Detection of isoniazid-resistant mutations in Mycobacterium tuberculosis by fluorescent PCR probes and melt-curve analysis

目的研究荧光PCr熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐异烟肼突变方法,评价检测耐多药结核病的能力。方法对结核病人临床分离结核分枝杆菌使用荧光PCr熔解曲线法检测,与金标准传统药物敏感性试验比较,获得该方法的灵敏度、特异度和一致率。结果检测408例结核病人临床分离培养样本,药敏试验检出278例异烟肼敏感标本,130例异烟肼耐药标本;荧光PCr探针熔解曲线法检出异烟肼敏感和耐药标本281例、127例,灵敏度为87.69%,特异性为95.32%,一致率为92.89%。结论荧光PCr探针熔解曲线法检测速度快速、特异性强、灵敏度较高,可用于结核分枝杆菌耐异烟肼突变的快速检测,适于耐多药结核病的快速筛查。OBJECTIVE The study explored the features of fluorescent PCR / melt-curves analysis in the detection of isoniazid-resistant mutations in Mycobacterium tuberculosis, so to evaluate the capability of the method in the identification of multidrug-resistant tuberculosis.METHODS Mycobacterium tuberculosis isolated from tuberculosis patients were subjected to fluorescent PCR / melt-curves analysis and gold standard conventional drug susceptibility test.The results were compared to obtain the sensitivity, specificity, and consistency of the new method.RESULTS Among the 408 culture samples isolated from tuberculosis patients, drug susceptibility test indicated 278 isoniazid-sensitive and 130 isoniazid-resistant specimens, and fluorescent PCR / melt-curves analysis revealed 281 and 127 specimens, respectively.Consequently, sensitivity, specificity,and consistency of the fluorescent PCR / melt-curves analysis were 87.69%, 95.32%, and 96.32%, respectively.CONCLUSION Fluorescent PCR / melt-curves analysis is time-efficient and high in specificity and sensitivity, and may be used in the rapid detection of isoniazid-resistant mutations in Mycobacterium tuberculosis and rapid screening of multidrug-resistant tuberculosis.“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项资助项目(2008ZX10003-004

多孔膜萃取/微捕集方法及在线测定水中挥发性有机物

基于多孔膜萃取水中挥发性有机物和微捕集技术,构建了一套水中挥发性有机物（Volatile OrganicCompounds,VOCs）样品前处理装置,可自动、在线、连续完成水中挥发性有机物萃取、富集、热解析,传输给气相色谱分离检测。实验分别对膜萃取材料、萃取温度、萃取时间、吹扫气流速等进行了系统优化,并用于氯仿、1,2-二氯甲烷、四氯化碳、三氯乙烯、甲苯、四氯乙烯、乙苯、氯苯、苯乙烯9种挥发性有机物的检测。研究结果表明,采用膜萃取/微捕集装置,与气相色谱联用,在萃取温度60℃,萃取时间30 min,吹扫气流速8 mL/min条件下,采用氢焰离子化检测器（Flame ionization detector,FID）,对氯代烃的检出限达到0.003～0.041μg/L,精确度为2.7%～13.0%,线性相关系数均大于0.9936,适用于在线检测水中挥发性有机物

一种热解吸装置

本发明涉及样品检测技术领域，是一种与气相色谱仪联用的热解吸装置，主要用于固相微萃取棒、固相微萃取搅拌棒、集束毛细管固相微萃取管以及填充吸附柱的热解吸，将所吸附富集的痕量组分快速解吸出来。该装置由加热管，内衬管，密封圈，内衬管压帽、内衬管底座，内衬管底座绝热环，解吸器底座、样品传输管，解吸吹扫气路，解吸分流气路，以及加热丝和温控元件组成。样品组分在内衬管中完成热解吸，样品传输管的加热由加热管和气相色谱进样器上帽的热传导共同完成，并由内衬管底座绝热环保温。在解吸温度300℃时，该热解吸装置对沸点430℃以下的组分解吸残留低于0.1%，具有解吸样品通道无冷区、加热速度快、功率消耗低等优点

微波辅助下热解麦秆制取生物油的分析

采用微波辅助条件下热解稀硫酸预处理的麦秆制取生物油,产物采用分级萃取进行固液分离,依次分离出了环己烷萃取物、乙酸乙酯萃取物、甲醇萃取物和四氢呋喃萃取物,并用气相色谱/质谱联用仪（GC/MS）分析了各级萃取物。结果表明,本研究制取的生物油中化合物种类较少,有利于生物油中高附加值化学品的分离,其中5,6-二氢吡喃-2-酮在环己烷萃取物中的相对含量为45.0%,糠醛在生物油总产物中的相对含量为45.6%。此外,生物油中酸的相对含量为16.0%,表明该生物油含酸量高而不易于直接作为燃料油使用

2000–2010年中国典型陆地生态系统实际蒸散量和水分利用效率数据集

蒸散是陆地生态系统水分循环和能量平衡的关键过程,水分利用效率是反映生态系统碳水循环间耦合关系的重要指标,二者在生态学、农学、水文学、气候学等多个学科中均具有重要的应用价值。涡度相关法被认为是现今唯一能直接测量生物圈与大气间物质与能量交换通量的标准方法,已成为生态系统尺度碳水交换通量观测的主要方法。本文通过整合中国陆地生态系统通量观测联盟(China FLUX)的长期观测数据和中国区域其他观测站点基于涡度相关法发表的文献数据,构建了一套中国典型陆地生态系统实际蒸散量和水分利用效率数据集。本数据集共有实际蒸散量数据记录143条、水分利用效率数据记录96条,涉及5种生态系统类型45个生态系统,时间跨度为2000–2010年。本数据集可以为陆地生态系统碳水循环、生态系统管理和评估、全球变化等相关领域的研究提供数据支持