33 research outputs found

    不同区段HIV-1 env基因在Bac-to-Bac昆虫细胞杆状病毒表达系统中的表达及检测

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    利用昆虫细胞杆状病毒表达系统 ,将从一株HIV - 1阳性克隆质粒中获得的几个HIV包膜蛋白基因片段 ,克隆入转移载体中得到重组病毒。用此重组病毒感染昆虫细胞后表达出 3种HIV包膜蛋白 ,即GP12 0 - 41P、GP41T、GP41P ,分别含有HIV - 1包膜糖蛋白GP12 0及部分GP41,删除了N端 12个疏水氨基酸的GP41和仅有主要表位约 2 40个氨基酸的GP41。收获后分别以Western -blotting和EIA检测 ,有较好的免疫学活性 ,其中GP41T的活性最强。该实验为HIV包膜蛋白的结构研究提供了依据 ,加以改进后可能有免疫检测的价值

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    目的 研究高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染相关的宫颈病变程度与抗人乳头瘤状病毒(HPV)抗体水平的相关性,探讨HPV致病的免疫学问题。方法 选取2012年1月-2013年6月在该院妇产科门诊就诊的女性中选取60例病理确诊为女性宫颈病变(CINⅠ及以上),且宫颈脱落细胞的DNA检测为HR-HPV阳性者为研究组,根据组织学检测结果将研究组进一步分为低度病变组30例(CINⅠ)和高度病变组30例(CINⅡ或Ⅲ)。对照组为经核酸检测无HPV感染且病理诊断未见癌前病变的门诊患者60例,按年龄进一步分为低年龄组和高年龄组。低年龄组和高年龄组与低度病变组和高度病变组的年龄差异无统计学意义(P〉0.05)。分别抽取研究组及对照组外周血,检测其抗HR-HPV L1 Ig G抗体及中和抗体滴度,比较研究组与对照组抗体阳性率及抗体滴度水平的差别。结果 研究组血清中的抗HR-HPV L1 Ig G抗体阳性率及抗体滴度均高于对照组(P〈0.05);低度病变组患者血清中的抗HR-HPV的中和抗体滴度高于相应对照组(P〈0.05),而高度病变组的抗HR-HPV的中和抗体阳性率及抗体水平与相应对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 宫颈病变患者血清中抗HR-HPV L1 Ig G抗体升高,说明HPV感染可引起机体的体液免疫反应。低度病变组的中和抗体水平相对较高,可能是机体产生的中和抗体阻止了病毒的进一步感染。高度病变组的Ig G抗体和中和抗体均低下,说明进入CINⅡ/Ⅲ后HPV已经逃避了免疫系统的监视。基金项目:厦门市科技局项目(3502220124050);2011年福建省科技计划项目资助计划,青年创新项目(20111)00310517

    大肠杆菌来源的人乳头瘤病毒11型病毒样颗粒的制备及其免疫原性

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    【目的】利用大肠杆菌表达系统制备人乳头瘤病毒11型病毒样颗粒(HPV11VLPs),并对其免疫原性和所诱导中和抗体的型交叉反应性进行研究。【方法】在大肠杆菌ER2566中非融合表达HPV11-L1蛋白,并通过离子交换层析,疏水相互作用层析其进行纯化。纯化后的HPV11-L1经体外组装形成病毒样颗粒,通过动态光散射,透射电镜检测其形态,并通过多种HPV型别假病毒中和实验评价HPV11VLPs的免疫原性及型交叉反应性。【结果】HPV11-L1蛋白在大肠杆菌中可以以可溶形式表达。经过硫酸铵沉淀、离子交换和疏水相互作用色谱纯化,目的蛋白纯度能够达到95%以上。纯化的HPV11-L1蛋白去除还原剂DTT后,能够在体外自发组装成为直径约50nm、与天然病毒颗粒形态高度相似的VLPs。动物实验结果显示,该病毒样颗粒在小鼠体内的中和抗体半数有效剂量(ED50)为0.031μg,在小鼠体内可诱导高达106的中和抗体滴度,这些中和抗体与HPV6有较好的交叉反应,与HPV18有一定的交叉反应,而与HPV16没有明显的交叉反应,这一结果与分子进化树的分析相一致。【结论】本研究利用原核表达系统获得了具有较高免疫原性的HPV11VLPs,为HPV11预防性疫苗的研制奠定了良好的基础

    分子对接预测H5亚型禽流感病毒的广谱中和表位

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    H5N1禽流感病毒已经在亚洲、欧洲和非洲广泛传播,造成了巨大损失.最近我们鉴定出一株对多种来源的H5N1代表株均有良好中和活性的、识别H5亚型血凝素(hemagglutinin,HA)的广谱单克隆抗体8H5,它对寻找克服禽流感高变性的广谱治疗性抗体、疫苗和药物具有重要价值.本研究应用分子模拟技术,采用"典范结构"方法对8H5抗体Fab片段进行结构模建,并通过能量分析、SAS值分析、"拉曼强传图"检验、profile-3D分析等理论验证,获得较为合理的8H5Fab的三维空间结构.8H5Fab与3种HA蛋白晶体结构的分子对接结果表明,8H5抗体与HA蛋白的作用模式与HA宿主来源无关,但与HA结构的亚型相似性相关.综合抗原同源比对结果,推测8H5抗体识别的广谱中和表位是由HA上的Asp68,Asn72,Glu112,Lys113,Ile114,Pro118,Ser120,Tyr137,Tyr252不连续氨基酸残基组成的构象表位.这一模型将为H5亚型禽流感病毒广谱疫苗和治疗性药物的分子设计提供依据

    企業不祥事と CSR

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    Corporate Scandals and CSR

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    The Registration Measures and Optimization Methods Related in Brain Functional Magnetic Resonance Imaging

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    随着脑功能成像技术的迅速发展,人们对fMRI时间序列图像的配准问题也越来越重视.通过配准测度的建立,图像的配准问题最终被归结为数学上的多参数优化问题.本文综述了目前较常用的配准方法,介绍了基于灰度值的图像配准的差值平方和测度与互信息测度以及求解它们的优化方法:阻尼Gauss Newton法、有记忆功能的模拟退火算法、改进的Powell算法和一类新的进化策略算法.这四种算法各有特点能有效地找到最佳配准参数,配准精度较高,且能收敛到全局最优点

    fMRI时间序列图像的配准测度及其相关优化方法

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    随着脑功能成像技术的迅速发展,人们对fMRI时间序列图像的配准问题也越来越重视.通过配准测度的建立,图像的配准问题最终被归结为数学上的多参数优化问题.本文综述了目前较常用的配准方法,介绍了基于灰度值的图像配准的差值平方和测度与互信息、测度以及求解它们的优化方法:阻尼GaussNewton法、有记忆功能的模拟退火算法、改进的Powell算法和一类新的进化策略算法.这四种算法各有特点能有效地找到最佳配准参数,配准精度较高,且能收敛到全局最优点
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