斑马鱼窖蛋白-1基因cDNA克隆及功能初步研究

窖蛋白-1(Cav-1)是胞膜窖的主要结构蛋白,可与多种信号分子相互作用,调节细胞的增殖、分化和凋亡,其异常表达与多种人体疾病的发生和发展密切相关,而在斑马鱼发育中的功能尚不很清楚。研究克隆出斑马鱼窖蛋白-1基因两个亚型的全长cDNA,与其他物种窖蛋白-1的氨基酸序列进行比较,发现该蛋白在脊椎动物中非常保守。利用逆转录多聚酶链反应检测发现,在斑马鱼多个成年组织中窖蛋白-1的两个亚型均有转录表达。利用胚胎整体原位杂交检测组织或器官特异基因的时空表达变化发现,过表达或利用Morpholino反义寡聚核苷酸(

周期反常性

除众所周知的氢在周期表中的位置不确定性、第二周期元素的性质的特殊性之外,本文将详细介绍d区元素的电子排布,第四周期非金属元素最高价态的不稳定性,惰性电子对效应,第五、六周期重过渡元素的相似性和次周期性以及第3族元素编排反常现象并作必要的探讨

Veterinary communication for development

研究获得了斑马鱼 nr1d4a 和 nr1d4b 基因的 cDNA,进行了序列比对和系统进化分析,并采用实时定量RT-PCR （qPCR）方法研究了其表达模式及对不同环境刺激的转录反应。研究发现,斑马鱼nr1d4a和nr1d4b是由基因复制产生的旁系同源基因,具有高度保守的DNA结合结构域和配体结合结构域。斑马鱼nr1d4a和nr1d4b的表达模式具有明显的差别。nr1d4a在胚胎发育早期的表达量很低,72 hpf时开始显著升高；而nr1d4b具有较高水平的母源性表达,6 hpf时的表达量明显降低,但也在72 hpf显著回升。nr1d4a在脑和肾脏中表达量最高,其次是鳃、卵巢、精巢和眼,在肝脏中的表达量最低； nr1d4b 在卵巢中表达量最高,其次是精巢和脑,在肠道和心脏中表达量最低。斑马鱼nr1d4a和nr1d4b都能被多种环境刺激瞬时诱导表达。16℃低温处理0.5h就能显著诱导斑马鱼nr1d4a和nr1d4b基因的表达,但处理6h后其诱导效应开始下降并逐渐消失。除低温外,重金属（2μmol/L镉）、缺氧（5%氧气）和盐度（5‰）处理均能瞬时诱导nr1d4a和nr1d4b的表达,说明 nr1d4a和nr1d4b基因可能参与斑马鱼对多种环境刺激的适应性反应。研究为深入揭示鱼类 nr1d4a和nr1d4b基因的生物学功能及其表达调控机制奠定了基础

人生长激素和转移的人生长激素基因对去垂体鱼的生长代偿效应

本文重点研究了人生长激素（GH）对去垂体鲫鱼生长的代偿功能和转移的人GH基因对去垂体镜鲤（转人GH基因F_2代）的生长代偿效应。同时还研究了去垂体鲫鱼和鲤鱼的存活率，测定了去垂体鲫鱼的几种血液成份，并初步探讨了GH在鱼体内的生物功能。发现：（1）去垂体鲫鱼和镜鲤的线性生长均停止，表明垂体在鱼类生长方面具有重要功能。（2）给去垂体鲫鱼补充人GH（2ug/g体重/10天）可恢复其线性生长，证明人GH可在鲫鱼体内部分代偿垂体功能，促进去垂体鱼的生长。（3）在转人GH基因的镜鲤F_2代体内，人GH基因稳定地整合在各种组织和器官。去垂体的转入GH基因镜鲤（F_2代）的线性生长显著，其特殊生长效应证明了外源人GH基因在镜鲤F_2代体内的表达，其表达产物同样可部分代偿垂体功能，促进去垂体镜鲤的生长。（4）切除垂体对鲫鱼和鲤鱼存活率有一定影响。在较高（25 ℃）的饲养温度条件下，切除垂体的鲤鱼和鲫鱼的存活率较低。去垂体鲤鱼的成活率比去垂体鲫鱼低。（5）手术后不久，去垂体鲫鱼的血糖值升高是对手术损伤的应激反应。切除垂体对鲫鱼的血清蛋白和胆固醇浓度影响不大，而导致其血清游离脂肪酸和游离氨基酸浓度降低。补充人GH使去垂体鲫鱼的血清氨基酸浓度进一步降低，对其游离脂肪酸浓度的影响不大

鱼类基因转移育种的几个问题

１９８５年，世界上第一批转基因鱼诞生。随后，鱼类基因转移迅速应用到培育高产、优质和抗逆的养殖鱼类新品种，并在解决发育生物学、分子生物学和生理学等方面的难题中发挥了重要作用。目前，研究者已经建立了三种成熟的鱼类基因转移方法，即显微注射、电脉冲和精子携带法，证实了转移基因在受体鱼基因组中的整合、性腺传递、表达和转译表达产物的生物活性。最近，“全鱼”生长激素（ＧＨ）基因的克隆与应用，使快速生长转ＧＨ基因鱼的研究取得了突破性进展，但仍需要解决转移基因的定点整合、稳定表达和遗传，证实转基因鱼释放的生态和食品安全性

温度刺激对斑马鱼仔鱼基因转录表达的影响

许多优良鱼类养殖品种不耐低温或高温的特点给水产养殖业带来诸多限制和困难,这些鱼类在胚胎和仔鱼等早期阶段的抗寒和抗热能力比成体更差,育苗过程中很容易受到温度突然变化的影响。虽然目前利用基因芯片技术已研究了温度刺激对几种鱼类成体组织中基因表达的影响,但温度刺激对仔鱼基因转录表达的影响还未见报道。研究以斑马鱼受精后96h的出膜仔鱼为实验材料,分别在低温（16℃）和高温（34℃）条件下处理12h和24h,用基因芯片技术检测温度刺激对其基因表达的影响。与培养在28℃的对照相比,低温和高温处理后共有3633个基因发生差异表达,其中低温处理后差异表达基因数目多于高温处理,而且低温抑制基因数目多于诱导表达基因的数目。生物信息学分析结果表明,低温诱导基因主要参与RNA加工和核糖体生物发生等生物学过程,高温诱导基因则主要参与应激反应和未折叠蛋白结合。低温抑制基因主要参与蛋白质水解、视觉感知以及铁离子结合等生物学功能,高温抑制基因参与的生物学功能包括DNA复制、神经系统过程和类固醇激素生物合成等。除了已报道的温度刺激响应基因外,研究鉴定出了大量尚未报道与温度刺激相关的基因,如参与RNA加工的rnmtl1a和pus3基因,以及参与转录调控的twistnb和aebp2基因等。研究结果为进一步揭示鱼类冷或热适应的分子机理和培养耐寒或耐热的养殖新品种提供理论基础

温度刺激对斑马鱼仔鱼基因转录表达的影响

许多优良鱼类养殖品种不耐低温或高温的特点给水产养殖业带来诸多限制和困难,这些鱼类在胚胎和仔鱼等早期阶段的抗寒和抗热能力比成体更差,育苗过程中很容易受到温度突然变化的影响。虽然目前利用基因芯片技术已研究了温度刺激对几种鱼类成体组织中基因表达的影响,但温度刺激对仔鱼基因转录表达的影响还未见报道。研究以斑马鱼受精后96h的出膜仔鱼为实验材料,分别在低温(16℃)和高温(34℃)条件下处理12h和24h,用基因芯片技术检测温度刺激对其基因表达的影响。与培养在28℃的对照相比,低温和高温处理后共有3633个基因发生差异表达,其中低温处理后差异表达基因数目多于高温处理,而且低温抑制基因数目多于诱导表达基因的数目。生物信息学分析结果表明,低温诱导基因主要参与RNA加工和核糖体生物发生等生物学过程,高温诱导基因则主要参与应激反应和未折叠蛋白结合。低温抑制基因主要参与蛋白质水解、视觉感知以及铁离子结合等生物学功能,高温抑制基因参与的生物学功能包括DNA复制、神经系统过程和类固醇激素生物合成等。除了已报道的温度刺激响应基因外,研究鉴定出了大量尚未报道与温度刺激相关的基因,如参与RNA加工的rnmtl1a和pus3基因,以及参与转录调控的twistnb和aebp2基因等。研究结果为进一步揭示鱼类冷或热适应的分子机理和培养耐寒或耐热的养殖新品种提供理论基础

转入生长激素基因红鲤F_2代阳性鱼的摄食及代谢研究

<正>生长激素(GH)是由中腺垂体分泌的多功能激素,对动物生长的促进效应已无可置疑.将冠以小鼠重金属螯合蛋白(MT-1)基因启动顺序的人生长激素(hGH)基因重组质粒pMThGH显微注射到红鲫(Carassius auratus auratus)和泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)的受精卵内,获得了第一批转基因鱼,并进一步证实了转移基因的整合、表达、传代及转GH基因鱼的快速生长效应.由于鱼类自然群体中也存在个别的快速生长个体,对转GH基因鱼快速