Structural basis for the wide-spectrum neutralization of H5N1 influenza virus by an antibody 13D4 with hCDR3 adaptively fitted to receptor-binding site

H5N1病毒自1997年以来造成人类社会巨大的经济损失和社会影响，并且呈现持续性的感染与危害。目前，有效的防治药物有小分子抑制药物与预防性疫苗，但均存在着病毒逃逸现象及保护范围较小等缺陷。因此，开发新型广谱药物是一项长期且重要的研究热点。已知的，流感病毒主要抗原区是在病毒表面包膜蛋白HA和NA上，其中HA被认为是新药物开发的关键靶标。由于越来越多的跨型及型内广谱中和抗体被分离出来，人们将注意力转移至研究血凝素蛋白的广谱表位，以期设计出广谱通用型流感疫苗。 在本实验室前期研究工作中，从病毒免疫的小鼠体内分离出一株H5型特异性广谱单抗13D4，经过血凝抑制实验和细胞中和实验等方法，鉴定出其具备识...Since 1997, H5N1 virus has caused great economic loss and social influence in human society, and has been showing sustained infection and damage. At present, Drugs for effective prevention and control of H5 subtype virus are a small molecule inhibitory drug or prophylactic vaccines, however, there are some shortcomings including recognition of mutant virus and smaller range of protection. Therefor...学位：理学博士院系专业：生命科学学院_生物化学与分子生物学学号：2162011015394

Degradation performance of the digital coralline hydroxyapatite artificial bone scaffold in vitro

背景:前期实验成功制备了数字化珊瑚羟基磷灰石人工骨支架材料,并已证实其具有良好的理化性能和生物相容性。目的:评价数字化珊瑚羟基磷灰石人工骨的体外降解性能。方法:将珊瑚羟基磷灰石与左旋-聚乳酸分别以3∶1和4∶1的质量比混合,制备数字化珊瑚羟基磷灰石人工骨支架材料试件。将两种数字化人工骨支架材料、珊瑚羟基磷灰石及左旋-聚乳酸分别置于初始p H值为7.4的50 m L模拟体液中,在37℃恒温箱中降解16周,动态观察溶液p H值、钙及磷离子浓度,以及材料降解率、抗压强度及微观结构变化。结果与结论:降解16周时,两种数字化人工骨组的p H值维持在7.34-7.36,高于左旋-聚乳酸组(P3∶1数字化人工骨组>左旋-聚乳酸组>4∶1数字化人工骨组;两种数字化人工骨微孔结构增多,孔隙率升高,孔径增大,说明数字化珊瑚羟基磷灰石人工骨支架具有良好的降解性能。BACKGROUND: We have successfully prepared the digital coralline hydroxyapatite artificial bone scaffold in previous experiments, and it has good physicochemical properties and biocompatibility. OBJECTIVE: To evaluate the in vitro degradation performance of the digital coralline hydroxyapatite artificial bone. METHODS: We used the mixtures of coralline hydroxyapatite and L-polylactic acid at the mass ratio of 3:1 and 4:1 as raw materials to prepare the digital coralline hydroxyapatite artificial bone scafflold specimens, and then they were immersed in the 50 m L stimulated body fluid with the initial p H value of 7.4 in an incubator at 37 ℃ for degradation. After 16 weeks of degradation, the p H value, calcium and phosphate ion concentration, degradation rate, compressive strength and changes of microstructure were dynamically observed. RESULTS AND CONCLUSION: At the 16 th weeks of degradation, the p H values in the two kinds of digital artificial bone groups maintained at 7.34-7.36, which were higher than that in the L-polylactic acid group(P 3:1 digital artificial bone group > L-polylactic acid group > 4:1 digital artificial bone group. The cellular structure, porosity and pore size in the two kinds of digital artificial bone groups were all increased. These results show that the prepared digital coralline hydroxyapatite artificial bone scaffold has good degradation propertyies.福建省教育厅科技项目(JA12416);; 福建省自然科学基金青年创新项目(2013D013);; 漳州职业技术学院院级科研项目(ZZY1204)~

Nekton species composition and biodiversity in Taiwan Strait

根据2006-2007年在台湾海峡进行的四个季度航次定点底拖网调查资料,分析了台湾海峡游泳动物的种类组成、数量分布、优势种和多样性等特征。结果表明,调查海域共鉴定出游泳动物373种,其中鱼类273种,甲壳类81种,头足类19种;渔获物组成以鱼类为主,占渔获物总重量的65.6%,其次为甲壳类和头足类,分别占21.1%和13.3%,所有调查站位游泳动物的年平均生物量密度指数为24.91kg/H,主要优势种类为带鱼(TrICHIuruS JAPOnI-CuS)、拥剑梭子蟹(POrTunuS HAAnII)、二长棘鲷(PArArgyrOPS EdITA)、龙头鱼(HArPAdOn nEHErEuS)、竹筴鱼(TrACHuruS JAPOnICuS)、火枪乌贼(lOlIgO bEkA)等。对多样性的分析显示,台湾海峡游泳动物物种多样性指数(H′)变化范围为1.45-3.21,平均为2.47,其中秋季最高,夏季最低,且呈现南高北低的特点。与历史资料相比,目前台湾海峡游泳动物种类数明显减少,尤其是闽东和闽南—台湾浅滩海域表现最为突出;优势种类个体呈现小型化和低龄化趋势,表明台湾海峡游泳动物资源衰退明显。Based on four bottom trawl surveys(2006-2007) in the Taiwan Strait,nekton species composition,biomass and density distribution,dominant species,and community characteristics were analyzed.We re-corded 373 nektonic species including 273 fish species,81 crustaceans and 19 cephalopods.The mean bio-mass density index of the study area was estimated to be 24.91 kg/h with fish species,crustacean species and cephalopod species accounting for 65.6%,21.1% and 13.3% of the total,respectively.Dominant species in-cluded Trichiurus japonicus,Portunus haanii,Parargyrops edita,Harpadon nehereus,Trachurus japonicus and Loligo beka.Shannon-Wiener diversity indices(H') ranged from 1.45 to 3.21,with an average of 2.47 and were higher in autumn and winter than in spring and summer.Compared with historical data,nekton resources are obviously declining,with species richness decreasing especially in the Minnan-Taiwan Bank area.Domi-nant species also exhibited a preponderance of smaller size and age classes compared to historical data.国家海洋专项资助项目(908-02-01-02;908-02-04-01);国家海洋局第三海洋研究所基本科研业务费专项资金资助项目(海三科2010016

白令海鱼类分类多样性及鱼类区系研究

根据FishBase、Global Species等数据库中的鱼类物种资料,结合中国第四次北极科学考察在白令海的鱼类调查数据,运用分类多样性方法分析了白令海鱼类的分类多样性水平及其区系特征。结果表明:数据库记录白令海鱼类359种,中国第四次北极科学考察在白令海捕获鱼类31种;白令海与阿拉斯加湾鱼类相似性系数最高;白令海鱼类分类阶元包含指数(TINCLi)分别为目级阶元(2.90、8.86、16.48)、科级阶元(3.05、5.67)、属级阶元(1.80),平均分类差异指数△~+为62.7,分类差异变异指数∧~+为185.0;白令海鱼类组成可以分为3个区系。随着全球气候变化导致白令海海域的冷水团北移和海水表面温度上升,部分鱼类持续性北移可能是白令海的鱼类物种组成结构改变的主要原因。国家自然科学基金项目(41876176);;南北极环境综合考察与评估专项(CHINARE2012 2016);;国家海洋局第三海洋研究所基本科研业务费专项(海三科2016011;2018010)资助~

HIV-1 gp160截短蛋白在酿酒酵母中的表达

利用PCR技术从pNL-43上扩增出截短的编码gp160蛋白的基因片断,克隆到酿酒酵母表达载体YEpFLAG-1上构建表达质粒YEp-gp160Δ12,电转化到酿酒酵母中,用缺色氨酸的SC培养基筛选出阳性克隆,重组子经YP培养基诱导后进行全菌蛋白的SDS-PAGE和Western Blotting分析,筛选出高表达菌株.纯化后的重组gp160Δ12(rgp160Δ12)蛋白经ELISA鉴定显示具有良好的生物活性

重组毕赤酵母高密度发酵表达H5N1禽流感病毒糖蛋白

在10L发酵罐中,对高致病性禽流感病毒H5N1糖蛋白HA1在重组毕赤酵母中的表达发酵工艺进行了研究。通过分批补料培养方法探讨不同培养温度、诱导温度、补料方式、微量元素等因素对菌体的生长以及重组蛋白表达和活性的影响。结果表明,菌种培养和诱导温度均为25oC时,菌体的生长、分泌表达量和与广谱中和抗体的反应活性较好;微量元素是影响重组HA1蛋白生物活性的重要因素;通过优化高密度发酵工艺,H5N1病毒糖蛋白HA1在发酵罐中的表达量比摇瓶培养提高10.5倍,达到约120mg/L,为大规模制备高致病性禽流感病毒的HA1蛋白奠定了基础

抗H5亚型禽流感病毒单链抗体在毕赤酵母中的分泌型表达和生物活性分析

在本实验室研制出的多株针对H5N1亚型禽流感血凝素单抗中,13D4单抗对所有H5亚型病毒均有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强和识别广的特点,且在小鼠实验中显示了对各种代表株禽流感的感染和发病均具有良好的治疗效果。在此研究基础上,本实验通过基因工程构建含有13D4单链抗体(scFv)基因的毕赤酵母表达载体,实现目的蛋白的分泌性表达和纯化。经过竞争法和血凝抑制检测其活性,表明获得的单链抗体具有与原始鼠源抗体相近的反应活性和相同的识别表位。H5N1广谱中和单抗13D4的单链抗体的成功构建,为进一步研制针对H5N1禽流感病毒的治疗性抗体奠定了基础

云南召夸赤铁矿流化床直接还原—磁选试验

召夸赤铁矿原矿品位低,嵌布粒度细。采用流化床作为直接还原装置,以H2与N2的体积比为1∶4的混合气体作为还原气,对召夸赤铁矿进行直接还原—磁选试验。结果表明:在700℃下将磨矿细度为-150目占92%的原矿直接还原70min,可得金属化率为85.89%的还原矿。将还原矿在球磨机中细磨至平均粒径为3.98μm,在场强为63.66kA/m的磁选管中磁选,可得品位为73.04%,回收率为77.28%铁精矿

B类颗粒在鼓泡流化床中流动特性的数值模拟

采用欧拉双流体模型对鼓泡流化床中气-固两相流动行为进行数值模拟。模拟结果表明，采用结构曳力模型能够较好地预测B类颗粒在鼓泡流化床中的流动行为。对比初始流态化颗粒浓度图和完全流态化颗粒浓度分布图，可以发现结构曳力模型能够较好地展现鼓泡流化床中气泡的运动特性。当比较不同曳力模型下的模拟结果时，结构曳力模型比传统曳力模型能够更好地预测颗粒的径向分布

钒电解液V(Ⅲ)离子结构与电化学活性关系探讨

全钒液流电池(VRFB)因其固有安全性和超长服役寿命,被认为是最具应用前景的大规模电化学储能技术之一。VRFB负极电解液在充放电过程中主要发生V(Ⅲ)V(Ⅱ)离子氧化/还原反应,因V(Ⅲ)离子还原的标准电极电位为-0.25 V(vs.NHE),充电过程易于发生析氢副反应而严重影响VRFB性能,负极电解液的活性和析氢行为与V(Ⅲ)离子结构密切相关。基于Gaussian量子化学计算平台,采用MP2理论方法和LANL2DZ基组对不同构型V(Ⅲ)离子进行结构优化,分析其反应活性,并结合电解液电化学性能测试结果,发现新制备电解液中的V(Ⅲ)离子因存在一定程度聚合而表现出较差的电化学活性,经过5次充放电循环后,钒离子聚合程度减小,表现出较好的电化学活性,析氢副反应也得到抑制,充放电活化的电解液室温存放40天后活性又出现明显下降,表明VRFB负极电解液中V(Ⅲ)离子水解聚合是自发性的