Effects of Taohong Siwu Decoction on the expression of pathological angiogenesis correlation factors including VEGF,KDR and Flt-1 in hepatic fibrosis mice

目的:从整体水平研究复方桃红四物汤对四氯化碳所致肝纤维化模型小鼠肝组织血管内皮生长因子(VEGF)、含激酶插入区受体(KDR)及Flt-1蛋白与mRNA表达的影响。方法:昆明小鼠60只,随机分组为空白组,模型组,秋水仙碱组,桃红四物汤高、中、低(17.00、8.50、4.25g/kg)剂量组,采用左侧腹股沟处皮下注射四氯化碳花生油溶液建立小鼠肝纤维化模型,给药6周后,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肝组织VEGF蛋白含量;蛋白印迹法(Western blot)测定小鼠肝脏KDR、Flt-1蛋白的表达;逆转录PCR(RT-PCR)法测定小鼠肝脏VEGF、KDR及Flt-1 mRNA表达。结果:桃红四物汤治疗后,桃红四物汤高、中剂量组肝组织VEGF蛋白表达量较模型组降低(P<0.05,P<0.01),中药高剂量组肝组织KDR与Flt-1蛋白表达较模型组显著降低(P<0.05);而桃红四物汤高、中剂量组肝组织VEGF、KDR与Flt-1 mRNA表达较模型组、秋水仙碱组明显减少(P<0.01),并且呈现一定的量效正相关。结论:桃红四物汤能够降低肝纤维化病理血管生成相关因子的表达,减缓病理性的微血管生成可能是其改善肝纤维化的机制之一。Objective:To investigate the effects of Taohong Siwu Decoction(THSWD) on protein and mRNA expression of vascular endothelial growth factor(VEGF),kinase insert domain containing receptor(KDR) and Flt-1 in hepatic fibrosis model mice caused by CCI_4.Methods:Sixty Kunming mice were randomly divided into blank,model,colchicine(control)and three THSWD(17.00,8.50,4.25g/kg) groups,with 10 mice in each group.Except the blank group,the other groups' mice were subcutaneously injected with carbon tetrachloride(CCI_4)-arachis oil solution in left inguen to establish hepatic fibrosis mouse model.After administration for six weeks,the content of VEGF protein in liver tissue was measured by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA),protein expressions of KDR and Flt-1 in liver tissue were detected by Western blotting,and mRNA expressions of VEGF,KDR and Flt-1 in liver tissue were measured by reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR).Results:After treatment,the content of VEGF protein in THSWD(17.00,8.50g/kg) groups were lower than that in model group(P<0.05,P<0.01).The protein expressions of liver tissue KDR and Flt-1 in THSWD(17.00g/kg) group were less than that in model group(P<0.05).The mRNA expressions of liver tissue VEGF,KDR and Flt-1 were significantly lower than that in both model and colchicine groups(P<0.01),which showed a certain positive correlation between dose and effect.Conclusion:Taohong Siwu Decoction could decrease the expression of pathological angiogenesis correlation factors of hepatic fibrosis,thus helpful to induce the formation of pathological capillary vessels,which may be one of the possible mechanisms of ameliorating hepatic fibrosis.国家自然科学青年基金项目(No.81202659);; 福建省自然科学基金项目(No.2014J01373);; 厦门大学新聘教师科研启动基金项目(No.ZK1014);; 福建省大学生创新创业训练项目(No.DC2013174)~

联合检测HBV前S1抗原和核心抗原的临床意义

目的:探讨联合检测血清HBV前S1抗原(preS1)和核心抗原(HBcAg)(均为HBV核酸相关抗原,nucleic acids related antigen,HBV NRAg)的意义及临床价值。方法:采用ELISA法对393份HBsAg、HBV DNA双阳性的血清和612份HBsAg阴性血清进行HBV NRAg检测,所有标本均采用多区段巢式PCR确认阳性、阴性,采用荧光定量PCR法进行HBV DNA定量分析。结果:393份HBsAg、HBV DNA双阳性血清中,HBV NRAg阳性为382份,其阳性率为97.2%;612份HBsAg阴性的血清标本中,609份确认为HBV DNA阴性,其中检出2份HBV NRAg阳性,607份为阴性,其HBV NRAg的阴性率为99.7%(607/609),另3份HBsAg阴性血清HBV DNA阳性者,其HBV NRAg均为阳性。结论:联合检测preS1和HBcAg的HBV NRAg可作为临床HBV感染的筛选及判断HBV复制的有意义的补充项目

Preparation and biological safety of basic fibroblast growth factor/double-layered collagen composite

背景:胶原特殊的分子结构和生物活性有利于多种细胞黏附、增殖和分化,并可降解为新生组织提供足够空间。目的:制备一种复合负载碱性成纤维细胞生长因子的壳聚糖-肝素纳米粒子双层胶原基复合材料,并评价其生物安全性。方法:制备交联风干胶原膜和交联冻干胶原膜。将壳聚糖-肝素纳米粒滴于交联冻干胶原膜上,再将湿态交联风干胶原膜置于复合纳米粒子的交联冻干胶原膜上风干,即碱性成纤维细胞生长因子/双层胶原基复合材料。采用急性全身毒性试验、溶血试验、热原试验和细胞毒性试验评价其生物安全性。结果与结论:碱性成纤维细胞生长因子/双层胶原基复合材料为双层结构,一侧表面致密,另一侧疏松多孔。在其中间负载碱性成纤维细胞生长因子的壳聚糖-肝素纳米粒子呈不规则球形分布于胶原膜内侧面;急性全身毒性试验、热原试验、溶血试验均为阴性,细胞毒性为0级。说明碱性成纤维细胞生长因子/双层胶原基复合材料具有良好的生物安全性,对机体无毒,符合ISO10993-1评价标准。BACKGROUND: Collagen is a common used scaffold in tissue engineering, its specific molecular structure and biological activity are conducive to a variety of cell adhesion, proliferation and differentiation, and can speed up wound healing and degradation to provide sufficient space for new tissues.OBJECTIVE: To prepare a kind of inhomogeneous double layered collagen composite incorporated with basic fibroblast growth factor (bFGF) loaded chitosan-heparin (CS-Hep) nanoparticles, and to evaluate its biological safety.METHODS: The air-dried dense layer collagen membranes and freeze-dried loose layer collagen membrane were prepared respectively and then cross-linked by D-ribose (termed as CAM and CFM respectively).CS-Hep nanoparticles were prepared and then dropped on the surface of CFM.The wet CAM was laid on the surface of CFM with nanoparticles, and then air dried completely at 4 ℃.The obtained material was termed as bDM.Its physical and chemical properties were investigated.In addition, its bio-safety was also examined through acute systemic toxicity, pyrogen, hemolysis and cellular toxicity tests.RESULTS AND CONCLUSION: The bFGF/double-layered collagen composite was made up of double layers with one dense layer (CAM) and another loose layer (CFM).As part of bDM, CS-Hep nanopartiles with irregular global shape were aligned in the scope of D-period structure of the inner surface of CFM; the bFGF/double-layered collagen composite had no systemic acute toxicity, no cytotoxicity and pyrogen reactions as well as no hemolytic effect.The bFGF/double-layered collagen composite is prepared and found to have good biocompatibility and safety.Moreover, this material conforms to the ISO 10993-1, and can be used as a basic scaffold material in tissue engineering天津市科技支撑计划重点项目(08ZCKFSF02100);博士点基金项目(20101106110042)---

大肠杆菌来源的人乳头瘤病毒11型病毒样颗粒的制备及其免疫原性

【目的】利用大肠杆菌表达系统制备人乳头瘤病毒11型病毒样颗粒(HPV11VLPs),并对其免疫原性和所诱导中和抗体的型交叉反应性进行研究。【方法】在大肠杆菌ER2566中非融合表达HPV11-L1蛋白,并通过离子交换层析,疏水相互作用层析其进行纯化。纯化后的HPV11-L1经体外组装形成病毒样颗粒,通过动态光散射,透射电镜检测其形态,并通过多种HPV型别假病毒中和实验评价HPV11VLPs的免疫原性及型交叉反应性。【结果】HPV11-L1蛋白在大肠杆菌中可以以可溶形式表达。经过硫酸铵沉淀、离子交换和疏水相互作用色谱纯化,目的蛋白纯度能够达到95%以上。纯化的HPV11-L1蛋白去除还原剂DTT后,能够在体外自发组装成为直径约50nm、与天然病毒颗粒形态高度相似的VLPs。动物实验结果显示,该病毒样颗粒在小鼠体内的中和抗体半数有效剂量(ED50)为0.031μg,在小鼠体内可诱导高达106的中和抗体滴度,这些中和抗体与HPV6有较好的交叉反应,与HPV18有一定的交叉反应,而与HPV16没有明显的交叉反应,这一结果与分子进化树的分析相一致。【结论】本研究利用原核表达系统获得了具有较高免疫原性的HPV11VLPs,为HPV11预防性疫苗的研制奠定了良好的基础

人乳头瘤病毒16型假病毒中和实验的建立和初步应用

探讨了应用多质粒磷酸钙共转染方法在293FT细胞中生产HPV16(human papillomavirus type 16)假病毒。蛋白印迹检测显示在转染后细胞的裂解上清中具有很好的L1蛋白活性,通过透射电镜可观察到形态与天然病毒粒子相似的假病毒颗粒。对293FT细胞的感染实验显示,该假病毒可有效将EGFP报告质粒导入靶细胞中进行表达,经测定其滴度约为2×107TU/mL。通过与4株HPV16对照单抗的中和实验证明该假病毒可有效应用于中和实验。应用该方法从18株抗HPV16L1的单克隆抗体中鉴定获得了2株中和单抗3D10、PD1。所建立的HPV16假病毒生产和中和实验方法具有快速高效、低成本和易于检测的优点,适于进行较大规模应用,为快速准确鉴定HPV16中和单抗和候选疫苗的免疫保护效果提供了有效手段

中国物理海洋学研究70年：发展历程、学术成就概览

本文概略评述新中国成立70年来物理海洋学各分支研究领域的发展历程和若干学术成就。中国物理海洋学研究起步于海浪、潮汐、近海环流与水团,以及以风暴潮为主的海洋气象灾害的研究。随着国力的增强,研究领域不断拓展,涌现了大量具有广泛影响力的研究成果,其中包括:提出了被国际广泛采用的"普遍风浪谱"和"涌浪谱",发展了第三代海浪数值模式;提出了"准调和分析方法"和"潮汐潮流永久预报"等潮汐潮流的分析和预报方法;发现并命名了"棉兰老潜流",揭示了东海黑潮的多核结构及其多尺度变异机理等,系统描述了太平洋西边界流系;提出了印度尼西亚贯穿流的南海分支(或称南海贯穿流);不断完善了中国近海陆架环流系统,在南海环流、黑潮及其分支、台湾暖流、闽浙沿岸流、黄海冷水团环流、黄海暖流、渤海环流,以及陆架波方面均取得了深刻的认识;从大气桥和海洋桥两个方面对太平洋–印度洋–大西洋洋际相互作用进行了系统的总结;发展了浅海水团的研究方法,基本摸清了中国近海水团的分布和消长特征与机制,在大洋和极地水团分布及运动研究方面也做出了重要贡献;阐明了南海中尺度涡的宏观特征和生成机制,揭示了中尺度涡的三维结构,定量评估了其全球物质与能量输运能力;基本摸清了中国近海海洋锋的空间分布和季节变化特征,提出了地形、正压不稳定和斜压不稳定等锋面动力学机制;构建了"南海内波潜标观测网",实现了对内波生成–演变–消亡全过程机理的系统认识;发展了湍流的剪切不稳定理论,提出了海流"边缘不稳定"的概念,开发了海洋湍流模式,提出了湍流混合参数化的新方法等;在海洋内部混合机制和能量来源方面取得了新的认识,并阐述了混合对海洋深层环流、营养物质输运等过程的影响;研发了全球浪–潮–流耦合模式,推出一系列海洋与气候模式;发展了可同化主要海洋观测数据的海洋数据同化系统和用于ENSO预报的耦合同化系统;建立了达到国际水准的非地转(水槽/水池)和地转(旋转平台)物理模型实验平台;发展了ENSO预报的误差分析方法,建立了海洋和气候系统年代际变化的理论体系,揭示了中深层海洋对全球气候变化的响应;初步建成了中国近海海洋观测网;持续开展南北极调查研究;建立了台风、风暴潮、巨浪和海啸的业务化预报系统,为中国气象减灾提供保障;突破了国外的海洋技术封锁,研发了万米水深的深水水听器和海洋光学特性系列测量仪器;建立了溢油、危险化学品漂移扩散等预测模型,为伴随海洋资源开发所带来的风险事故的应急处理和预警预报提供科学支撑。文中引用的大量学术成果文献(每位第一作者优选不超过3篇)显示,经过70年的发展,中国物理海洋学研究培养了一支实力雄厚的科研队伍,这是最宝贵的成果。这支队伍必将成为中国物理海洋学研究攀登新高峰的主力军

杂交构树在兰州地区的生长动态及刈割期

本研究以兰州地区种植的杂交构树(Broussonetia papyrifera)为材料,对两种水肥条件下杂交构树的生长量和营养成分动态变化规律进行了研究,并采用灰色关联度分析和权重赋值法对两次刈割时的株高、产量、粗蛋白(crude protein, CP)、粗灰分(Ash)、中性洗涤纤维(neutral detergent fiber, NDF)、酸性洗涤纤维(acid detergent fiber, ADF)含量进行综合评价,以确定两次刈割最佳刈割期。结果表明:高肥力区杂交构树在第3个生长月进入株高与产量的快速生长期,低肥力区杂交构树进入快速生长期的时间要比高肥力区滞后1个月。两个肥力区的CP含量均在第3个生长月即植株进入快速生长期时含量最高,而后显著下降(P <0.05)的月份不同,低肥力区较高肥力区提前1个月。NDF、ADF含量在两个肥力区基本表现了相同的升高趋势,在第5个生长月均达到了最高。灰色关联度分析和权重赋值法结果显示,两种水肥条件下,两次刈割时间安排为第2个生长月和第4个生长月时综合评价值均最高,建议杂交构树在兰州地区两次刈割的适宜刈割期为第2个生长月和第4个生长月

Symbiotic algae in two scleractinian corals: molecular phylogeny and their response to elevated temperatures

珊瑚白化是导致全球珊瑚礁生态系统衰退的最重要原因之一,野外观察结果表明不同种属的造礁石珊瑚对于海水温度升高的耐受性有所差异.选取多孔鹿角珊瑚(Acropora millepora)和丛生盔形珊瑚(Galaxea fascicularis)为研究对象,比较其共生藻在温度升高时的光生理差异.对多孔鹿角珊瑚和丛生盔形珊瑚共生藻的分子系统学研究结果表明:多孔鹿角珊瑚和丛生盔形珊瑚的共生藻属于不同系群,丛生盔形珊瑚共生藻属于D系群,而多孔鹿角珊瑚共生藻属于C1亚系群.当温度升高到30℃时并未对两种造礁石珊瑚共生藻光合系统Ⅱ造成损害,而当温度升高到34℃时两种造礁石珊瑚共生藻的F_v/F_m值急剧下降,其光合系统Ⅱ遭受损害.多孔鹿角珊瑚和丛生盔形珊瑚分别与不同系群的共生藻共生可能是导致其对海水温度升高耐受性不同的主要原因,与C1亚系群共生藻共生的多孔鹿角珊瑚对水温升高敏感,容易白化,而与D系群共生藻共生的丛生盔形珊瑚对水温升高的耐受性强,不易白化

超临界CO_2流体萃取分离乙醛酸的研究

本文通过测定草酸和乙醛酸在不同的温度和压力下在超临界CO2流体中的溶解度,确定超临界CO2流体萃取乙醛酸的工艺条件。在一定的条件下证明利用该工艺的可行性,为进一步研究此方法分离乙醛酸奠定了基础