Detection of isoniazid-resistant mutations in Mycobacterium tuberculosis by fluorescent PCR probes and melt-curve analysis

目的研究荧光PCr熔解曲线法检测结核分枝杆菌耐异烟肼突变方法,评价检测耐多药结核病的能力。方法对结核病人临床分离结核分枝杆菌使用荧光PCr熔解曲线法检测,与金标准传统药物敏感性试验比较,获得该方法的灵敏度、特异度和一致率。结果检测408例结核病人临床分离培养样本,药敏试验检出278例异烟肼敏感标本,130例异烟肼耐药标本;荧光PCr探针熔解曲线法检出异烟肼敏感和耐药标本281例、127例,灵敏度为87.69%,特异性为95.32%,一致率为92.89%。结论荧光PCr探针熔解曲线法检测速度快速、特异性强、灵敏度较高,可用于结核分枝杆菌耐异烟肼突变的快速检测,适于耐多药结核病的快速筛查。OBJECTIVE The study explored the features of fluorescent PCR / melt-curves analysis in the detection of isoniazid-resistant mutations in Mycobacterium tuberculosis, so to evaluate the capability of the method in the identification of multidrug-resistant tuberculosis.METHODS Mycobacterium tuberculosis isolated from tuberculosis patients were subjected to fluorescent PCR / melt-curves analysis and gold standard conventional drug susceptibility test.The results were compared to obtain the sensitivity, specificity, and consistency of the new method.RESULTS Among the 408 culture samples isolated from tuberculosis patients, drug susceptibility test indicated 278 isoniazid-sensitive and 130 isoniazid-resistant specimens, and fluorescent PCR / melt-curves analysis revealed 281 and 127 specimens, respectively.Consequently, sensitivity, specificity,and consistency of the fluorescent PCR / melt-curves analysis were 87.69%, 95.32%, and 96.32%, respectively.CONCLUSION Fluorescent PCR / melt-curves analysis is time-efficient and high in specificity and sensitivity, and may be used in the rapid detection of isoniazid-resistant mutations in Mycobacterium tuberculosis and rapid screening of multidrug-resistant tuberculosis.“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项资助项目(2008ZX10003-004

可注射胶原蛋白-纳米金自组装水凝胶用于光热/光动力抗肿瘤治疗

基于蛋白、多肽自组装形成的可注射、可自愈水凝胶,因其固有的生物相容性、可降解性、可调的机械性能及环境响应性,在生物医学领域越来越受到关注~([1,2])。基于生物分子自组装的理念,我们构建了可原位矿化形成纳米金的、可注射、可自愈胶原蛋白水凝胶,其作用机理主要是:正电荷的胶原蛋白分子链与负电荷的无机阴离子团簇(AuCl_4~-)静电作用引发自组装。原位矿化形成的金纳米颗粒具有调控凝胶机械性能的作用,纳米金与胶原凝胶之间弱的作用力赋予了水凝胶剪切变稀及自愈性能。这种生物相容性良好的胶原水凝胶可作为一种新颖的工具用于药物保留及药物持续释放。它具有诸多优点,如降低药物使用量、降低药物毒性、提高生物利用...</p

可注射的光活性胶原蛋白水凝胶及抗肿瘤应用研究

癌症已成为危害人类健康的主要杀手,实现癌症的有效治疗已成为当代社会迫切需要解决的重要课题之一。智能水凝胶药物递送系统本身对温度、p H、力等外界刺激能做出迅速的反应,在生物医学领域尤其是体表肿瘤治疗方面受到了广泛关注。采用一步策略设计并合成了具有自治愈特性的胶原蛋白水凝胶。此水凝胶可原位合成纳米金颗粒,赋予其光热的性质,同时水凝胶也可负载光动力药物,实现光敏药物在病灶部位的原位保留和可持续释放。因此,该蛋白水凝胶可用于肿瘤的光热-光动力的联合治疗,可根据需要调控体系实现单激光激发。水凝胶制备过程环境友好,具有良好的生物相容特性,高稳定性,极小副作用及低细胞毒性。在肿瘤治疗方面,采用原位注射水凝胶的方法,大大降低了给药剂量,有效防止药物全身扩散带来的毒副作用;胶原凝胶装载药物的持续性肿瘤富集与释放,实现了一次给药长时间多次治疗的目的,可有效减轻患者的痛苦;单激光光源的光热与光动力的联合治疗,能够提高肿瘤的治疗效果

二肽水凝胶流变学调控及免疫激活抗肿瘤研究

基于分子的自组装机制,寡肽分子自组装构建的水凝胶具有一定的生物学活性,良好的生物相容性及生物可降解性,同时具有较高的生物安全性及稳定性。因此,在药物递送及缓释、组织工程辅料材料方面发挥着重要的作用。尤其是在无额外添加抗原及佐剂情况下,肽水凝胶材料直接作为免疫激活剂,在激活肿瘤免疫应答,发挥免疫抗肿瘤效应方面,所具备的重要意义及潜在应用,至今还未被报道。我们设计并自组装构建了苯丙氨酸二肽基水凝胶体系,基于生物相容性分子多聚赖氨酸PLL与二肽Fmoc-FF之间可逆的非共价键作用,实现了对凝胶流变学性能的有效调控,所制备的水凝胶具有较好的剪切变稀及自愈特性,随着多聚赖氨酸分子质量的增加,凝胶的粘弹模量的同步增长,此水凝胶可作为可注射材料应用于小鼠体内抗肿瘤治疗。研究发现,此水凝胶能够成功激活C57BL/6小鼠T细胞免疫应答,从而有效抑制了小鼠肿瘤的增长。此外,通过对实验组动物小鼠的体重参数、脏器指标及病例切片进行监测,证实了此凝胶材料良好的生物安全性。</p

A Quantitative Study on the Vocabulary Grading in Elementary Chinese Textbooks

本研究以12套初级对外汉语教材（9套精读教材，3套阅读教材）为定量研究的对象，主要考察和探究初级汉语教材课文词汇的等级定量标准（范围），包括三个方面的内容：甲乙丙丁词语和超纲词语的数量及比例、课文词汇密度、各等级词汇在定量方面的增减变化情况。 在上述研究基础上，以《汉语水平词汇等级大纲》和《汉语国际教育用词汇等级划分》为参考标准，我们提出自认为比较合适的词汇等级定量标准（范围）。然后我们再把对外汉语教师和外国留学生作为调查对象，对他们进行问卷调查或测试，以验证和修正此前提出的定量标准（范围），最后得出词汇等级定量标准（范围）作为本课题的研究结论。通过一系列的定量统计和定性分析，我们得出了初级...This paper takes 12 sets of elementary Chinese textbooks as the subject of study, among which nine belong to intensive reading textbooks and three, to extensive reading materials. The main contents of the study cover the amount and proportion of the words included and excluded in A Syllabus of Graded Vocabulary for Chinese Proficiency, the lexical density of the selected texts, and changes of all ...学位：文学硕士院系专业：海外教育学院_语言学及应用语言学学号：2652010115128

一步合成胶原蛋白-纳米金复合物及在调控细胞生长方面的应用

纳米金在纳米生物医学领域的应用是最近较为活跃的研究方向,它以其优良的特性受到越来越多人的青睐。不同于传统的化学还原、表面活性剂改性的制备方法,我们采用了更环境友好、生物相容的一步还原方法,在较为温和的条件下制备出了蛋白-纳米金复合物。胶原是一种常见的胶原蛋白,在生物合成胶原-纳米金复合物反应过程中起到了还原剂和表面活性剂的双重作用。我们使用这种方法合成了粒径约为50纳米的具有明显壳核结构的复合物。与此同时,我们还探究了时间依赖、蛋白导向的纳米金颗粒的生长机制。所制备的蛋白-纳米金表现出了低细胞毒性、高稳定性以及良好的生物相容性。这种新材料在组织工程,特别是控制细胞生长和分化等方面有着潜在的应用..

肽基超分子胶体

肽基超分子胶体是基于肽分子间超分子作用,自发形成且具有有序分子排布及规整结构,兼具传统胶体及超分子特性的组装体系。利用超分子弱相互作用构筑功能性胶体,不仅是人们对生命组装进程深入理解的有效手段,也是实现优异的超分子材料的重要途径。肽分子具有组成明确、性能可调、生物安全性高及可降解等优势,是超分子化学、胶体与界面化学领域重要的组装基元。基于肽的超分子自组装,能够实现多尺度、多功能的生物胶体的构筑,被广泛应用于医药、催化、能源等领域。如何通过对肽序列的设计及分子间作用力的调控,实现对胶体结构和功能的精确控制,是近年来研究的重要课题之一。从分子尺度研究和揭示超分子胶体的组装过程及物理化学机制,探究胶体结构与功能的关系,是实现超分子结构和功能化的重要内容。本文基于“分子间作用的调控”及“结构与功能的关系”两个基本科学问题,系统地综述了肽基超分子胶体的组装机制、结构与功能,以及研究现状

肽基超分子胶体

肽基超分子胶体是基于肽分子间超分子作用,自发形成且具有有序分子排布及规整结构,兼具传统胶体及超分子特性的组装体系。利用超分子弱相互作用构筑功能性胶体,不仅是人们对生命组装进程深入理解的有效手段,也是实现优异的超分子材料的重要途径。肽分子具有组成明确、性能可调、生物安全性高及可降解等优势,是超分子化学、胶体与界面化学领域重要的组装基元。基于肽的超分子自组装,能够实现多尺度、多功能的生物胶体的构筑,被广泛应用于医药、催化、能源等领域。如何通过对肽序列的设计及分子间作用力的调控,实现对胶体结构和功能的精确控制,是近年来研究的重要课题之一。从分子尺度研究和揭示超分子胶体的组装过程及物理化学机制,探究胶体结构与功能的关系,是实现超分子结构和功能化的重要内容。本文基于“分子间作用的调控”及“结构与功能的关系”两个基本科学问题,系统地综述了肽基超分子胶体的组装机制、结构与功能,以及研究现状

寡肽调控光敏分子自组装——在光能捕获和光动力治疗方面的机遇与挑战

蛋白的组装是自然界普遍存在的现象。在天然的捕光天线复合物中,蛋白和光敏分子的共组装使光敏分子呈三维有序排列,能够高效地捕获和传递太阳能。仅含有数个氨基酸的寡肽也具备复杂的自组装行为[1,2]。我们利用寡肽对光敏分子的自组装进行调控,获得了一系列多层次、多尺度的组装体[3-5]。这些组装体一方面可作为仿生的光捕获复合物,另一方面可作为光动力治疗用纳米制剂。调控光敏分子的分级有序排列是构筑光捕获复合物的一大挑战,以苯丙氨酸二肽和赖氨酸二肽通过弱相互作用力调控四(4-磺酸基苯基)卟啉自组装,在分级组装体中成功实现了光敏分子的长程有序排列。该组装体能够选择性摄取外源性物质、光催化合成无机纳米颗粒和有机...</p

Studies on inhibition of Na_6PMo_(11)FeO_(40)to melanin formation in mouse melanoma B16Cell and its antibacterial activity

研究了过渡金属取代的Kiggen型结构的杂多酸盐Na_6PMo_(11)FeO_(40)对体外培养的小鼠黑色素瘤B16细胞的生物学效应,并分析了; 其对4种细菌的抗菌活性.结果显示:不同浓度的Na_6PMo_(11)FeO_(40)对B16细胞的细胞形态和数量有不同程度的影响,对B16细胞的; 增殖率、酪氨酸酶活性以及黑色素合成量的抑制呈现出明显的浓度效应.浓度为50~200mumol/L的Na_6PMo_(11)FeO_(40)能显著; 抑制B16细胞增殖(P<0.05或P<0.01);浓度为200mumol/L的Na_6PMo_(11)FeO_(40)对酪氨酸酶活性抑制极显著(; P <0.01),IC_(50)为166.5 mumol/L;; Na_6PMo_(11)FeO_(40)对藤黄八叠球菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌均有抗菌作用,且对球菌的抑制效果优于杆菌.实验结果; 表明,Na_6PMo_(11)FeO_(40)可作为具有防腐抑菌功能的新型酪氨酸酶抑制剂.The bio-efficacy of Keggen-type Fe-substituted heteropoly; salt(Na_6PMo_(11)FeO_(40))on mouse B16melanoma cell in vitro was; researched,and its antibacterial activity of four species of bacteria; was analyzed in this paper.The results showed that the cell morphology; and number of B16cell were changed by different concentrations of; Na_6PMo_(11)FeO_(40).And the inhibition effect of Na_6PMo_(11)FeO_(40)on; cell proliferation rate,tyrosinase activity and melanin content appears; dose-effect relationship.The proliferation of B16cell was inhibited; significantly after treat with 50~200mol/L of Na_6PMo_(11)FeO_(40); (P<0.05or P<0.01).The inhibition effect of Na_6PMo_(11)FeO_(40)on; tyrosinase activity is significant (P<0.01),its IC_(50)is; 166.5mol/L.Na_6PMo_(11)FeO_(40)have an antibacterial effect on the four; tested bacteria(Escherichia coli,Bacillus subtilis,Staphylococcus aureus; and Sarcina lutea),and its inhibitory effect on the coccus is better; than bacillus.The result indicated that Na_6PMo_(11)FeO_(40)can be used; as a new tyrosinase inhibitor with antibacterial activity.国家自然科学基金资助项