices, fPAR and LAI independently and continuously and show that after the reproductive stage, fPAR remained constant, whereas LAI and NDVI decreased continuously after their peak because of non-photosynthetic materials such as grain and yellow leaf. In addition, using vegetation index to estimate fPAR has limitation because the spectral reflectance could not capture the diurnal pattern. On the other hand, fPAR changes abruptly depending on the sky conditions and the amount of light transmitted. We believe that 4S will be useful in the expansion of ecological sensing networks across multiple spatial and temporal scales.1 Introduction 1 2 Method and materials 4 2.1 Development and calibration of 4S 4 2.2 Testing the 4S LED spectrometer 6 2.2.1 Site description 10 2.2.2 4S in-situ 12 2.2.3 Reference data collection 15 2.2.4 Satellite remote sensing data 16 3 Results 17 3.1 Seasonal variation in 4S LED sensor 17 3.2 Seasonal variation in 4S camera sensor 20 3.3 Comparison of NDVI obtained from 4S and satellite with different resolutions 22 4 Discussion 23 4.1 What are the advantages of 4S development 23 4.2 What are the advantages of observing vegetation indices, fPAR and LAI independently 25 4.3 What are the advantages of continuous observation compared to different sensors 29 5 Conclusion 32 6 References 33 7 Abstract (Korean) 38Maste

    적은 수의 사용자 입력으로부터 인간 동작의 합성 및 편집

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    학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 전기·컴퓨터공학부, 2014. 8. 이제희.An ideal 3D character animation system can easily synthesize and edit human motion and also will provide an efficient user interface for an animator. However, despite advancements of animation systems, building effective systems for synthesizing and editing realistic human motion still remains a difficult problem. In the case of a single character, the human body is a significantly complex structure because it consists of as many as hundreds of degrees of freedom. An animator should manually adjust many joints of the human body from user inputs. In a crowd scene, many individuals in a human crowd have to respond to user inputs when an animator wants a given crowd to fit a new environment. The main goal of this thesis is to improve interactions between a user and an animation system. As 3D character animation systems are usually driven by low-dimensional inputs, there is no method for a user to directly generate a high-dimensional character animation. To address this problem, we propose a data-driven mapping model that is built by motion data obtained from a full-body motion capture system, crowd simulation, and data-driven motion synthesis algorithm. With the data-driven mapping model in hand, we can transform low-dimensional user inputs into character animation because motion data help to infer missing parts of system inputs. As motion capture data have many details and provide realism of the movement of a human, it is easier to generate a realistic character animation than without motion capture data. To demonstrate the generality and strengths of our approach, we developed two animation systems that allow the user to synthesize a single character animation in realtime and edit crowd animation via low-dimensional user inputs interactively. The first system entails controlling a virtual avatar using a small set of three-dimensional (3D) motion sensors. The second system manipulates large-scale crowd animation that consists of hundreds of characters with a small number of user constraints. Examples show that our system is much less laborious and time-consuming than previous animation systems, and thus is much more suitable for a user to generate desired character animation.Contents Abstract . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . II Table of Contents . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . IV List of Figures . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . V 1 Introduction 1 1.1 Motivation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 1.2 Approach . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 1.3 Thesis Overview . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9 2 Background 10 2.1 Performance Animation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11 2.1.1 Performance-based Interfaces for Character Animation . . . . . . . 11 2.1.2 Statistical Models for Motion Synthesis . . . . . . . . . . . . . . . 12 2.1.3 Retrieval of Motion Capture Data . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13 2.2 Crowd Animation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 2.2.1 Crowd Simulation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 2.2.2 Motion Editing . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 2.2.3 Geometry Deformation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15 3 Realtime Performance Animation Using Sparse 3D Motion Sensors 17 3.1 Overview . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18 3.2 System Overview . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20 3.3 Sensor Data and Calibration . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 3.4 Motion Synthesis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 3.4.1 Online Local Model . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23 3.4.2 Kernel CCA-based Regression . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 3.4.3 Motion Post-processing . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 3.5 Experimental Results . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 3.6 Discussion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38 4 Interactive Manipulation of Large-Scale Crowd Animation 40 4.1 Overview . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41 4.2 Crowd Model . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43 4.3 Cage-based Interface . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45 4.3.1 Cage Construction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46 4.3.2 Cage Representation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49 4.4 Editing Crowd Animation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51 4.4.1 Spatial Manipulation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51 4.4.2 Temporal Manipulation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 57 4.5 Collision Avoidance . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 58 4.6 Experimental Results . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62 4.7 Discussion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 66 5 Conclusion 69 Bibliography I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . XIIIDocto

    Highly efficient gene knockout in mice and zebrafish with RNA-guided endonucleases

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    학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 화학부(생화학전공), 2014. 2. 김진수.Zinc finger nucleases (ZFNs) and transcription activator-like effector nucleases (TALENs) , engineered nucleases, are composed of designable DNA-binding domains and a non-specific nuclease domain and enable a broad range of genomic modification by inducing double-strand breaks (DSBs) that stimulate intrinsic cellular repair mechanisms such as non-homologous recombination (NHEJ) and homologous recombination (HR) at specific genomic locations. This technology has been described earlier as promising tools for targeted genome engineering in cells and many organisms. Recently, RNA-guided endonucleases (RGENs) derived from bacterial type-II CRISPR/Cas system, have been described as site-specific endonucleases whose specificities are programmed by small RNA components. RGEN also has been applied in cells and organisms as genome engineering tool. Here in this study, injection of RGENs as Cas9 protein: guide RNA complexes or Cas9 mRNA plus guide RNA into one-cell stage embryos of mice and zebrafish efficiently disrupts a target gene in both species. RGENs efficiently generated germ-line transmittable mutations in up to 93% of newborn mice with minimal toxicity. RGEN-induced mutations in the mouse Prkdc gene that encodes an enzyme critical for DNA double strand break repair resulted in immunodeficiency both in F0 and F1 mice. I propose that RGEN-mediated mutagenesis in animals will greatly expedite the creation of genetically-engineered model organisms accelerating functional genomic research.Table of contents ABSTRACT .............................................................................................. 1 TABLE OF CONTENTS ......................................................................... 3 LIST OF FIGURES .................................................................................. 5 LIST OF TABLES .................................................................................... 7 I. INTRODUCTION ................................................................................ 8 II. MATERIALS AND METHODS ....................................................... 11 1. RGEN COMPONENTS. ..................................................................... 11 2. In vitro cleavage reactions. ................................................................. 11 3. Microinjection of RGENs into mouse embryos. .............................. 12 4. Fluorescent PCR. ................................................................................ 13 5. Genotyping, sequence analyses, and phenotyping of mutant mice. 14 6. Characterization of immune cells by flow cytometry. ..................... 15 7. Procedures of RGEN-mediated mutagenesis in zebrafish embryos. .................................................................................................................. 16 III. RESULTS ......................................................................................... 17 4 1. RGEN Design and Production. ......................................................... 17 2. Generation of Founder Mice with RGEN-induced Mutations. ...... 18 3. Gene Disruption by Cas9 protein-sgRNA Complex in Mice and Zebrafish. ................................................................................................ 20 4. Analysis of Off-target Effects of RGENs. ......................................... 22 5. Phenotype Analysis and Germ-line Transmission of Prkdc-mutant Mice. ........................................................................................................ 23 IV. DISCUSSION ................................................................................... 26 V. REFERENCE ..................................................................................... 55 Abstract in Korean………………………………………………........61Maste

    An Analysis of falls in the elderly : A PRECEDE Model Approach

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    체계화된 낙상 예방을 위해서는 변화를 유도할 수 있는 요인에 근거한 낙상 사고 기전을 파악하는 것과 인적자원 및 지역사회의 자원을 파악하는 것이 중요하다. 즉, 낙상 예방을 위해서는 단순히 원인 규명에서 그치는 낙상 위험 요인의 연구가 아니라 낙상사고의 기전에 따라 접근방법을 달리하여 체계적으로 분석하는 것이 필요하다. 이에 본 연구에서는 낙상의 원인을 사회적, 역학적 측면에서 그 특성을 분석하고 낙상을 유발한 행위, 환경적 특성, 개인의 잘못된 지식이나 가치관 등을 진단하고자 하였다. 요인에 따라 단계적 접근을 하기 위하여 건강 증진의 진단적 접근 방법인 Green L.W.(1999)의 PRECEDE 모형을 적용하여 새로운 패러다임으로 낙상발생의 관련 요인과 낙상의 위험 요인을 분석하는 것을 목적으로 하였다. 본 연구는 노인의 낙상 위험 요인 분석에 앞서 국내외 문헌고찰과 ‘2004년도 전국 노인생활실태 및 복지욕구조사’를 분석하여 PRECEDE 모형의 진단 단계에 따라 낙상 관련 요인들을 재분류하여 설문지를 개발하였다. 연구의 대상자는 65세 이상 남녀 노인 435명 이었으며 서울시내의 12개의 노인종합복지관과 9개의 종합사회복지관, 6개의 동사무소에서 개별 면접조사 하였다. 자료 수집은 2008년 4월10일부터 2008년 5월2일까지 시행되었고 자료 분석은 SPSS 14.0 WIN을 이용하여 수행하였다. 연구결과는 다음과 같다. 첫째, 사회적 진단 단계 중 인구 사회학적 요인에서 도출된 낙상 관련 요인들은 성과 연령, 혼인상태, 동거인, 학력, 수입원이었으며, 최종적인 낙상 위험 요인은 동거인이었다. 삶의 질에 관련된 요인 중에서 낙상과 관련된 요인은 도구적 일상생활수행능력(IADL), 인지장애와 노인우울이었고 최종 낙상 위험 요인은 인지장애의 정도이었다. 둘째, 역학적 진단 단계 중 신체적 기능 요인에서 낙상과 관련된 요인은 청력과 균형 장애이었고 최종 낙상 위험 요인은 균형 장애이었다. 낙상과 관련이 있는 만성질환은 관절염, 요통, 협심증, 요실금이었으며, 최종 낙상 위험 질환으로는 협심증과 요실금이었다. 셋째, 행동 환경적 진단 단계에서는 건강 행태 요인 중에서 운동습관과 수면의 질이 낙상 관련 요인이었으며, 운동습관과 수면의 질 모두 낙상 위험 요인이었다. 환경적 요인 중 주거 환경 요인은 미끄러운 화장실/목욕탕 바닥과 변기나 목욕통의 보조 손잡이의 유무, 계단의 폭과 조명이 낙상 관련 요인이었으며, 미끄러운 화장실/목욕탕 바닥과 변기나 목욕통의 보조 손잡이의 유무는 최종 낙상 위험 요인이었다. 외부환경의 요인으로는 외출 시 불편한 외부 환경이 낙상 관련 요인이면서 낙상 위험 요인이었다. 넷째, 교육 조직적 진단 단계에서는 소인성 요인 중 ‘나이가 들면 넘어져서 다칠 위험이 크다’라는 낙상의 심각성을 인지하는 것과 ‘나는 넘어져서 다칠까봐 걱정이 된다’라는 낙상의 공포, ‘나는 다른 사람보다 잘 넘어진다’라는 낙상의 효능감, ‘나는 넘어지지 않도록 조심하는 편이다’ ‘다닐 때 주변의 안전(바닥, 계단, 기둥 등)주의를 기울인다’라는 안전에 대한 태도와 ‘운동은 낙상사고를 예방할 수 있다’라는 지식이 낙상과 관련이 있는 요인이었다. 낙상 위험 요인으로는 ‘나는 다른 사람보다 잘 넘어진다’ ‘운동은 낙상사고를 예방할 수 있다’와 같은 낙상 효능감과 낙상에 대한 지식이었다. 조사된 가능성 요인(낙상 예방 교육의 요구도, 낙상 예방 교육 참여 의지 등) 들은 낙상발생과 관련이 없었다. 강화성 요인 중에는 ‘낙상예방교육에 대한 행사가 자주 있다’ ‘낙상 예방에 관한 책자를 언제든지 볼 수 있다’ ‘지역사회에서 낙상 예방교육을 받은 적이 있다’와 같은 지역사회자원 요인들이 낙상과 관련이 있었다, 그러나 이들은 낙상을 유발하는 위험요인은 아니었다. 가능성 요인과 강화성 요인은 낙상의 발생 보다는 낙상의 예방에 관련된 요인이라 할 수 있으며 이는 재낙상과 관련된 요인이라 할 수 있다. 결론적으로 낙상의 위험 요인들 중에는 통제할 수 없는 요인들(성, 연령 등)이 포함이 되어 있어 낙상 예방에 어려움이 있다고 할 수 있다. 그러나 본 연구에서는 사회적, 역학적 측면에서 그 특성을 파악하고 낙상을 유발한 행위, 환경적 특성, 개인의 잘못된 지식이나 가치관 등을 파악하여 변화를 유도한다면 낙상을 예방할 수 있음 보여 주었다. 지역 특성에 따른 낙상 위험 요인의 진단과 그에 맞는 낙상 예방프로그램이 만들어지도록 후속 연구가 이어져야 할 것이다.;Effective prevention of falls in older people requires a practical program differentiated by the causes of the falls and based on active participation of the elderly. A thorough analysis of the mechanisms of the falls and identification of human and community resources are needed for developing such a program. With this in mind, this study seeks to analyze the causes of falls by exploring their characteristics from socioeconomic and epidemiological aspects and to diagnose the behavior, environmental characteristics, and misperceptions that induce falls. A step-by-step analysis of the causes of falls was done by using Green's PRECEDE Model of diagnostic approach to health promotion. A questionnaire was developed based on the classification of the causes of falls according to the steps identified by applying the PRECEDE model to the data from the 2004 Survey of Lifestyle and Welfare Needs of the Elderly. Then one-on-one interviews were conducted on a sample of 435 elderly men and women with 65 years of age and older drawn from community welfare centers in Seoul from April 10 untill May 2, 2008. Major findings are as follows: 1) At the socio-demographic diagnostic stage, gender, age, marital status, living with a companion, level of education, and income were identified as affecting the incidence of falls. Among the factors concerning the quality of life, IADL, cognitive impairment, and depression were found to affect the incidence of falls. Living alone and the severity of cognitive impairment were identified as the ultimate risk factors for falls through a logistic analysis. 2) At the epidemiological diagnostic stage, poor hearing, impaired balance were found to affect the incidence of falls. As for chronic diseases, osteoarthritis, lower-back pain, coronary artery disease, and urinary incontinence were found to affect the incidence of falls. Lack of balance and the number of chronic diseases were identified as risk factors for falls through a logistic analysis. 3)At the behavioral stage of diagnosis, exercise habit, and the quality of sleep were found to affect the incidence of falls. Among the environmental factors, domestic factors such as slippery bathroom floors, the lack of nobs for baths and toilets, the width of stairs, and external factors inconvenient for outing were found to affect the incidence of falls. Exercise habit, the quality of sleep, and the external environment inconvenient for outing were identified as risk factors for falls from a logistic analysis. 4) At the educational and organizational diagnostic stage, the fear of falls and efficacy of falls were associated with the incidence of falls. In summary, although the causes of falls in older people include uncontrollable ones such as gender and age, this study suggests that falls can be prevented if proper actions are taken to induce changes in the behavior, environmental factors, and misperceptions affecting the incidence of falls based on a careful analysis of socio-epidemiological aspects of the various causes of falls.Ⅰ. 서론 = 1 A. 연구의 필요성 = 1 B. 연구목적 = 4 C. 연구문제 = 5 D. 용어의 정의 = 6 E. 연구의 제한점 = 10 Ⅱ. 이론적 배경 = 11 A. 노인의 낙상과 낙상 특성 = 11 B. 낙상 관련 요인 = 16 C. PRECEDE 모형 = 42 Ⅲ. 연구방법 = 46 A. 연구설계 = 46 B. 연구의 이론적 모형에 대한 변수 선정 = 47 C. 연구의 흐름 = 48 D. 연구방법 및 조사내용 = 49 Ⅳ. 연구결과 = 60 A. 대상자들의 인구사회학적 특성 = 60 B. 대상자의 낙상사고 특성 = 62 C. PRECEDE 진단 단계에 따른 낙상 사고 특성 = 65 Ⅴ. 고찰 = 89 Ⅵ. 결론 및 제언 = 97 A. 결론 = 97 B. 제언 = 99 참고문헌 = 101 부록 1 2004년도 전국 노인생활실태 및 복지욕구조사 = 114 부록 2 설문지 = 129 Abstract = 13

    Analysis of patient use of the medical services of public health centres in Seoul

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    This study reports the general characteristics of medical personnel and patients attending the medical care clinics of the 12 Public Health Centres in the city of Seoul, Korea. The purpose was to provide information about the disease conditions of patients attending the Public Health Centre medical care clinics and basic data from morbidity rates to contribute to a model of the primary care nursing role, and to further the improvement of medical care services. Two instruments were used to collect data, a questionnaire answered by 102 medical personnel, doctor, nurses, X-ray and laboratory technicians and pharmacists working in the 12 Public Health Centre clinics and a check list of selected items from the records of the 1616 patients attending the clinics from January to June, 1977. The disease categories were selected from the B group portion of the World Health Organization classification of international diseases and injuries. Data were analysed by Chi-square and F-test including multiple range tests. Findings included the fullowing : 1. Most of the medical staff had only temporary status(without tenure)(95.1%) 2. All the medical staff receiving a monthly salary of less than 50,000 Won(40.2%) were nurses. Staff receiving more than 300,000 Won(14.4%) were mainly doctors. 3. While 46.1% of the medical staff expressed some satisfaction with their work, 47.1% were dissatisfied with their salary. 4. The patients using the medical care services were classified as low-income (86.1%) and indigent (14.9%). 5. Disease categories were classified primarily as medical(50.3%), skin(11.9%) and surgical(7.5%). 6. Diagnosis was made primarily by clinical examination (73.9%); 3.4% of the diagnoses were supported by both X-ray and laboratory tests. 7. In the age group 1-9 years, disease categories in order of occurrence were enteritis and other diarrheal dis.(B4), Bronchitis Emphysema & Asthma(B33), Measles(B14), and all other infective & parasitic dis.(B18); in the 10-19 year group, the disease categories were all other dis.(B46), all other injuries(BN50), Burn (BN48); in the 20-39 year group, other complications of pregnancy child birth and the puerperium(B41), symptoms & ill difined conditions(B45), and other tubarculosis, including late effects(B6); and in the 40-60 year group, Enteritis and other diarrheal dis(B4), Hypertensive dis(B27), all other injuries(BN50), other tuberculosis, including late effects(B6). 8. There was a statistically significant positive relationship between the duration and extent of illness; the longer the illness the greater number of patients. 9. There was a statistically significant negative relationship between the period of medical care and visits to the clinics; as the months of the year passed, the number of visits per month decreased.;대도시에서 시행하는 일차 진료사업의 실태에 관한 본 연구는 보건의료 요원의 특성과 이들이 제공한 진료상황 및 이 사업을 이용한 의료시혜 환자를 파악하고 분석하기 위하여 1977년인 9월 15일부터 9월 30일까지 서울특별시 12개 보건소에 근무하는 보건 의료요원 120명중 102명과 1977년 1월 4일부터 6월 30일까지 보건소를 이용한 일부 의료시혜 환자 1,616명을 조사 대상으로 선정하여 현지 조사를 실시하였다. 연구방법은 사전 준비된 2종류의 설문지를 조사원으로 하여금 직접 방문하여 기록하도록 하였으며 수집된 자료는 빈도와 백분율, 평균치, 표준편차 등을 산출하여 비교하고 필요에 따라 유의성 검증 Chi-square Test와 분산분석 및 Duncan Test로 전자계산 조직을 이용하여 분석하였다. 이에 대하여 본 연구에서 얻은 결론은 다음과 같다. 1. 보건 의료요원의 연령 구성은 20~29세가 42.2%였고 그 중 간호원이 65.8 %였으며 성별은 여자가 77.6%로서 남자의 약 3배였다. 한편 결혼상태는 기혼자가 62.8%, 미혼자가 35.3%로 의사 외의 요원은 약 50%가 미혼자였다. 2. 최종 졸업학교는 대학수준이 48.1%, 전문학교가 48.0%로 가장 많았고 대학원은 2.9%였으며 직급사항은 임시직이 95.1%였다. 3. 임상분야 근무 년수는 1~3년미만이 45.1%로 가장 많았고 그 중 간호원이 61.1%를 차지했으며 반면에 의사는 3~20년까지의 장기간 근속자들이었다. 그리고 보건분야 근무년수는 1~3년미만이 84.3%로 대부분이었다. 4. 월보수 분포는 5만원미만이 40.2%로 이는 모두 간호원에 해당하였으며 의사의 경우는 30~50만원으로 간호원의 약 10배 였고 그 외의 요원은 5~9만원이었다. 5. 업무 만족도는 "보통이다"가 46.1%로 가장 많았고 월 보수 만족도는 "아주 불만이다"가 47.1%로 전체의 약 1/2이 나타났다. 6. 의사의 1일 진료환자수는 평균 15명으로서 10~19명이 33.3%, 20~29명이 30.0%로 가장 많이 나타났다. 7. 보건소를 이용한 의료시혜 환자 중 영세민 저소득자가 85.1%, 생활 보호대상자가 14.9%였다. 8. 월별로 질병을 분류해 보면 1월부터 6월까지 기타 모든 질환 (B_(46)), 47.7%, 장염 및 기타 설사성 질환(B₄), 12.3%, 기관지염 폐기종 및 천식 (B_(33)) 7.2%, 고혈압성 질환 (B_(27)) 6.5%, 증상 및 기타 진단명 불명확의 상태 (B_(45)) 4.5%, 기타임신 출산 및 산욕의 합병증 (B_(41)) 3.3%, 소화성궤양 (B_(34)) 2.6%, 기타 모든 상해 (BN_(50)) 2.2%, 기타 결핵 (후유증 포함) (B_(6)) 1.7%, 양성 신생물 및 성질불명의 신생물(B_(20)) 1.4%가 가장 많았고 전체의 89.4%를 차지하였다. 9. 전문과별 질병분류는 내과질환이 50.3%, 피부과 질환이 11.9%, 일반외과가 7.5%로 월별에 상관없이 가장 많이 나타났다. 10. 진단방법에 대한 전문과별 분류는 일반진단이 73.9%로 대부분 이었고 일반진단, X-ray 및 Lab.검사가 3.4%로 가장 적었다. 11. 연령별 질병분류를 보면 1~9세는 장염 및 기타 설사성 질환 (B₄), 기관지염 폐기종 및 천식 (B_(33)), 홍역 (B_(14)), 기타 모든 전염병 및 기생충 (B_(18_)의 순위로 나타났고 10~19세는 기타 모든질환 (B_(46)), 기타 모든 상해 (BN_(50)), 화상 (BN_(48)), 20~39세는 기타 임신 출산 및 산욕의 합병증 (B_(41)), 증상 및 기타 진단명 불명확의 상태 (B_(45)), 기타 결핵 (B_(6)), 40~60세는 장염 및 기타 설사성 질환 (B₄), 고혈압성 질환 (B_(27)), 기타 모든상해 (BN_(5O)), 기타 결핵 (B_(6)), 양성 신생물 및 성질 불명의 신생물 (B_(2O)), 뇌혈관 질환 (B_(30))의 항목이 가장 많이 나타났다. 12. 성별 질병분류는 남자가 56.7%로 여자와 비교해 볼 때 차이가 없었고 남자의 경우 호흡기계의 결핵 (B_(5)), 기타 결핵 (B_(6)), 간경변 (B_(37)), 신염 및 신증 (B_(38))이 많았고 여자의 경우는 장염 및 기타 설사성 질환 (B₄), 기타 모든 전염병 및 기생충 (B_(18)), 양성 신생물 및 성질 불명의 신생물 (B_(20)), 빈혈(B_(23)), 기타 심장 질환 (B_(29))이 가장 많이 나타났다. 13. 의료시혜 환자의 유병기간에 따라 3개월 이상 만성질환자 수는 친체의 61.0%로 나타났다. 14. 질병과 유병기간과의 관계는 유병기간의 크기에 따라서 질병의 유병률이 높아지므로 유의한 차이를 보였다. (P=0.0001) 15. 방문 월수와 진료횟수 와의 관계는 방문월수가 높아감에 비하여 진료환자수가 감소하므로 유의한 차이를 보였고 (P=0.0001) 투약일수도 방문월수와 진료환자수에 대한 유의한 차이로 나타났다. (P=0.004)Ⅰ. 서론 = 8 A. 연구의 필요성 = 1 B. 연구의 목적 = 3 C. 용어의 정의 = 3 D. 연구의 제한 = 4 Ⅱ. 연구대상 및 연구방법 = 5 A. 조사대상 및 조사기간 = 5 B. 조사방법 = 5 C. 자료의 처리방법 = 5 Ⅲ. 연구 결과 = 7 A. 보건 의료요원의 일반적 특성 = 7 B. 의료시혜 환자의 월별에 대한 진료실태 분석 = 12 C. 의료시혜 환자에 대한 질병상태의 측정 분석 = 18 Ⅳ. 고찰 = 29 Ⅴ. 결론 및 제언 = 38 참고문헌 = 42 부록 = 45 ABSTRACT = 5

    협상에서의 관행 형성과정

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    내쉬의 파이게임은 수많은 균형을 가지고 있다. 그러나 현실에서는 절반으로 나누 는 분배가 관행적으로 이루어지고 있음을 알 수 있다. 본 연구에서는 내쉬 모형의 변형된 형태를 분석하여 절반으로 나누는 분배가 다른 균형보다 왜 더 안정적인 결 과를 낳는지에 대해 진화 게임적 접근 방식을 이용하여 분석하고자 한다. 본 연구에 서는 다른 경기자들을 모방하는 행태를 보이는 경기자들이 때때로 선택에 있어서 의도하지 않은 실수를 한다는 점을 가정한 결과, 균등분할이 유일하게 확률적 안정성을 지니고 있는 해임을 보이고 있다.이 연구는 서울대학교 경제연구소 기업경쟁력 연구센터에 지원된 서울대학교 발전기금의 연 구비 지원을 통해 수행되었다

    Development and characterization of artificial nuclear receptor and target reporter.

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    의과학사업단/석사[한글] 특정 유전자의 생리적인 기능을 연구하는 기초연구나 유전자치료 같은 응용연구에 사용하기 위한 inducible expression system을 개발하기 위하여, 기존의 GAL4 DNA binding domain (DBD)을 이용한 inducible expression system을 개량한 artificial nuclear receptor와 target reporter를 개발하였다. 현재 다양한 종류의 inducible expression system이 개발 되었는데, 그들 대부분은 유전자의 발현을 특정ligand로 조절하기 위해 prokaryote나 eukaryote에서 유래된 ligand binding domain (LBD)을 사용하며, activation domain (AD)으로 herpes simplex virus의 VP16 AD를 주로 사용한다. 새로이 개발한 inducible expression system에서 artificial nuclear receptor는 yeast의 GAL4 DBD와 human progesterone/estrogen receptor LBD, SREBP1a의 AD를 사용하였다. Estrogen receptor LBD의 경우에 estrogen과 anti-estrogen인 4-OHT (hydroxytamoxifen)이 모두 결합하지만, human progesterone receptor LBD의 경우 C-terminal 말단의 892-933 아미노산을 제거하여 progesterone과는 결합하지 않고 progesterone antagonist인 RU486 (mifepristone)에만 특이적인 반응을 나타내게 한 LBD를 사용하였다. Reporter gene은 GAL4 response element (RE)를 5번 반복한 부위와 ACL minimal promoter -60/+67, luciferase gene을 연결하였다. 새로 개발한 inducible expression system은 두 가지 개선점이 있었다. 첫째로, artificial nuclear receptor에 SREBP1a AD을 사용함으로써 유전자발현을 더욱 활성화 시킬 수 있었고 둘째로, reporter gene의 promoter인 minimal TATA-box를 ACL minimal promoter -60/+67로 대체시키고, 여기에 SV40 enhancer를 연결하여 유전자의 발현을 더욱 증가 시킬 수 있었다. 이러한 개량된 inducible expression system은 exogenous gene의 기능을 연구하는 기초연구나 유전자치료 같은 응용연구에서 매우 유용하게 이용될 수 있을 것이다. [영문] To develop an inducible expression system for use in basic research and applied research, we generated the artificial nuclear receptor and target reporter. A number of ligand-regulated artificial nuclear receptor have been generated by various means, using ligand binding domain (LBD) derived from either prokaryotes or eukaryotes, and activation domain (AD) derived from herpes simplex virus. In our inducible expression system, the artificial nuclear receptor contains the yeast GAL4 DNA binding domain, LBD of human progesterone/estrogen receptor and SREBP1a AD. The estrogen receptor LBD bind to estrogen and anti-estrogen (4-OHT). But progesterone receptor LBD specifically bind to anti-progesterone (mifepristone, RU486) instead of endogenous hormone. The target reporter construct contains the five copies of GAL4 responsive element, ACL minimal promoter -60/+67 and luciferase gene. In the presence of ligand, artificial nuclear receptor specifically activates the expression of luciferase gene. Two major improvements of this system were made. First, artificial nuclear receptor GAL4-PR/ER was rendered more potent by fusing the strong activation domain, SREBP1a AD. Second, target reporter gene expression was more increase by replaced minimal TATA box promoter with ACL minimal promoter -60/+67, and fusing the SV40 enhancer. This enhanced inducible expression system can restrict its specificity to the target gene, and enable to provide powerful tools that may be applied to the study of exogenous gene function and gene therapy.ope

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    학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :수의학과 수의내과학전공,2002.Maste

    (A)Study on the debarment and the suspension in the U.S. government procurement contract law

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    학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :법학과,2005.Maste
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